Питательная микробиологическая среда HiMedia M027-100G «Висмут-сульфитный агар» — порошковая среда массой 100 г для селективного выделения Salmonella. Среда применяется при исследовании клинических, пищевых и экологических образцов, но не должна использоваться как единственная селективная среда из-за возможного ингибирования отдельных штаммов Salmonella.

Назначение

Висмут-сульфитный агар предназначен для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella, включая Salmonella Typhi, из следующих материалов:

• фекалии и моча;
• сточные воды;
• вода;
• пищевые продукты;
• молоко и молочные продукты;
• мясо;
• корма для животных;
• фекалии животных;
• другие патологические и экологические образцы.

Состав и критерии эффективности среды соответствуют требованиям ISO 6579-1:2017. Для пищевых образцов перед посевом проводят предварительное обогащение.

Состав среды

Висмут-сульфитный агар по спецификации ISO 6579-1

Содержание компонентов приведено в г/л.

Конечное значение pH при 25 °C: 7,7 ± 0,2.

Висмут-сульфитный агар BS

Содержание компонентов приведено в г/л.

Конечное значение pH при 25 °C: 7,7 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Эквивалент ферментативного гидролизата тканей животных.

• Эквивалент мясного экстракта.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: M027-100G
• Назначение изделия: агар, питательная микробиологическая среда
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: животное
• Тип продукта: стандартный
• Масса: 100 г
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Расчётная навеска: 52,33 г на 1000 мл очищенной или дистиллированной воды
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,7 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,50–7,90
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Принцип действия и интерпретация результатов

Salmonella представляет собой таксономически сложную группу бактерий семейства Enterobacteriaceae. Инфицирование человека обычно связано с употреблением пищи, воды или молока, загрязнённых выделениями человека или животных. Единственным резервуаром S. Typhi являются люди.

Висмут-сульфитный агар представляет собой модификацию среды Уилсона—Блэра и используется для выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других видов Salmonella из патологического материала, сточных вод, воды, пищевых продуктов и других образцов. Среда M0271 рекомендована для селективного выделения и количественного определения видов Salmonella в соответствии с требованиями комитета ISO.

Типичные колонии:

• S. Typhi, S. Enteritidis и S. Typhimurium обычно образуют чёрные колонии с металлическим блеском или без него;
• окраска и металлический блеск связаны с образованием сероводорода и восстановлением сульфита до чёрного сульфида железа;
• Salmonella Paratyphi A образует светло-зелёные колонии;
• S. Typhi и S. Arizonae могут образовывать типичные коричневые колонии с металлическим блеском или без него.

Пептон и экстракт HM служат источниками углерода, азота, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других факторов роста. Декстроза является источником углерода. Динатрий фосфат поддерживает осмотическое равновесие. Индикатор сульфита висмута и бриллиантовый зелёный подавляют рост кишечных грамположительных и грамотрицательных бактерий. Сульфат железа участвует в обнаружении образования сероводорода.

Среда может ингибировать отдельные штаммы Salmonella, поэтому для выделения этих микроорганизмов её не следует использовать в качестве единственной селективной среды. По сравнению с другими селективными средами среда допускает использование большей посевной дозы благодаря выраженному ингибирующему действию на грамположительные микроорганизмы и колиформные бактерии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 52,33 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте среду в автоклаве и не используйте дробную стерилизацию: перегрев разрушает селективность среды.
4. Перед разливом в стерильные чашки Петри равномерно диспергируйте осадок сульфита висмута в приготовленном геле.
5. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Чувствительность среды в значительной степени зависит от равномерного распределения осаждённого сульфита висмута в конечном геле.

Пробоподготовка и последовательность анализа

Предварительное обогащение

1. Внесите 25 г образца в 225 мл буферной пептонной воды M14941.
2. Инкубируйте при 34–38 °C в течение 18 ч ± 2 ч.

Селективное обогащение

1. Внесите 0,1 мл предварительно обогащённого образца в 10 мл бульона RVS M14481 или на агар MSRV M1428.
2. Инкубируйте при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Внесите 1 мл полученной культуры в бульон MKTT M1496I.
4. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
5. Для Salmonella Typhi и Salmonella Paratyphi A выполните селективное обогащение в селенит-цистиновом бульоне.
6. Инкубируйте селенит-цистиновый бульон при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч и 48 ± 3 ч.

Выделение

1. Выполните посев полученной культуры на висмут-сульфитный агар BS M027.
2. Инкубируйте при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
3. Рекомендуется дополнительная инкубация в течение ещё 24 ± 3 ч.
4. Одновременно выполните посев на модифицированный агар XLD M0311.

Подтверждение

Для подтверждения проводят биохимические и серологические тесты. Для клинических образцов применяют соответствующие методики обращения с материалом согласно установленным руководствам.

Условия контроля качества

Внешний вид

Однородный свободно текуч