HiMedia M043-100G Основа агара Бэрд-Паркера

Основа сухой питательной среды HiMedia M043-100G Основа агара Бэрд-Паркера для выделения и количественного определения коагулазеположительных стафилококков. Применяется при анализе пищевых продуктов, молочной продукции и клинических образцов; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения

Среда разработана для дифференциации коагулазеположительных штаммов стафилококков. Принцип основан на способности стафилококков восстанавливать теллурит, что приводит к образованию чёрных колоний. Наличие прозрачной зоны липолиза вокруг колоний обусловлено действием лецитиназы стафилококков, которая расщепляет яичный желток.

Компоненты среды:

• Триптон, пептон HM B и экстракт дрожжей: источники азота, углерода, серы и витаминов.
• Пируват натрия: защищает повреждённые клетки, стимулирует рост Staphylococcus aureus без потери селективности.
• Хлорид лития и теллурит калия: ингибируют большинство сопутствующей микрофлоры. Теллурит токсичен для штаммов, расщепляющих желток, кроме S. aureus, и придает колониям чёрный цвет.
• Глицин и пируват: усиливают рост стафилококков.
• Яичный желток: служит источником обогащения и позволяет идентифицировать лецитиназную активность (реакция с желтком).

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 63,0 г порошка в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 50 °C.
5. Асептически добавить один из вариантов добавок:
   • 50 мл концентрированной эмульсии яичного желтка (FD045) и 3 мл стерильной селективной добавки PTe 3,5 % (FD047).
   • Или 50 мл эмульсии яичного желтка с теллуритом (FD046).
   • Для повышения селективности можно добавить содержимое 1 флакона селективной добавки BP S (FD069).
   • В качестве альтернативы для идентификации коагулазеположительных стафилококков вместо эмульсии FD046 можно использовать 1 флакон ингибитора FPT (FD195) на 90 мл среды.
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Процедура посева и считывания результатов

1. Инокулировать исследуемый материал (0,1 мл на чашку диаметром 90–100 мм).
2. Инкубировать при 37 °C.
3. Первый подсчёт произвести через 24–26 часов. Колонии Staphylococcus aureus характеризуются чёрным блестящим цветом с тонким белым ободком и прозрачной зоной вокруг.
4. Инкубировать при 37 °C ещё 24 часа.
5. Провести тест на коагулазу для колоний с вышеуказанными характеристиками.
6. Для количественного анализа отобрать 20–200 колоний, похожих на S. aureus, и подтвердить их коагулазной реакцией.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечный pH (при 25 °C): 7,0 $\pm$ 0,2

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность: базовая среда — жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления эмульсии желтка и теллурита — жёлтый непрозрачный гель.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Область применения

Рекомендуется для выделения и подсчёта коагулазеположительных стафилококков в следующих образцах:

• Пищевые продукты и молочная продукция.
• Клинические образцы: гной, содержимое ран.

Культуральные характеристики

Инкубация при 35–37 °C в течение 24–48 часов. Степень восстановления (Recovery) указана относительно роста на агаре с казеином-соевым дигестом (принято за 100 %).

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать флакон для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Срок использования готовых чашек: в день приготовления или в течение 48 часов для сохранения чёткости зон осаждения.

Ограничения и предостережения

• Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального использования.
• Несмотря на селективность к S. aureus, возможен рост других бактерий.
• Индивидуальные штаммы могут демонстрировать вариативность паттернов роста.
• Требуется соблюдение стандартных мер предосторожности при работе с клиническими образцами и культурами.
• Контаминированные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации.