HiMedia M031-10KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD)

Питательная микробиологическая среда HiMedia M031-10KG Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD) — порошкообразный агар для выделения и количественного определения представителей рода Salmonella. Среда применяется для анализа клинических, пищевых, молочных и водных образцов, при этом может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов рода Salmonella из клинических и неклинических образцов.

Тип изделия: агар
Форма выпуска: порошок
Масса: 10 кг
Производитель: HiMedia
Тип упаковки: HDPE
Происхождение: животное

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных показателей эффективности среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 56,68 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до закипания среды.
3. Не автоклавируйте и не перегревайте среду.
4. Немедленно перенесите среду на водяную баню с температурой 50 °C.
5. После охлаждения разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие длительного нагревания, поскольку это может привести к образованию осадка.

В среде может наблюдаться незначительное выпадение осадка; это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.

Принцип действия и интерпретация

Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар является селективной и дифференциальной средой для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и микробиологического контроля. Среда предназначена для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, среди других видов Salmonella в пищевых продуктах, воде и молочных продуктах.

Селективным агентом служит дезоксихолат натрия, поэтому среда подавляет рост грамположительных микроорганизмов. Формуляция препятствует чрезмерному разрастанию других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella.

Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены совместно со смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полужидкой основе среды RV (M1482).

Механизм дифференциации компонентов среды:

• Дрожжевой экстракт обеспечивает азот и витамины, необходимые для роста микроорганизмов.
• Ксилоза, лактоза и сахароза являются источниками ферментируемых углеводов.
• Ксилоза включена в состав для дифференциации видов Shigella, поскольку Shigella не ферментирует ксилозу, тогда как практически все кишечные бактерии способны её ферментировать.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• L-лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов.
• Salmonella быстро ферментирует ксилозу и исчерпывает её запас. Затем фермент лизиндекарбоксилаза декарбоксилирует лизин с образованием аминов, что вызывает возврат среды к щелочному pH и имитирует реакцию Shigella.
• Для предотвращения аналогичной реакции у лизинположительных колиформ в состав введены лактоза и сахароза, образующие избыток кислоты.
• Разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислот изменяет цвет индикатора фенолового красного на жёлтый.
• Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по появлению красной окраски вокруг колоний вследствие повышения pH.
• Реакции могут протекать одновременно или последовательно, поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или изменять цвет с жёлтого на красный.
• Для дополнительной дифференциации предусмотрена система индикации H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония железа. Образующийся сероводород визуализируется появлением колоний с чёрными центрами.
• Непатогенные микроорганизмы, продуцирующие H₂S, не декарбоксилируют лизин, поэтому образующаяся кислая реакция препятствует почернению колоний.

По сравнению с другими плотными средами, включая агар SS (M108), агар ЭМБ (M022) и висмут-сульфитный агар (M027), ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар характеризуется иной селективно-дифференциальной системой на основе дезоксихолата натрия, ксилозы, лизина, фенолового красного и системы индикации H₂S.

Образцы

Типы образцов:

• клинические образцы — фекалии;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Сбор и обработка образцов

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно руководствам.
• Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Правила безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

1. В среде может наблюдаться незначительное выпадение осадка; это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.
2. Среда является универсальной и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
3. Некоторые штаммы Proteus могут давать окраску от красной до жёлтой у большинства колоний с образованием чёрных центров, что приводит к ложноположительным реакциям.
4. Некишечные микроорганизмы, такие как Pseudomonas и Providencia, могут формировать красные колонии.
5. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без H₂S, имитируя виды Shigella.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция среды

Реакция: для 5,67%-ного водного раствора по массе/объёму при 25 °C — pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 35–37 °C в течение указанного времени. Степень восстановления принята за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

| Организм