HiMedia M049-100G Фиолетово-красный желчный агар

Питательная агаризованная среда HiMedia M049-100G «Фиолетово-красный желчный агар» — порошковая среда для селективного выделения, обнаружения и количественного определения коли-аэрогенезных бактерий. Среда применяется при анализе воды, молока и молочных продуктов, пищевых продуктов и клинических образцов, при этом для окончательной идентификации микроорганизмов необходимы дополнительные биохимические тесты.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения, обнаружения и количественного определения коли-аэрогенезных бактерий в:

• воде;
• молоке и других молочных продуктах;
• пищевых продуктах;
• клинических образцах, включая кал.

Состав и показатели эффективности среды соответствуют требованиям ISO 4832:2010 и ISO 11133:2014 с поправкой 2:2020.

Состав

Состав по спецификации ISO

Кристаллический фиолетово-красный желчный лактозный агар (VRBL-агар):

Состав среды M049 «Фиолетово-красный желчный агар»

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных показателей эффективности.

* Пептон эквивалентен ферментативному перевару тканей животного происхождения.

Принцип действия и интерпретация

Колиформная группа включает несколько родов бактерий семейства Enterobacteriaceae. Исторически определение этой группы основывалось на способности ферментировать лактозу. Колиформные бактерии определяются как аэробные и факультативно-анаэробные грамотрицательные неспорообразующие палочковидные бактерии, ферментирующие лактозу с образованием газа и кислоты в течение 48 ч при 35 °C.

Фиолетово-красный желчный агар представляет собой модификацию исходной прописи Макконки и используется для количественного определения коли-аэрогенезной группы. Селективное действие основано на ингибирующих компонентах — кристаллическом фиолетовом и желчных солях, а также на индикаторной системе из лактозы и нейтрального красного. Рост многих сопутствующих нежелательных микроорганизмов подавляется, что позволяет предварительно идентифицировать искомые бактерии.

Микроорганизмы, быстро ферментирующие лактозу, образуют пурпурные колонии, окружённые пурпурными ореолами. Неферментирующие лактозу или медленно ферментирующие её микроорганизмы образуют бледные колонии с зеленоватыми зонами.

Селективность фиолетово-красного желчного агара может быть повышена инкубацией в анаэробных условиях и/или при повышенной температуре — не ниже 42 °C. Среда также рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) и ISO для соответствующих микробиологических исследований.

Функции компонентов:

• пептон и дрожжевой экстракт — источники углерода, азота, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• лактоза — сбраживаемый углевод, использование которого приводит к образованию кислот;
• нейтральный красный — индикатор образующейся кислотности;
• кристаллический фиолетовый и смесь желчных солей — ингибиторы сопутствующей грамположительной и неспецифической микрофлоры;
• хлорид натрия — компонент для поддержания осмотического равновесия;
• агар — желирующий компонент среды.

Фиолетово-красный желчный агар не является полностью специфичным для энтеробактерий: другие сопутствующие бактерии могут давать аналогичную реакцию. Для подтверждения идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 41,53 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Немедленно разлейте среду в стерильные чашки Петри, содержащие инокулят.
6. При необходимости среду можно стерилизовать автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление при этом составляет приблизительно 0,10 МПа (15 фунтов давления).

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно применимым методическим руководствам и стандартам.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный свободно текущий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красно-фиолетового цвета.

Реакция

Реакция 4,15%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральная реакция

Продуктивность

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч. Коэффициент восстановления рассчитывают относительно 100 % роста бактерий на референсной среде — триптон-соевом агаре.

Селективность

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

Специфичность

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 24 ± 2 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики