Питательная диагностическая среда Висмут-сульфитный агар HiMedia M027-500G (уп/500 гр) предназначена для селективного выделения Salmonella из клинического, пищевого, водного и другого исследуемого материала. Среда применяется для предварительной идентификации сальмонелл, однако из-за высокой селективности может подавлять рост некоторых штаммов Salmonella и не должна использоваться как единственная селективная среда.

Назначение

Висмут-сульфитный агар рекомендуется для селективного выделения Salmonella из кала, мочи, сточных вод и других материалов. Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6579-1:2017.

Среда предназначена для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других сальмонелл из:

• патологического материала;
• сточных вод;
• пищевых продуктов;
• воды;
• молока и молочных продуктов;
• мяса;
• кормов для животных;
• фекалий животных;
• других исследуемых материалов.

Висмут-сульфитный агар используется как агаровая питательная среда диагностического типа.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель: M027-500G
• Форма выпуска: порошок
• Тип питательной среды: диагностический
• Назначение изделия: агар
• Фасовка: 500 гр
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Соответствие: ГОСТ Р 52814-2007
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Конечный pH при 25 °C: 7,7 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,50–7,90

Состав среды

Состав по спецификации ISO 6579-1

Содержание компонентов рассчитано на 1 л среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,7 ± 0,2.

Состав висмут-сульфитного агара BS

Содержание компонентов рассчитано на 1 л среды.

Конечный pH при 25 °C: 7,7 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

• Эквивалент ферментативного гидролизата тканей животного происхождения.

• Эквивалент мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация результатов

Сальмонеллы относятся к наиболее таксономически сложной группе бактерий семейства Enterobacteriaceae. Инфицирование человека Salmonella чаще всего связано с употреблением пищи, воды или молока, загрязнённых выделениями человека или животных. Единственным резервуаром S. Typhi являются люди.

Висмут-сульфитный агар представляет собой модификацию исходной среды Вильсона—Блэра и применяется для выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других сальмонелл из патологического материала, сточных вод, воды, пищевых продуктов и других изделий. Среда M0271 также рекомендуется для селективного выделения и количественного определения видов Salmonella в соответствии с требованиями комитета ISO.

Бриллиантовый зелёный и индикатор сульфита висмута подавляют рост кишечных грамположительных и грамотрицательных бактерий. Сульфат железа способствует выявлению образования сероводорода. При продукции сероводорода и восстановлении сульфита до сульфида железа, имеющего чёрный цвет, колонии приобретают характерную окраску.

Типичные признаки роста:

• Salmonella Typhi, Salmonella Enteritidis и Salmonella Typhimurium обычно образуют коричневые, серые или чёрные колонии, как правило, с металлическим блеском через 24 ч; через 48 ч колонии становятся равномерно чёрными;
• Salmonella Paratyphi A образует светло-зелёные колонии;
• S. Typhi и S. Arizonae могут образовывать типичные коричневые колонии с металлическим блеском или без него;
• некоторые виды Salmonella при массивном посеве образуют типичные чёрные колонии с металлическим блеском, тогда как изолированные колонии могут быть зелёными;
• рост шигелл, а также таких сальмонелл, как S. Sendai, S. Berta, S. Gallinarum и S. Abortus-equi, подавляется;
• отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к росту и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на среде.

Пептон и экстракт HM служат источниками углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других факторов роста. Декстроза является источником углерода. Динатрийфосфат поддерживает осмотическое равновесие. Индикатор сульфита висмута совместно с бриллиантовым зелёным подавляет кишечные грамположительные и грамотрицательные бактерии. Сульфат железа используется для выявления продукции сероводорода.

Среда обладает высокой селективностью и может ингибировать некоторые штаммы Salmonella, поэтому при исследовании её необходимо применять параллельно с менее селективными средами. По сравнению с другими селективными средами висмут-сульфитный агар допускает использование большего инокулюма вследствие выраженного ингибирующего действия на грамположительные микроорганизмы и колиформные бактерии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 52,33 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте среду в автоклаве и не используйте дробную стерилизацию: перегрев может разрушить селективность среды.
4. Перед разливом в стерильные чашки Петри равномерно диспергируйте осадок сульфита висмута в готовом геле. Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения осаждённого сульфита висмута.

Пробоподготовка и проведение исследования

Предварительное обогащение

Для пищевых образцов предварительное обогащение выполняют до посева.

Образец массой 25 г вносят в 225 мл буферной пептонной воды M14941 и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Селективное обогащение

1. Внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл бульона RVS M14481 или на агар MSRV M1428.
2. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Внесите 1 мл полученной культуры в бульон MKTT M1496I.
4. Инкубируйте бульон MKTT при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
5. Для Salmonella Typhi и Salmonella Paratyphi A выполняйте селективное обогащение в селенит-цистиновом бульоне.
6. Инкубируйте селенит-цистиновый бульон при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч и 48 ± 3 ч.

Выделение

1. Полученную культуру высейте на висмут-сульфитный агар BS M027.
2. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Рекомендуется дополнительная инкубация в течение ещё 24 ± 3 ч.
4. Одновременно выполните посев на модифицированный агар XLD M0311.

Подтверждение

Для подтверждения проводят биохимические и серологические тесты.

При исследовании клинических образцов необходимо использовать соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется среда зеленовато-жёлтого цвета, оп