HiMedia M043I-500G Основа агара Бэрд-Паркера

Основа агара Бэрд-Паркера HiMedia M043I-500G предназначена для подсчета коагулазеположительных стафилококков в пищевых продуктах и кормах для животных. Состав и критерии эффективности соответствуют стандартам ISO 6888-1:1999 / Amd:2018 и ISO 11133:2014 & Amd. 2:2020 (E).

Принцип измерения

Среда Бэрд-Паркера разработана для изоляции и подсчета Staphylococci в пищевых продуктах и других материалах благодаря высокой дифференцирующей способности.

Основные механизмы селективности и идентификации:

• Дифференциация: лецитиназа стафилококков расщепляет лецитин яичного желтка, что приводит к образованию прозрачной зоны липолиза вокруг колоний. Существует высокая корреляция между этим признаком и положительной коагулазной реакцией.
• Селективность: хлорид лития и теллурит калия подавляют рост большинства contaminating-микрофлоры. Почти 100 % коагулазеположительных стафилококков способны восстанавливать теллурит, что придает колониям серый или черный цвет.
• Стимуляция роста: пируват натрия защищает поврежденные клетки, способствует их восстановлению и стимулирует рост Staphylococcus aureus.
• Подавление сопутствующей флоры: добавление 50 мг/л сульфамезатина подавляет рост и «роение» (swarming) видов Proteus.

Триптон, экстракт HM и дрожжевой экстракт служат источниками азота, углерода, серы и витаминов.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 58,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 10 мл стерильного селективного дополнения PTe 1 % (FD052).
6. При необходимости добавьте содержимое одной ампулы селективного дополнения BP S (FD069).
7. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура анализа

• Тип образцов: пищевые продукты, корма для животных.
• Сбор и обработка: согласно руководствам ISO 6888-1 и ISO 11133.
• Инкубация: 37 $\pm$ 1 °C в течение 24 $\pm$ 2 — 48 $\pm$ 2 часов.
• Интерпретация: диагностическим признаком коагулазеположительных стафилококков являются серо-черные колонии с прозрачным ореолом (реакция расщепления яичного желтка). При дальнейшей инкубации вокруг колоний может появиться опалесцирующая зона вследствие липолитической активности.

Технические характеристики

Состав среды

Спецификация ISO (Baird-Parker agar medium), г/л:

Основа агара Бэрд-Паркера M043I, г/л:

• pH после стерилизации (при 25 °C): 7,2 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Добавки (на 1000 мл среды, вносятся после автоклавирования)

Общие параметры

Культуральные характеристики

Испытания проводились с добавлением эмульсии яичного желтка (FD045) и селективного дополнения PTe 1 % (FD052) при инкубации 37 $\pm$ 1 °C в течение 24–48 часов. Степень восстановления считается 100 % при росте на контрольной среде — соево-казеиновом-дрожжевом агаре (Tryptone Soya Agar).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

• Идентификация Staphylococcus aureus, выделенных на данной среде, должна быть обязательно подтверждена коагулазной пробой.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.