HiMedia M043S-500G Основа агара Бэрд-Паркера

Основа сухой питательной среды HiMedia M043S-500G Основа агара Бэрд-Паркера для изоляции и подсчета коагулазеположительных стафилококков. Применяется для анализа пищевых продуктов и других материалов; состав соответствует спецификациям IS: 5887 (Part II) 1976.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Бэрд-Паркера разработана для изоляции Staphylococcus aureus из пищевых продуктов. Данный состав обладает более высокой селективностью и меньшим ингибирующим действием на S. aureus по сравнению с другими средами. Рекомендована ISO и USP (для тестов на микробиологическую чистоту).

Механизм действия компонентов:

• Пируват натрия: защищает поврежденные клетки и способствует их восстановлению.
• Хлорид лития и теллурит калия: подавляют рост большинства contaminating-микрофлоры, за исключением S. aureus.
• Глицин и пируват: стимулируют рост стафилококков.
• Яичный желток: придает среде желтый непрозрачный вид. Протеолитические бактерии создают прозрачную зону вокруг колонии.

Интерпретация результатов: Диагностическим признаком коагулазеположительных стафилококков являются серо-черные колонии с прозрачной зоной вокруг них. При дальнейшей инкубации может появиться непрозрачная зона, что свидетельствует о липолитической активности. Идентификация S. aureus должна быть подтверждена реакцией на коагулазу.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Растворите 65 г основы в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один из вариантов добавок:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл стерильного 3,5% раствора теллурита калия (FD047);
   • либо 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Предупреждение: Хлорид лития вреден. Избегайте контакта с кожей и вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно промойте большим количеством воды.

Определение коагулазной активности (альтернативный метод)

Вместо эмульсии яичного желтка можно использовать смесь плазмы и фибриногена:

1. Растворите 375 мг бычьего фибриногена, 2,5 мл кроличьей плазмы, 2,5 мг ингибитора трипсина и 2,5 мг теллурита калия в 10 мл стерильной дистиллированной воды.
2. Добавьте этот раствор к 90 мл стерильной расплавленной среды (температура 45–50 °C).
3. Перемешайте и разлейте по чашкам.
4. Инкубируйте при 35 °C в течение 24–40 часов. Коагулазеположительные колонии будут белыми или серо-черными с окружающей их непрозрачной зоной активности.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0% агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления эмульсии желтка и теллурита: желтый непрозрачный гель.
• Реакция: pH 6,5% (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,0 $\pm$ 0,2.

Культуральные характеристики

Характеристики определены с добавлением эмульсии яичного желтка и теллурита (FD045 и FD052) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.