Основа агара Бэрда-Паркера HiMedia M043-500G (уп/500 гр)

Диагностическая основа агара Бэрда-Паркера HiMedia M043-500G (уп/500 г) для выделения и подсчета коагулазоположительных стафилококков. Применяется при анализе пищевых продуктов, молочной продукции и клинических образцов; соответствует ГОСТ Р 54354-2011 и имеет сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана для дифференциации коагулазоположительных штаммов стафилококков. В основе метода лежит способность стафилококков восстанавливать теллурит, что приводит к образованию черных колоний. Высокая корреляция наблюдается между коагулазным тестом и наличием зоны липолиза (светлого ореола), которая возникает из-за расщепления лецитина яичного желтка лецитиназой стафилококков.

Среда менее ингибирует рост Staphylococcus aureus по сравнению с аналогичными составами, оставаясь при этом высокоселективной. Метод рекомендован AOAC International, USP (для микробиологических тестов на ограничение загрязнения) и комитетом ISO.

Интерпретация результатов:

• Колонии Staphylococcus aureus выглядят черными, блестящими, с тонким белым краем, окружены светлой зоной липолиза.
• При дальнейшей инкубации вокруг колоний может развиться непрозрачная зона (результат липолитической активности).
• Идентификация S. aureus должна быть подтверждена коагулазной реакцией.

Состав

Состав, г/л:

Значение pH (при 25 °C): 7,0 ± 0,2.

Методика приготовления и проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 63,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,08 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 50 °C.
5. Асептически добавьте один из вариантов добавок:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл стерильного 3,5% раствора теллурита калия (FD047, по 1 мл на флакон);
   • либо 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).
6. Для повышения селективности (по желанию) добавьте содержимое одного флакона добавки BP S (FD069).
7. В качестве альтернативы для идентификации коагулазоположительных стафилококков можно использовать ингибитор FPT (FD195) из расчета 1 флакон на 90 мл среды (вместо эмульсии FD046).
8. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа

1. Внесите исследуемый материал (0,1 мл на чашку диаметром 90–100 мм).
2. Инкубируйте при 37 °C.
3. Проведите первый считывание результатов через 24–26 часов.
4. Инкубируйте еще 24 часа при 37 °C, после чего проведите коагулазный тест для колоний с характерными признаками.
5. Для количественного анализа выберите образцы с 20–200 колониями.

Технические характеристики

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0% агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления эмульсии желтка и теллурита: желтый непрозрачный гель.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдались после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов. Скорость восстановления считается 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Область применения и ограничения

Типы образцов:

• Клинические образцы: гной, мазки из ран.
• Пищевые и молочные продукты.

Ограничения:

• Несмотря на селективность к коагулазоположительным S. aureus, возможен рост других бактерий.
• Индивидуальные организмы могут демонстрировать вариативность в паттернах роста.
• Возможны незначительные отклонения в росте в зависимости от источника выделения штамма.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре от +10 до +30 °C (рекомендуется ниже +25 °C).
• Хранение готовой среды: при температуре от +2 до +8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Особенности: из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.
• Рекомендация: для достижения наилучших результатов среду следует готовить ex tempore и использовать в кратчайшие сроки. Готовые чашки должны быть использованы в день приготовления или в течение 48 часов.

Совместимые компоненты и добавки

Для приготовления полноценной среды поставляются следующие компоненты:

• + FD046 Эмульсия яичного желтка с теллуритом (100 мл)
• + FD045 Эмульсия яичного желтка (100 мл)
• + FD047 Раствор теллурита калия 3,5% (упаковка из 2 флаконов по 10 мл)
• + FD069 Добавка с сульфаметазином для среды Бэрда-Паркера (подавляет рост и роение видов Proteus)