Питательная микробиологическая среда HiMedia M022-100G Агар EMB, Левин производства HiMedia — сухая порошкообразная среда для выделения, количественного определения и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae. Применяется для анализа клинических и не клинических образцов, пищевых продуктов и воды; после вскрытия требует хранения в сухом виде в плотно закрытой ёмкости при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для выделения, количественного определения и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae из клинических и не клинических образцов.

Среда EMB, Левина используется для:

• дифференциации Escherichia coli и Klebsiella aerogenes;
• быстрого выявления Candida albicans;
• обнаружения, количественного определения и дифференциации представителей группы колиформных бактерий;
• микробиологического анализа мочи, фекалий, ротовых и вагинальных выделений, соскобов с ногтей или кожи;
• исследования пищевых продуктов, молочных продуктов и проб воды.

Состав

Содержание компонентов приведено для 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Принцип действия и интерпретация

Среда EMB, Левина была разработана Левином и применяется для дифференциации Escherichia coli и Klebsiella aerogenes, а также для быстрого выявления Candida albicans.

В состав среды входят эозин Y и метиленовый синий. Комбинация красителей обеспечивает слабую селективность среды и подавляет рост некоторых грамположительных бактерий. Эозин Y и метиленовый синий служат дифференцирующими индикаторами реакции ферментации углеводов, что позволяет разделять лактозоферментирующие и неферментирующие микроорганизмы.

Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1. При снижении pH колиформные бактерии поглощают комплекс метиленового синего и эозина, в результате чего формируются пурпурно-чёрные колонии. Комплекс красителей абсорбируется колонией.

Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка. Это приводит к растворению комплекса метиленового синего и эозина и образованию бесцветных колоний.

Функции компонентов:

• пептон — источник углерода, азота, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ;
• лактоза — источник энергии и ферментируемый углевод;
• эозин Y и метиленовый синий — дифференцирующие индикаторы;
• фосфат — буферный компонент среды.

Положительная идентификация Candida albicans может быть выполнена после инкубации в течение 24–48 ч при 35–37 °C в атмосфере с содержанием углекислого газа 10 %. Для анализа могут использоваться фекалии, ротовые и вагинальные выделения, соскобы с ногтей или кожи. Типичный внешний вид колоний может варьироваться.

Среда рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения для обнаружения, количественного определения и дифференциации представителей группы колиформных бактерий.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 37,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа или 1,03 бар, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 50 °C.
6. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления его синего цвета, и суспендирования осадка. Осадок является обязательной частью среды.

Методика работы с образцами

Исследуемый образец можно непосредственно штрихом высевать на чашки со средой.

Инокулированные чашки следует инкубировать в защищённом от света месте. Для получения изолированных колоний необходимо соблюдать стандартные процедуры посева и инкубации.

Одновременно со средой EMB следует инокулировать неселективную питательную среду. Для идентификации выделенных колоний необходимо дополнительно провести подтверждающие тесты.

Типы образцов

• Клинические образцы:
  • моча;
  • фекалии;
  • ротовые выделения;
  • вагинальные выделения;
  • соскобы с ногтей;
  • соскобы с кожи.
• Пищевые продукты.
• Молочные продукты.
• Пробы воды.

Сбор и обращение с образцами

• Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.
• Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Для получения сведений по безопасности используйте соответствующие паспорта безопасности.

Ограничения применения

1. Среду EMB следует использовать совместно с неселективной питательной средой.
2. Для идентификации выделенных колоний необходимо дополнительно проводить подтверждающие тесты.
3. Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: гель красновато-пурпурного цвета с опалесценцией, зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком, образующийся в чашках Петри.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,75 % масса/объём при 25 °C.

pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее известен как Enterobacter aerogenes.

^ Ранее известен как Pseudomonas aeruginosa.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: M022-100G
• Назначение изделия: агар EMB, Левина
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Происхождение: животное
• Тип продукта: стандартный
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Расход для приготовления среды: 37,46 г/л
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30
• Температура стерилизации: 121 °C
• Время стерили