HiMedia M031-100G Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD)

Порошковая селективно-дифференциальная питательная среда HiMedia M031-100G Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD) предназначена для выделения и количественного определения бактерий рода Salmonella, включая Salmonella Typhi. Применяется для клинических, пищевых, молочных и водных образцов; среда может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар (XLD) рекомендован для выделения и количественного определения Salmonella Typhi и других видов рода Salmonella из клинических и неклинических образцов.

Среда предназначена для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae и микробиологического исследования:

• клинические образцы — фекалии;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2

Методика приготовления

1. Суспендируйте 56,68 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при частом перемешивании до кипения среды.
3. Не автоклавировать и не перегревать.
4. Немедленно перенесите среду на водяную баню при 50 °C.
5. После охлаждения разлейте среду в стерильные чашки Петри.
6. Не рекомендуется готовить большие объёмы среды, требующие продолжительного нагревания, поскольку это может привести к образованию осадка.

В среде может образовываться небольшой осадок. Это свойство состава, которое не влияет на рабочие характеристики среды.

Принцип действия и интерпретация

XLD-агар был разработан для выделения и дифференциации кишечных патогенов, включая Salmonella Typhi, среди других видов рода Salmonella в пищевых продуктах, воде и молочных продуктах. Среда является одновременно селективной и дифференциальной.

Селективным агентом служит дезоксихолат натрия, поэтому среда подавляет рост грамположительных микроорганизмов. Формуляция препятствует чрезмерному росту других микроорганизмов поверх колоний Salmonella и Shigella.

Дрожжевой экстракт обеспечивает азот и витамины, необходимые для роста. Ксилоза, лактоза и сахароза являются источниками сбраживаемых углеводов. Ксилоза включена в состав главным образом потому, что не сбраживается шигеллами, но практически всегда сбраживается другими представителями кишечной группы, что позволяет дифференцировать виды Shigella.

Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды. Лизин используется для дифференциации группы Salmonella от непатогенных микроорганизмов:

• Salmonella быстро сбраживает ксилозу и истощает её запас;
• затем лизин декарбоксилируется ферментом лизиндекарбоксилазой с образованием аминов;
• в результате pH вновь становится щелочным, что имитирует реакцию Shigella;
• для предотвращения такой реакции у лизинположительных колиформ в среду добавлены лактоза и сахароза, обеспечивающие избыточное образование кислоты;
• разложение ксилозы, лактозы и сахарозы до кислых продуктов изменяет окраску индикатора фенолового красного на жёлтую;
• бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, распознаются по красному окрашиванию вокруг колоний вследствие повышения pH.

Указанные реакции могут протекать одновременно или последовательно. Поэтому при длительной инкубации индикатор pH может приобретать различные оттенки или изменять окраску с жёлтой на красную.

Для дополнительной дифференциации в состав включена система выявления H₂S, состоящая из тиосульфата натрия и цитрата аммония и железа. Образующийся микроорганизмами сероводород вызывает формирование колоний с чёрными центрами. Непатогенные продуценты H₂S не декарбоксилируют лизин, поэтому образующаяся у них кислая реакция препятствует почернению колоний.

По сравнению с другими плотными питательными средами, включая SS-агар (M108), ЭМБ-агар (M022) и висмут-сульфитный агар (M027), XLD-агар характеризуется повышенной селективностью и чувствительностью согласно приведённым данным производителя.

Образцы, предположительно содержащие кишечные патогены совместно со смешанной микрофлорой, первоначально обогащают в модифицированной полужидкой основе среды RV (M1482).

Подготовка и обращение с образцами

• Для клинических образцов используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки согласно руководствам и местным нормативам.
• После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Предупреждения и меры предосторожности

• Использовать для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. В среде может образовываться небольшой осадок; это свойство среды не влияет на её рабочие характеристики.
2. Среда имеет общее назначение и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.
3. Некоторые штаммы Proteus могут давать окраску от красной до жёлтой у большинства колоний с формированием чёрных центров, что приводит к ложноположительным реакциям.
4. Непредставители кишечной группы, например Pseudomonas и Providencia, могут образовывать красные колонии.
5. S. Paratyphi A, S. Choleraesuis, S. Pullorum и S. Gallinarum могут образовывать красные колонии без H₂S, имитируя виды Shigella.

Технические характеристики