HiMedia M043S-500G Основа агара Бэрд-Паркера

Питательная среда HiMedia M043S-500G Основа агара Бэрд-Паркера с добавками предназначена для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков из пищевых продуктов и других материалов. Основа выпускается в виде порошка массой 500 г и после приготовления используется с эмульсией яичного желтка и теллуритным раствором.

Назначение

Основа агара Бэрд-Паркера применяется для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков, включая Staphylococcus aureus, из пищевых продуктов и других материалов.

Идентификацию выделенных на агаре Бэрд-Паркера колоний Staphylococcus aureus необходимо подтверждать реакцией на коагулазу.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 65 г порошка в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один из вариантов добавок:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка FD045 и 3 мл стерильного 3,5%-ного раствора теллурита калия FD047;
   • 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом FD046.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Предупреждение по безопасности

Хлорид лития вреден. Избегайте контакта с кожей и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно промойте большим количеством воды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар Бэрд-Паркера разработан Baird-Parker на основе теллуритно-глициновой рецептуры Zebovitz и предназначен для выделения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов.

Пируват натрия защищает повреждённые клетки и способствует их восстановлению. Хлорид лития и теллурит калия подавляют большинство сопутствующих микроорганизмов, за исключением Staphylococcus aureus. Глицин и пируват усиливают рост стафилококков.

После добавления яичного желтка среда становится жёлтой и непрозрачной. Протеолитические бактерии образуют прозрачную зону вокруг колонии в средах, содержащих яичный желток. Прозрачная зона и серо-чёрные колонии на этой среде являются диагностическими признаками коагулазоположительных стафилококков.

При дальнейшем инкубировании вокруг колоний формируется непрозрачная зона, появление которой может быть связано с липолитической активностью.

Альтернативный метод выявления коагулазной активности

Основа агара Бэрд-Паркера может использоваться для выявления коагулазной активности при замене эмульсии яичного желтка смесью фибриногена плазмы.

Для приготовления добавки:

• растворите 375 мг бычьего фибриногена;
• добавьте 2,5 мл кроличьей плазмы;
• добавьте 2,5 мг ингибитора трипсина;
• добавьте 2,5 мг теллурита калия;
• растворите компоненты в 10 мл стерильной дистиллированной воды;
• внесите полученную смесь в 90 мл стерильной расплавленной среды, охлаждённой до 45–50 °C;
• тщательно перемешайте и разлейте среду по чашкам.

На этой среде коагулазоположительные колонии стафилококков через 24–40 ч инкубирования при 35 °C имеют белую или серо-чёрную окраску и окружены непрозрачной зоной коагулазной активности.

При отсутствии эмульсии яичного желтка необходимо уменьшить количество теллурита. В результате агар становится прозрачным, а колонии стафилококков приобретают белую или серую окраску.

Для количественного определения:

1. Отберите чашки, содержащие от 20 до 200 колоний.
2. Подсчитайте колонии, похожие на колонии Staphylococcus aureus.
3. Проверьте отобранные колонии реакцией на коагулазу.
4. Рассчитайте и укажите содержание Staphylococcus aureus в пересчёте на 1 г пищевого продукта.
5. Независимо от отрицательных реакций сомнительные колонии следует рассматривать как Staphylococcus aureus и подвергать дальнейшему исследованию.

Колонии некоторых сопутствующих микроорганизмов могут разрушать ореол коагулазной реакции.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка и теллуритной эмульсии: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 6,5%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления эмульсии яичного желтка и теллуритной эмульсии FD045 и FD052, после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Хранение и срок годности

• Температура хранения порошка: ниже 30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• Указанный диапазон температуры: 10–30 °C.

Технические характеристики