HiMedia M031-2.5KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD)

Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD) HiMedia M031-2.5KG — сухая селективно-дифференциальная питательная среда с конечным pH 7,4 ± 0,2. Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар применяют для выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella из клинических и не клинических образцов, при этом натриевый дезоксихолат подавляет рост грамположительных микроорганизмов.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов Salmonella из следующих образцов:

• клинические образцы, включая фекалии;
• пищевые и молочные продукты;
• образцы воды.

Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар предназначен для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и микробиологического контроля. Среда применяется для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, среди других видов Salmonella в пищевых продуктах, воде и молочных продуктах.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация результатов

Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар является селективной и дифференциальной средой. Селективным агентом служит дезоксихолат натрия, поэтому среда ингибирует грамположительные микроорганизмы.

Дрожжевой экстракт обеспечивает микроорганизмы азотом и витаминами, необходимыми для роста. Ксилоза, лактоза и сахароза являются источниками ферментируемых углеводов. Ксилоза включена в состав в первую очередь потому, что не ферментируется шигеллами, но ферментируется практически всеми энтеробактериями, что позволяет дифференцировать виды Shigella.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов. Salmonella быстро ферментирует ксилозу и расходует её запас. После этого фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов, что приводит к возврату щелочного pH и имитирует реакцию Shigella.

Для предотвращения такой реакции у лизин-положительных колиформных бактерий в состав добавлены лактоза и сахароза, образующие избыток кислоты. Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот вызывает изменение цвета индикатора фенолового красного на жёлтый.

Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красной окраски вокруг колоний вследствие повышения pH. Эти реакции могут протекать одновременно или последовательно, поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или менять цвет с жёлтого на красный.

Для дополнительной дифференциации в среду включена система выявления H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония и железа. Образующийся сероводород визуализируется по формированию колоний с чёрными центрами. Непатогенные микроорганизмы, продуцирующие H₂S, не декарбоксилируют лизин; образующаяся при этом кислая реакция препятствует почернению колоний.

По селективности и чувствительности среда отличается от других плотных сред, включая агар SS (M108), агар ЭМБ (M022) и висмут-сульфитный агар (M027): формула XLD препятствует чрезмерному росту других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella. Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены совместно со смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полужидкой основе среды RV (M1482).

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,68 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до кипения среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Сразу перенесите среду на водяную баню с температурой 50 °C.
5. После охлаждения разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие продолжительного нагревания, поскольку это может привести к образованию осадка.

В среде может образовываться небольшое количество осадка. Это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным стандартам.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Применять для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. В среде может образовываться небольшое количество осадка; это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.
2. Среда является универсальной и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
3. Некоторые штаммы Proteus могут формировать окраску от красной до жёлтой, при этом большинство колоний развивает чёрные центры, что приводит к ложноположительным реакциям.
4. Неэнтеробактерии, такие как Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
5. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут формировать красные колонии без образования H₂S, имитируя виды Shigella.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция среды

Реакция 5,67%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. Степень восстановления принята за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.