HiMedia M043S-100G Основа агара Бэрд-Паркера

Компонент питательной среды HiMedia M043S-100G Основа агара Бэрд-Паркера — порошкообразная основа массой 100 г для приготовления селективной среды с конечным pH 7,0 ± 0,2. Применяется для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков, включая Staphylococcus aureus, из пищевых продуктов и других материалов; рабочая температура хранения сухого компонента — ниже 30 °C.

Назначение

Основа агара Бэрд-Паркера с добавками предназначена для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков из пищевых продуктов и других материалов.

Среда разработана Baird-Parker на основе теллурит-глициновой формулы Zebovitz и предназначена для выделения Staphylococcus aureus из пищевых продуктов. Идентификацию выделенных на агаре Бэрд-Паркера Staphylococcus aureus необходимо подтверждать реакцией на коагулазу.

Среда может применяться для:

• выделения и количественного определения стафилококков;
• обнаружения коагулазоположительной активности;
• микробиологического контроля пищевых продуктов и других материалов;
• количественного определения Staphylococcus aureus с расчётом содержания на грамм пищевого продукта.

Формула с повышенным содержанием пирувата рекомендована Бюро индийских стандартов для выделения Staphylococcus aureus в соответствии с IS 5887 (часть II), 1976. Среда также адаптирована AOAC, рекомендована USP для микробиологического предельного испытания и ISO для выделения и количественного определения стафилококков.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20
• Температурный режим, указанный для товара: 10–30 °C

Приготовление среды

1. Взвесьте 65 г порошка и суспендируйте в 950 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 50 °C.
5. В асептических условиях добавьте один из вариантов добавок:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка FD045 и 3 мл стерильного 3,5%-ного раствора теллурита калия FD047;
   • 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом FD046.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда менее ингибирующая для Staphylococcus aureus, чем ряд других питательных сред, и одновременно обладает селективностью в отношении стафилококков.

Пируват натрия защищает повреждённые клетки и способствует их восстановлению. Хлорид лития и теллурит калия подавляют большинство сопутствующих микроорганизмов, за исключением Staphylococcus aureus. Глицин и пируват усиливают рост стафилококков.

После добавления эмульсии яичного желтка среда становится жёлтой и непрозрачной. Протеолитические бактерии образуют вокруг колоний прозрачную зону в средах, содержащих яичный желток. Прозрачная зона и серо-чёрные колонии на этой среде являются диагностическими признаками коагулазоположительных стафилококков.

При дальнейшем инкубировании вокруг колоний может развиваться непрозрачная зона, связанная с липолитической активностью.

Добавление 50 мг/л сульфаметазина подавляет рост и роение бактерий рода Proteus.

Некоторые контаминирующие микроорганизмы могут разрушать ореол коагулазной реакции.

Методика выявления коагулазной активности с плазмой и фибриногеном

Основа агара Бэрд-Паркера также может использоваться для выявления коагулазной активности при добавлении смеси плазмы и фибриногена вместо эмульсии яичного желтка.

Для приготовления добавки:

• растворите 375 мг бычьего фибриногена;
• добавьте 2,5 мл кроличьей плазмы;
• добавьте 2,5 мг ингибитора трипсина;
• добавьте 2,5 мг теллурита калия;
• растворите компоненты в 10 мл стерильной дистиллированной воды;
• внесите полученную смесь в 90 мл стерильной расплавленной среды, выдерживаемой при 45–50 °C;
• тщательно перемешайте;
• разлейте среду в чашки.

На такой среде коагулазоположительные колонии стафилококков через 24–40 ч инкубации при 35 °C имеют окраску от белой до серо-чёрной и окружены непрозрачной зоной коагулазной активности.

При отсутствии эмульсии яичного желтка необходимо снизить концентрацию теллурита. В результате образуется полупрозрачный агар, а колонии стафилококков имеют окраску от белой до серой.

Для получения количественных результатов:

1. Отберите чашки, содержащие 20–200 колоний.
2. Подсчитайте колонии, типичные для Staphylococcus aureus.
3. Проверьте отобранные колонии на коагулазную реакцию.
4. Рассчитайте и укажите содержание Staphylococcus aureus в пересчёте на 1 г пищевого продукта.
5. Независимо от отрицательных реакций считайте все сомнительные колонии Staphylococcus aureus и проведите дополнительные исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободнотекучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка и эмульсии теллурита: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 6,5%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральная характеристика

Культуральные характеристики определяют после добавления эмульсии яичного желтка и эмульсии теллурита FD045 и FD052, после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.