Висмут-сульфитный агар HiMedia M027-500G (уп/500 гр)

Диагностическая питательная среда Висмут-сульфитный агар HiMedia M027-500G (уп/500 г) производства HiMedia для селективного выделения Salmonella. Применяется для предварительной идентификации Salmonella Typhi и других сальмонелл из патологического материала, сточных вод, пищевых продуктов и воды; состав и критерии эффективности соответствуют стандарту ISO 6579-1:2017.

Принцип измерения и интерпретация

Среда является модификацией оригинального метода Уилсона и Блэра. Бриллиантовый зеленый и сульфит висмута подавляют рост грамположительных и кишечных грамотрицательных микроорганизмов.

Интерпретация результатов:

• S. Typhi, S. Enteritidis и S. Typhimurium: обычно образуют черные колонии с металлическим блеском (или без него), окруженные зоной почернения. Это происходит в результате продукции сероводорода (H₂S) и восстановления сульфита до черного сульфида железа.
• S. Paratyphi A: образует светло-зеленые колонии.
• S. Typhi и S. Arizonae: могут проявляться в виде типичных коричневых колоний с металлическим блеском или без него.

Компоненты среды:

• Пептон и экстракт HM: источники углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и факторов роста.
• Декстроза (глюкоза): источник углерода.
• Гидрофосфат натрия двунатриевый: поддерживает осмотический баланс.
• Индикатор сульфита висмута и бриллиантовый зеленый: ингибируют рост кишечных грамположительных и грамотрицательных бактерий.
• Сульфат железа: способствует обнаружению продукции H₂S.

Методика проведения анализа

Пробоподготовка и предварительное обогащение

Для образцов пищевых продуктов проводится предварительное обогащение: пробу массой 25 г помещают в 225 мл буферной пептонной воды (M14941) и инкубируют при температуре 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.

Селективное обогащение

1. 0,1 мл предварительно обогащенной пробы инокулируют в 10 мл бульона RVS (M14481) или агар MSRV (M1428) и инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
2. 1 мл культуры инокулируют в бульон MKTT (M1496I) и инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Для S. Typhi и S. Paratyphi A селективное обогащение проводят в бульоне селенит-цистеиновом с инкубацией при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч и 48 ± 3 ч.

Изоляция и подтверждение

1. Полученную культуру высевают на висмут-сульфитный агар (M027).
2. Инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Рекомендуется дополнительная инкубация еще на 24 ± 3 ч.
3. Параллельно проводят посев на модифицированный агар XLD (M0311).
4. Подтверждение осуществляется с помощью биохимических и серологических тестов.

Приготовление и использование

1. Суспендируйте 52,33 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. ЗАПРЕЩЕНО СТЕРИЛИЗОВАТЬ В АВТОКЛАВЕ или использовать фракционное стерилизацию, так как перегрев разрушает селективность среды.
4. Перед разливом в стерильные чашки Петри необходимо обеспечить равномерное распределение осадка сульфита висмута в конечном геле.

Технические характеристики

Состав (согласно ISO 6579-1)

Конечный pH (при 25 °C): 7,7 ± 0,2

Состав (Bismuth Sulphite Agar)

Конечный pH (при 25 °C): 7,7 ± 0,2

Общие параметры

• Внешний вид: светло-желтый или зеленовато-желтый однородный свободно текущий порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: зеленовато-желтая, опалесцирующая, с хлопьевидным осадком в чашках Петри.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 2,0 % агаром.
• Диапазон pH: 7,50–7,90.
• Происхождение компонентов: животное.
• Тип продукта: регулярный.
• Физическая форма: порошок.
• Материал упаковки: ПНД (HDPE).

Культуральные характеристики

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч с дополнительной инкубацией еще на 24 ± 3 ч. Восстановление 100 % считается по росту на соево-казеиновом агаре.

Продуктивность и селективность

Дополнительные тесты селективности

Область применения

Среда предназначена для работы с следующими типами образцов:

• Клинические образцы: фекалии, моча.
• Пищевые продукты: мясо, молоко и молочные продукты, корма для животных.
• Экологические образцы: сточные воды, вода, фекалии животных.

Ограничения и предостережения

• Запрещено автоклавировать или перегревать среду, так как это уничтожает её селективные свойства.
• Среда обладает высокой селективностью и должна использоваться параллельно с менее селективными средами.
• Рост некоторых штаммов Salmonella может подавляться; среда не должна быть единственным инструментом исследования.
• При интенсивном посеве некоторые виды Salmonella могут давать типичные черные колонии с блеском только в центре посева, в то время как изолированные колонии могут оставаться зелеными.
• Рост отдельных организмов может варьироваться в зависимости от их индивидуальных требований.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Утилизация

Утилизация использованных сред и материалов, контактировавших с пробами, должна осуществляться путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.