Дезоксихолатный агар HiMedia M030-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Дезоксихолатный агар HiMedia M030-500G (уп/500 г) для селективного выделения возбудителей кишечных инфекций. Применяется для прямого подсчета колиформных микроорганизмов в молочных продуктах, а также для выделения Salmonella и Shigella из фекалий и ректальных тампонов.

Принцип измерения и интерпретация

Среда приготовлена по модифицированной прописи Лейфсона (Leifson). Она предназначена для максимального восстановления кишечных патогенов, относящихся к видам Salmonella и Shigella. Высокая селективность позволяет использовать достаточно плотные посевы без риска подавления целевых микроорганизмов сопутствующей микрофлорой.

Механизм дифференциации:

• Пептон: обеспечивает углерод, азот, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и минералы.
• Селективность: дезоксихолат натрия и цитрат натрия подавляют рост грамположительных и большинства колиформных бактерий.
• Дифференциация: лактоза позволяет разделять кишечные бациллы. Ферментирующие лактозу бактерии образуют красные/розовые колонии, неферментирующие — бесцветные.
• Индикация: расщепление лактозы приводит к закислению среды вокруг колоний, из-за чего индикатор нейтральный красный меняет цвет на красный. В этих зонах часто наблюдается помутнение из-за осаждения дезоксихолевой кислоты.

Важное ограничение: комбинация цитрата и железа (Fe) при нагревании оказывает сильный гидролизующий эффект на агар, делая его мягким и неэластичным. При автоклавировании среда становится слишком мягкой, что делает посев невозможным.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендировать 45,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Внимание: НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Избегать чрезмерного или длительного нагрева.
4. Остудить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным чашкам Петри.

Посев для подсчета колиформ в молоке и сливках

1. Внести 1–4 мл образца (или соответствующего десятикратного разведения) в стерильную чашку Петри.
2. Добавить 10–20 мл расплавленной и остуженной среды.
3. После застывания нанести на поверхность 3–5 мл незасеянной среды.
4. После окончательного затвердения инкубировать чашку в термостате при 30 °C в течение 24 ч.
5. Колиформные бактерии образуют темно-красные колонии диаметром около 0,5 мм.

Технические характеристики

Состав, г/л:

• Конечный pH (при 25 °C): 7,3 ± 0,2
• Внешний вид: светло-желтый или розовый гомогенный свободнотекучий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара
• Цвет и прозрачность готовой среды: красно-оранжевый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Диапазон pH: 7,10–7,50

Дополнительные параметры:

Культуральные характеристики

Результаты наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и ограничения

Типы образцов:

• Клинические: образцы мочи, фекалии и др.
• Пищевые: образцы продуктов питания и молочной продукции.

Ограничения:

• Среда обладает высокой селективностью, поэтому рекомендуется использовать её в сочетании с менее селективными средами, такими как агар МакКонки (M082 / FD082).
• Не рекомендуется использовать в случаях, когда ожидается низкий выход искомого патогена.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Комплект поставки

• Дезоксихолатный агар: 500 г (порошок)
• Сертификат соответствия: ФСЗ 2009/03709