HiMedia M031-5KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD)

Питательная агаризованная среда HiMedia M031-5KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD) — селективно-дифференциальная среда для выделения и количественного определения представителей рода Salmonella. Среда применяется при анализе клинических и не клинических образцов, включая фекалии, пищевые продукты, молочные продукты и воду, при этом ингибирует грамположительные микроорганизмы.

Назначение

Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD) рекомендован для выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов рода Salmonella из клинических и не клинических образцов.

Типы образцов:

• клинические образцы — фекалии;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 5 кг

Принцип действия и интерпретация

XLD-агар применяется для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и микробиологического исследования. Среда предназначена для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, среди других видов Salmonella в пищевых продуктах, воде и молочных продуктах.

Среда содержит следующие функциональные компоненты:

• дрожжевой экстракт — источник азота и витаминов, необходимых для роста микроорганизмов;
• ксилоза, лактоза и сахароза — источники сбраживаемых углеводов;
• ксилоза — основной дифференцирующий углевод, поскольку не сбраживается бактериями рода Shigella, но практически всеми другими энтеробактериями;
• хлорид натрия — поддерживает осмотический баланс среды;
• лизин — используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов;
• лактоза и сахароза — предотвращают щелочную реверсию реакции у лизин-положительных колиформных бактерий;
• феноловый красный — индикатор изменения pH;
• тиосульфат натрия и цитрат аммония железа — система выявления образования сероводорода;
• дезоксихолат натрия — селективный агент, ингибирующий грамположительные микроорганизмы.

Ксилоза, лактоза и сахароза сбраживаются с образованием кислоты, в результате чего феноловый красный изменяет цвет среды на жёлтый. Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по красному окрашиванию вокруг колоний, связанному с повышением pH.

Бактерии рода Salmonella быстро сбраживают ксилозу и исчерпывают её запас. После этого фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов, что приводит к восстановлению щелочного pH и появлению реакции, напоминающей реакцию Shigella. Для предотвращения такой реакции у лизин-положительных колиформных бактерий в состав включены лактоза и сахароза, образующие избыток кислоты.

Реакции могут протекать одновременно или последовательно. При этом индикатор pH может приобретать различные оттенки, а при длительной инкубации изменять цвет с жёлтого на красный.

Образование сероводорода выявляется по системе, включающей тиосульфат натрия и цитрат аммония железа: образуются колонии с чёрными центрами. Непатогенные микроорганизмы, продуцирующие сероводород, не декарбоксилируют лизин; поэтому образуемая ими кислая реакция препятствует почернению колоний.

XLD-агар является одновременно селективной и дифференциальной средой. По сравнению с другими плотными средами, включая SS-агар (M108), агар Эндо (EMB, M022) и висмут-сульфитный агар (M027), среда предназначена для повышения селективности и чувствительности выделения целевых микроорганизмов. Формула среды препятствует избыточному росту других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella.

Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены совместно со смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полутвёрдой основе среды RV (M1482).

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,68 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте суспензию при частом перемешивании до кипения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Сразу перенесите среду на водяную баню с температурой 50 °C.
5. После охлаждения разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие продолжительного нагревания: это может привести к образованию осадка.

Небольшое выпадение осадка возможно и является свойством среды; осадок не влияет на рабочие характеристики.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными методиками.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки образцов в соответствии с методиками.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с методиками и местными нормативами.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Продукт предназначен для диагностики in vitro и профессионального применения.

При работе с продуктом:

• прочитайте маркировку до вскрытия контейнера;
• используйте защитные перчатки;
• используйте защитную одежду;
• применяйте средства защиты глаз;
• применяйте средства защиты лица;
• соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами;
• при работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности;
• при необходимости обращайтесь к паспортам безопасности соответствующих материалов.

Ограничения применения

1. Возможно небольшое выпадение осадка; это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.
2. Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
3. Некоторые штаммы Proteus могут давать окрашивание от красного до жёлтого, при этом большинство колоний образует чёрные центры, что может приводить к ложноположительным реакциям.
4. Неэнтеробактерии, включая Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
5. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без продукции сероводорода, напоминая виды рода Shigella.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция

Реакция 5,67%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,4 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 7,20–7,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. Степень восстановления принята за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.