Основа агара Вогеля-Джонсона без теллурита HiMedia M023-500G (уп/500 гр)

Диагностическая основа питательной среды «Основа агара Вогеля-Джонсона без теллурита HiMedia M023-500G (уп/500 гр)» предназначена для приготовления селективного агара без теллурита. Среда используется для селективного выделения коагулазоположительных, ферментирующих маннит Staphylococcus aureus из сильно загрязнённых пищевых, молочных и клинических образцов; перед разливом в чашки необходимо добавить 20 мл стерильной 1%-ной селективной добавки PTe (FD052) на 1000 мл среды.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения коагулазоположительных стафилококков Staphylococcus aureus, ферментирующих маннит, из сильно загрязнённых пищевых и клинических образцов.

Тип питательной среды: диагностическая
Назначение изделия: основа
Сертификат: ФСЗ 2009/03705

Агар Вогеля—Джонсона готовят по прописи Vogel и Johnson, рекомендованной Фармакопеей США для испытаний на микробную обсеменённость. Методика селективного выделения и дифференциации коагулазоположительных стафилококков основана на ферментации маннита и восстановлении теллурита.

Состав

Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Staphylococcus aureus — грамположительная сферическая бактерия, способная колонизировать кожу и слизистые оболочки человека. Бактерия может вызывать инфекции кожи и ран, инфекции мочевыводящих путей, пневмонию и бактериемию, а также связана с пищевыми отравлениями. Staphylococcus aureus встречается как загрязнитель фармацевтической и косметической продукции.

Первоначально среда была разработана Zebovitz как теллурит-глициновый агар для выявления коагулазоположительных стафилококков. В 1960 году Vogel и Johnson модифицировали среду, добавив феноловый красный в качестве индикатора pH и увеличив содержание маннита.

Триптон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, витаминами группы B и другими питательными веществами, необходимыми для роста. Дикалия гидрофосфат выполняет буферную функцию. В течение первых 24 ч инкубации теллурит, хлорид лития и высокая концентрация глицина практически подавляют рост сопутствующих микроорганизмов. Ингибирующее действие этих компонентов на Staphylococcus aureus ослабляется присутствием маннита и глицина.

Коагулазоположительные стафилококки восстанавливают теллурит калия до свободного металлического теллура, поэтому формируют чёрные колонии, окружённые жёлтыми зонами. Жёлтая окраска обусловлена переходом фенолового красного в жёлтую форму в кислой среде, возникающей при ферментации маннита. Если маннит не ферментируется, жёлтые зоны не образуются. Вокруг колоний среда может приобретать более интенсивную красную окраску, чем исходная, вследствие утилизации пептонов. При продолжительной инкубации возможно появление чёрных колоний коагулазоотрицательных стафилококков.

Среда применяется в стандартных методиках исследования косметической продукции, фармацевтических препаратов и пищевых добавок. Рецептура соответствует рекомендациям Фармакопеи США по испытаниям на микробную обсеменённость.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 61,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении около 0,10 МПа (15 psi) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 20 мл стерильной 1%-ной селективной добавки PTe (FD052).
6. Осторожно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Клинические образцы: образцы гноя, мочи, материал из ран и другие.
• Пищевые и молочные образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Изделие предназначено для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы предъявляют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде неодинаковые характеристики роста.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). Для конкретных микроорганизмов, не указанных в COA, пользователю рекомендуется самостоятельно валидировать среду с учётом специфических требований.
3. Для полной идентификации колоний чистой культуры требуются дополнительные биохимические исследования.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в течение срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,6%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 6,1 % при 25 °C.

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления стерильной 1%-ной селективной добавки PTe (FD052) и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Т