Железо-агар с тремя сахарами HiMedia M021B-500G (уп/500 гр)

Сухая питательная среда Железо-агар с тремя сахарами HiMedia M021B-500G (Агар М), соответствующая требованиям Британской фармакопеи. Применяется для идентификации и дифференциации грамотрицательных энтеробактерий на основании ферментации глюкозы, лактозы и сахарозы, а также продукции сероводорода (H₂S).

Область применения

Среда рекомендуется для идентификации и дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae. Помимо фармацевтического анализа, может использоваться для:

• исследования мясных и пищевых продуктов;
• анализа молока и молочных продуктов;
• проведения тестов на микробиологическую чистоту для подтверждения наличия Salmonella;
• общей идентификации грамотрицательных бацилл.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на методе Салкина и Уиллетта в модификации Хайны.

Компоненты и их функции

• HMC-пептоны, дрожжевой экстракт и HM-пептон B: обеспечивают азот, углерод, серу, микроэлементы и витамины комплекса B.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Лактоза, сахароза и декстроза (глюкоза): ферментируемые углеводы.
• Тиосульфат натрия и ионы железа: индикаторная система для обнаружения H₂S.
• Феноловый красный: pH-индикатор.

Интерпретация результатов

1. Ферментация глюкозы: организмы вырабатывают кислоты, цвет среды меняется с красного на жёлтый. В столбике (анаэробная зона) образуется больше кислоты, чем в скосе (аэробная зона).
2. Окислительное декарбоксилирование пептона: бактерии образуют щелочные продукты, которые нейтрализуют кислоту в скосе.
   • Щелочной (красный) скос / кислый (жёлтый) столбик: ферментируется только глюкоза.
   • Кислый (жёлтый) скос / кислый (жёлтый) столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара.
3. Газообразование (CO₂): определяется по наличию трещин или пузырьков в агаре.
4. Продукция H₂S: тиосульфат восстанавливается до сероводорода, который взаимодействует с ионами железа, образуя нерастворимый чёрный осадок сульфида железа (обычно в столбике).

Для дифференциации видов Salmonella и Proteus данную среду следует использовать параллельно с мочевинным агаром или бульоном (M112/M111).

Состав

Состав, г/л:

pH после стерилизации (при 25 °C): 7,4 ± 0,2.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 64,02 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения в течение 1 минуты при перемешивании до полного растворения компонентов.
3. Тщательно перемешайте и разлейте по пробиркам.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут. Примечание: для улучшения результатов возможна стерилизация при 115 °C (давление ≈0,07 МПа / 10 psi) в течение 15 минут.
5. Охладите среду, чтобы она застыла в виде скоса со столбиком длиной около 25 мм (1 дюйм).

Работа с образцами

• Фармацевтические образцы: сбор и обработка согласно руководствам Британской фармакопеи.
• Пищевые и молочные продукты: согласно профильным методическим указаниям.
• Пробы воды: согласно местным стандартам и руководствам.
• Посев: используйте чистые бактериальные изоляты или пробы.

Технические характеристики

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ограничения применения

Некоторые представители Enterobacteriaceae и H₂S-продуцирующие штаммы Salmonella могут давать отрицательный результат по H₂S на агаре TSI. Это может быть связано с тем, что утилизация сахарозы в данной среде подавляет ферментативный путь, приводящий к продукции H₂S. В таких случаях может наблюдаться продукция H₂S на агаре Клиглера, но не на TSI.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Требования: хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами следует использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица, соблюдая правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Утилизация: все загрязненные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.