HiMedia M043I-500G Основа агара Бэрд-Паркера

Основа питательной среды HiMedia M043I-500G Основа агара Бэрд-Паркера — порошковый компонент для приготовления селективной среды с конечным pH 7,2 ± 0,2. Применяется для количественного определения коагулазоположительных стафилококков в пищевых продуктах и кормах для животных; температура хранения — 10–30 °C.

Назначение

Основа агара Бэрд-Паркера предназначена для приготовления среды для выделения и количественного определения коагулазоположительных стафилококков в пищевых образцах и кормах для животных.

Состав и показатели эффективности соответствуют требованиям ISO 6888-1:1999 / Amd:2018 и ISO 11133:2014 & Amd. 2:2020. Испытание среды выполняют согласно ISO 11133:2014.

Состав среды

Спецификация ISO — агар Бэрд-Паркера

Содержание компонентов указано в г/л.

Основа агара Бэрд-Паркера M0431

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным показателям эффективности.

• Триптон эквивалентен панкреатическому перевару казеина.
• Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту.

Добавки после автоклавирования на 1000 мл среды

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар Бэрд-Паркера был разработан Baird Parker на основе теллурит-глициновой рецептуры Zebovitz и соавторов для выделения и количественного определения Staphylococci в пищевых продуктах и других материалах. Среда обеспечивает дифференциацию стафилококков.

Между коагулазной реакцией и наличием прозрачной зоны липолиза на этой среде выявлена высокая корреляция. Прозрачная зона образуется вследствие действия лецитиназы Staphylococci, которая расщепляет яичный желток. Исследования показывают, что почти 100 % коагулазоположительных Staphylococci способны восстанавливать теллурит с образованием чёрных колоний, тогда как другие Staphylococci не всегда обладают такой способностью.

Идентификация выделенного на агаре Бэрд-Паркера Staphylococcus aureus должна быть подтверждена коагулазной реакцией. Среда также может применяться для выявления коагулазной активности при добавлении плазмы с фибриногеном.

Добавление сульфаметазина в концентрации 50 мг/л подавляет рост и роение видов Proteus.

Триптон, экстракт HM и дрожжевой экстракт являются источниками азота, углерода, серы и витаминов. Пируват натрия защищает повреждённые клетки, способствует их восстановлению и стимулирует рост Staphylococcus aureus, не разрушая селективность среды.

Хлорид лития и теллурит калия ингибируют большинство контаминирующих микроорганизмов, за исключением Staphylococcus aureus. Добавка теллурита токсична для штаммов, образующих зоны просветления яичного желтка, за исключением S. aureus, и придаёт колониям серую или чёрную окраску.

Глицин и пируват усиливают рост Staphylococcus. После добавления яичного желтка среда становится жёлтой и непрозрачной. Добавка яичного желтка не только обогащает среду, но и помогает идентификации микроорганизмов за счёт выявления лецитиназной активности — реакции с яичным желтком.

Прозрачная зона и серо-чёрные колонии на этой среде являются диагностическими признаками коагулазоположительных Staphylococci. При дальнейшей инкубации вокруг колоний образуется непрозрачная зона, которая может быть обусловлена липолитической активностью.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 58,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 10 мл стерильной 1%-ной селективной добавки PTe (1 мл во флаконе) (FD052).
6. При необходимости добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки BP S (FD069).
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Корма для животных.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• После добавления эмульсии яичного желтка и раствора теллурита: в чашках Петри образуется жёлтый непрозрачный гель.

Реакция

Реакция 5,8%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральную реакцию оценивают после добавления эмульсии яичного желтка (FD045) и стерильной 1%-ной селективной добавки PTe (FD052), после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 2–48 ± 2 ч.

Коэффициент восстановления принимают за 100 % для роста бактерий на эталонной среде