Железо-агар с тремя сахарами HiMedia M021B-500G (уп/500 гр)

Железо-агар с тремя сахарами HiMedia M021B-500G (уп/500 гр) — сухая питательная среда производства HiMedia для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек по ферментации углеводов и образованию сероводорода. Железо-агар с тремя сахарами применяется для анализа фармацевтических, пищевых, молочных и водных образцов; масса обезвоженной среды — 500 г.

Назначение

Железо-агар с тремя сахарами (Агар М, Triple Sugar Iron Agar, TSI) предназначен для идентификации и дифференциации грамотрицательных энтеробактерий по ферментации глюкозы, лактозы и сахарозы, а также по образованию сероводорода (H₂S) в соответствии с Британской фармакопеей.

Среда также применяется:

• для исследования мяса и пищевых продуктов;
• для исследования молока и молочных продуктов;
• для микробиологических предельных испытаний с подтверждением присутствия Salmonella;
• для идентификации грамотрицательных палочек;
• для анализа чистых бактериальных изолятов из воды и пищевых продуктов;
• для исследования фармацевтических образцов.

Артикул товара: M021B-500G.
Регистрационное обозначение: ФСЗ 2009/03705.
Назначение изделия: агар.

Состав

Состав обезвоженной среды на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных характеристик рабочих показателей среды.

Обозначения компонентов:

• # — эквивалент пептона мясного или казеинового происхождения;
• ## — эквивалент мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация результатов

Железо-агар с тремя сахарами, обозначаемый как Агар М, используется для идентификации и дифференциации Enterobacteria по Британской фармакопее. Среда первоначально предложена Sulkin и Willett, а затем модифицирована Hajna для идентификации Enterobacteriaceae. Состав среды соответствует требованиям Британской фармакопеи.

Пептоны HMC, дрожжевой экстракт и пептон HM B являются источниками азотистых и углеродистых соединений, серы, микроэлементов и витаминов группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми углеводами. Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для выявления H₂S. Феноловый красный служит индикатором pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, из-за чего цвет среды изменяется с красного на жёлтый. В столбике среды при ферментации выделяется больше кислот, чем в скошенной части, где преобладают процессы дыхания. Растущие бактерии также образуют щелочные продукты окислительного декарбоксилирования пептонов. Эти щелочные продукты нейтрализуют значительное количество кислоты в столбике среды.

Щелочная скошенная часть красного цвета и кислая жёлтая среда в столбике после инкубации указывают, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не ферментирует лактозу и/или сахарозу.

Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу либо оба углевода одновременно в дополнение к глюкозе, образуют большое количество кислоты. В соответствующей области pH не возвращается к исходному значению, поэтому скошенная часть и столбик приобретают кислую реакцию.

Образование газа выявляют по трещинам или пузырькам в среде, возникающим при выходе накопившегося газа, включая CO₂.

Тиосульфат восстанавливается несколькими видами бактерий до сероводорода. H₂S взаимодействует с ионами железа в составе железосодержащих солей с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно наблюдается в столбике среды.

Железо-агар с тремя сахарами следует использовать параллельно с мочевинным агаром или бульоном (M112/M111) для различения видов Salmonella и Proteus.

Сводная интерпретация реакций:

• щелочная скошенная часть / кислый столбик — ферментация только глюкозы;
• кислая скошенная часть / кислый столбик — ферментация глюкозы и сахарозы, глюкозы и лактозы либо всех трёх сахаров: глюкозы, лактозы и сахарозы;
• пузырьки или трещины — образование газа;
• чёрный осадок — образование H₂S.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 64,02 г обезвоженной среды, рассчитанной на 1 л готовой среды, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при кипячении в течение 1 мин, одновременно встряхивая, до полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте среду и распределите её по пробиркам.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, ориентировочно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Дайте среде застыть в виде скошенной поверхности со столбиком длиной около 1 дюйма, то есть 25,4 мм.

Для получения лучших результатов допускается стерилизация автоклавированием при давлении 10 фунтов, ориентировочно 0,069 МПа, при 115 °C в течение 15 мин.

Образцы и пробоподготовка

Типы образцов:

• фармацевтические образцы;
• чистые бактериальные изоляты из воды;
• пищевые продукты.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Некоторые представители Enterobacteriaceae и продуцирующие H₂S штаммы Salmonella могут не давать положительную реакцию на H₂S на агаре TSI. Отдельные бактерии могут образовывать H₂S на железном агаре Клиглера, но не на агаре TSI. Это возможно потому, что утилизация сахарозы в агаре TSI подавляет ферментативный путь, приводящий к образованию H₂S.

Условия проведения и требования безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо выполнять стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках в виде скошенной поверхности образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель розовато-красного цвета.

Реакция

После стерилизации реакция водного раствора с концентрацией 6,40 % масс./объём.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.