HiMedia M023F-500G Основа агара Фогель-Джонсона с 1.5% агара

Компонент питательной среды HiMedia M023F-500G Основа агара Фогель-Джонсона с 1,5 % агара с образованием твёрдого геля. Применяется для селективного выделения коагулазоположительных, ферментирующих маннитол Staphylococcus aureus из сильно контаминированных пищевых продуктов и косметических материалов; перед использованием требуется добавление раствора теллурита калия.

Назначение и область применения

Основа агара Фогель—Джонсона с 1,5 % агара предназначена для селективного выделения коагулазоположительных стафилококков, ферментирующих маннитол, из сильно контаминированных пищевых продуктов в соответствии с методикой FDA BAM, 1998.

Среда также применяется для количественного определения и идентификации микроорганизмов в косметических продуктах, где ожидается контаминация Staphylococcus.

Состав

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 62,03 г основы в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 20 мл стерильного 1%-ного раствора теллурита калия FD052.
6. Осторожно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования безопасности

Хлорид лития вреден. Избегайте контакта с кожей и другими участками тела, а также вдыхания паров. При попадании на кожу немедленно промойте большим количеством воды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа агара Фогель—Джонсона приготовлена по формуле, разработанной Фогелем и Джонсоном. Первоначально среда была разработана Зебовицем под названием теллурит-глициновый агар как селективная среда для выявления коагулазоположительных стафилококков. В 1960 году Фогель и Джонсон модифицировали среду, добавив феноловый красный в качестве индикатора pH и увеличив содержание маннитола.

Селективность и дифференциация коагулазоположительных стафилококков на агаре Фогеля—Джонсона основаны на ферментации маннитола и восстановлении теллурита.

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, витаминами группы B и другими питательными веществами, необходимыми для роста. Дикалийфосфат выполняет буферную функцию.

В течение первых 24 ч инкубации контаминирующие микроорганизмы почти полностью подавляются теллуритом, хлоридом лития и высоким содержанием глицина. Действие ингибиторов на S. aureus ослабляется благодаря наличию маннитола и глицина.

Коагулазоположительные стафилококки восстанавливают теллурит калия до свободного металлического теллура, в результате чего образуются чёрные колонии, окружённые жёлтыми зонами. Жёлтая окраска обусловлена феноловым красным, который становится жёлтым в кислой среде при ферментации маннитола.

При отсутствии ферментации маннитола жёлтые зоны не образуются. Окраска среды вокруг колоний может становиться более тёмно-красной по сравнению с исходной вследствие утилизации пептонов среды.

Продолжительная инкубация может привести к росту чёрных коагулазоотрицательных колоний.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5%-ного агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• Реакция: реакция 6,03%-ного водного раствора, приготовленного при 25 °C.
• pH: 7,00–7,40.
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением 1%-ного раствора теллурита калия FD052.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухую основу в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Совместимые реагенты

Для селективности среды после охлаждения до 45–50 °C добавляется стерильный 1%-ный раствор теллурита калия FD052 в объёме 20 мл на 1000 мл приготовленной основы.

Комплект поставки

• Основа агара Фогель-Джонсона с 1,5 % агара, 500 г.