HiMedia M032-100G Основа тетратионатного бульона (без йода)

Компонент селективной обогатительной питательной среды HiMedia M032-100G Основа тетратионатного бульона (без йода) производства HiMedia — порошковая основа для выделения бактерий рода Salmonella. Применяется для обогащения клинических, пищевых и других санитарно значимых образцов; готовая среда требует добавления раствора йода и бриллиантового зелёного, автоклавирование не допускается.

Назначение

Основа предназначена для приготовления селективной обогатительной среды, используемой при выделении Salmonella из пищевых продуктов и патологического материала.

Готовая тетратионатная среда с добавлением раствора йода и бриллиантового зелёного применяется для селективного обогащения Salmonella, включая Salmonella Typhi, из:

• клинических образцов;
• фекалий;
• мочи;
• пищевых образцов;
• молочных продуктов;
• других материалов санитарного значения.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик среды.

Принцип действия и интерпретация

Salmonella широко распространены в окружающей среде. По сравнению с колиформными микроорганизмами бактерии Salmonella обычно присутствуют в небольшом количестве, поэтому для их выделения необходимо исследовать относительно большой объём образца.

Salmonella, присутствующие в пищевых образцах, могут получить сублетальные повреждения на различных этапах обработки пищевых продуктов вследствие воздействия низких температур, нагревания, высушивания, радиации и различных химических веществ. Повреждённые клетки сохраняют способность вызывать порчу продуктов и при попадании в организм могут приводить к заболеваниям при благоприятных условиях. Поэтому перед количественным определением необходимо обеспечить восстановление повреждённых бактерий.

При добавлении йода и йодида калия в среде образуется тетратионат. В среде растут микроорганизмы, обладающие ферментом тетратионатредуктазой.

• Триптон и пептон служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ.
• Желчные соли подавляют сопутствующие грамположительные микроорганизмы.
• Селективность среды определяется совместным действием тиосульфата и тетратионата, подавляющих комменсальные колиформные микроорганизмы.
• Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата.
• Бриллиантовый зелёный дополнительно повышает селективность в отношении Salmonella за счёт подавления сопутствующих бактерий.

Среда первоначально разработана Mueller и рекомендована APHA для обогащения при выделении Salmonella.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 46,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию только до кипения.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите среду до температуры ниже 45 °C.
5. Приготовьте раствор йода: 6 г йода и 5 г йодида калия растворите в 20 мл дистиллированной воды.
6. Добавьте в охлаждённую среду 20 мл раствора йода.
7. Добавьте 10 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
8. Тщательно перемешайте.
9. Разлейте среду порциями по 10 мл.

Готовую среду необходимо использовать в день приготовления. В противном случае стерилизованная основа бульона может храниться некоторое время.

После добавления раствора йода среду не нагревать. Использовать среду сразу после добавления йода.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда имеет опалесцирующий вид и содержит белый осадок.

Методика проведения анализа

1. Асептически внесите исследуемый образец в тетратионатную среду с добавленными растворами йода и бриллиантового зелёного.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. После инкубации выделите микроорганизмы посевом обогащённой культуры на селективные питательные среды.
4. Для дальнейшего подтверждения выполните штриховой посев обогащённых культур на чашки с:
   • агаром с бриллиантовым зелёным (M016);
   • агаром МакКонки (M081);
   • бисмут-сульфитным агаром (M027).

Для обогащения и выделения применяйте стандартные лабораторные процедуры.

Типы образцов

• Клинический материал: фекалии, моча, другие материалы санитарного значения.
• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов соблюдайте соответствующие методы обращения с материалом согласно утверждённым руководствам.

Для пищевых и молочных образцов соблюдайте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно утверждённым руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательного подтверждения после инкубации необходимо пересевать обогащённые культуры на чашки с агаром с бриллиантовым зелёным (M016), агаром МакКонки (M081) и бисмут-сульфитным агаром (M027).

Контроль качества

Внешний вид порошка

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Полная среда с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода: раствор светло-зелёного цвета, опалесцирующий, с обильным белым осадком. При отстаивании осадок оседает.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после обогащения в тетратионатной среде с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода, последующего пересева на агар МакКонки (M081) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M032-100G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: