HiMedia M027-100G Висмут-сульфитный агар

HiMedia·Арт.: 0048948·Арт. произв.: M027-100G

HiMedia M027-100G Висмут-сульфитный агар

Name: HiMedia M027-100G Висмут-сульфитный агар
Brand: HiMedia
SKU: 0048948
Price: 3012 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ3 012 руб.

Селективная питательная среда HiMedia M027-100G Висмут-сульфитный агар для изоляции Salmonella из фекалий, мочи, сточных вод и других материалов. Состав и критерии эффективности среды соответствуют спецификациям стандарта ISO 6579-1:2017.

Описание

Принцип измерения и интерпретация

Среда является модификацией оригинального метода Уилсона и Блэра. Она рекомендована для селективного выделения и предварительной идентификации Salmonella Typhi и других видов Salmonella из патологических материалов, сточных вод, воды и пищевых продуктов.

Механизм селективности: индикатор висмут-сульфит в сочетании с бриллиантовым зеленым подавляет рост кишечных грамположительных и грамотрицательных бактерий.
Индикация: S. Typhi, S. Enteritidis и S. Typhimurium обычно растут в виде черных колоний (с металлическим блеском или без него), что обусловлено продукцией сероводорода (H₂S) и восстановлением сульфита до черного сульфида железа. Salmonella Paratyphi A образует светло-зеленые колонии.
Особенности: среда обладает уникальным ингибирующим действием на грамположительные организмы и колиформы, что позволяет использовать более высокую посевную дозу по сравнению с другими селективными средами.

Важно: Висмут-сульфитный агар может подавлять рост некоторых штаммов Salmonella, поэтому его не следует использовать как единственную селективную среду.

Состав

Спецификация ISO 6579-1 — Висмут-сульфитный агар

Компонент	г/л
Энзимный гидролизат тканей животных	10,000
Мясной экстракт	5,000
Декстроза	5,000
Гидрофосфат натрия двуводный, безводный	4,000
Сульфат железа (II), безводный	0,300
Висмут-сульфитный индикатор	8,000
Бриллиантовый зеленый	0,025
Агар	20,000

Конечный pH (при 25 °C): 7,7 ± 0,2.

Висмут-сульфитный агар (стандартный состав)

Компонент (BS)	г/л
Пептон	10,000
HM экстракт	5,000
Декстроза (глюкоза)	5,000
Гидрофосфат натрия двуводный, безводный	4,000
Сульфат железа (II), безводный	0,300
Висмут-сульфитный индикатор	8,000
Бриллиантовый зеленый	0,025
Агар	20,000

Конечный pH (при 25 °C): 7,7 ± 0,2.

Методика проведения анализа

Типы образцов

Клинические образцы: фекалии.
Пищевые образцы: мясо, молоко и молочные продукты, корма для животных, фекалии животных.
Экологические образцы.

Пробоподготовка и обогащение

Предварительное обогащение: образцы (25 г в 225 мл) помещают в буферную пептонную воду (M14941) и инкубируют при 34–38 °C в течение 18 ± 2 ч.
Селективное обогащение:
- 0,1 мл предварительно обогащенного образца инокулируют в 10 мл бульона RVS (M14481) или агар MSRV (M1428), инкубируют при 41,5 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
- 1 мл культуры инокулируют в бульон MKTT (M1496I), инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч.
- Для S. Typhi и S. Paratyphi A используют селенит-цистеиновый бульон с инкубацией при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч и 48 ± 3 ч.

Изоляция и подтверждение

Полученную культуру высевают на Висмут-сульфитный агар (M027).
Инкубируют при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч. Рекомендуется дополнительная инкубация еще на 24 ± 3 ч.
Параллельно проводят посев на модифицированный агар XLD (M0311).
Подтверждение осуществляется с помощью биохимических и серологических тестов.

Приготовление и условия эксплуатации

Инструкция по приготовлению

Суспендировать 52,33 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
ЗАПРЕЩЕНО СТЕРИЛИЗОВАТЬ В АВТОКЛАВЕ или методом фракционного стерилизации, так как перегрев разрушает селективные свойства среды.
Перед разливом в стерильные чашки Петри необходимо обеспечить равномерное распределение осадка висмут-сульфита в конечном геле.

Условия хранения

Сухая среда: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
Готовая среда: 20–30 °C.
Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования.

Технические характеристики

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Животное
Тип продукта	Регулярный
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Внешний вид порошка	Светло-желтый или зеленовато-желтый гомогенный свободнотекучий порошок
Цвет и прозрачность среды	Зеленовато-желтая, опалесцирующая, с хлопьевидным осадком в чашках Петри
Желирование	Плотное, сравнимо с 2,0% агаровым гелем
pH (водного раствора 5,23% при 25 °C)	7,7 ± 0,2
Диапазон pH	7,50–7,90

Культуральные характеристики

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч с дополнительной инкубацией еще на 24 ± 3 ч. Восстановление 100 % считается по росту на соево-казеиновом-пептонном агаре.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колонии
Продуктивность
Salmonella Typhimurium ATCC 14028	50–100	хороший	$\ge$ 50 %	Коричневые, серые или черные колонии, обычно с металлическим блеском через 24 ч, становятся равномерно черными через 48 ч.
Salmonella Enteritidis ATCC 13076	50–100	хороший	$\ge$ 50 %	Коричневые, серые или черные колонии, обычно с металлическим блеском через 24 ч, становятся равномерно черными через 48 ч.
Селективность и специфичность
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	рост или частичное подавление		Тускло-зеленые или коричневые колонии без металлического блеска
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	рост или частичное подавление		Тускло-зеленые или коричневые колонии без металлического блеска

Селективность

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колонии
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавлен	0 %	-
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	0 %	-
Дополнительные тесты
Salmonella Typhi ATCC 6539	50–100	хороший	$\ge$ 50 %	Коричневые, серые или черные колонии, обычно с металлическим блеском через 24 ч, становятся равномерно черными через 48 ч.
Salmonella Paratyphi A ATCC 9150	50–100	хороший	$\ge$ 50 %	Коричневые, серые или черные колонии, обычно с металлическим блеском через 24 ч, становятся равномерно черными через 48 ч.

Ограничения и предостережения

Запрет на автоклавирование: перегрев среды уничтожает её селективность.
S. Typhi и S. Arizonae могут образовывать типичные коричневые колонии с металлическим блеском или без него.
При очень высокой плотности посева некоторые виды Salmonella могут давать типичные черные колонии с блеском только вокруг очага инокуляции, в то время как изолированные колонии могут выглядеть зелеными.
Среда предназначена только для профессионального использования (In Vitro диагностика). Требуется использование средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).