Трехсахарный железосодержащий агар HiMedia M021-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Трехсахарный железосодержащий агар HiMedia M021-500G (уп/500 гр) (производство HiMedia) предназначена для выявления ферментации глюкозы, лактозы и сахарозы, а также образования H₂S. Среда применяется для идентификации грамотрицательных кишечных бактерий по характеру реакции в скосе и столбике, газообразованию и почернению среды.

Назначение и область применения

Трехсахарный железосодержащий агар HiMedia M021-500G — дифференциальная агаризованная питательная среда для идентификации грамотрицательных кишечных палочек по ферментации декстрозы (глюкозы), лактозы и сахарозы, а также по образованию сероводорода.

Среду применяют для:

• дифференциации патогенных кишечных бактерий;
• идентификации энтеробактерий;
• подтверждения присутствия сальмонелл;
• идентификации грамотрицательных микроорганизмов;
• исследования мяса и пищевых продуктов;
• исследования молока и молочных продуктов;
• анализа клинических образцов;
• анализа проб воды, пищевых продуктов и молочных продуктов.

Пропись первоначально предложена Sulkin и Willett, затем модифицирована Hajna для идентификации энтеробактерий. Состав соответствует рекомендациям APHA по исследованию мяса и пищевых продуктов, молока и молочных продуктов, микробиологическому испытанию для подтверждения присутствия сальмонелл и идентификации грамотрицательных палочек.

Тип питательной среды: дифференциальная.
Назначение изделия: агар.
Сертификат: ФСЗ 2009/03705.
Применение в РФ: в соответствии с ГОСТ Р 52814-2007.

Идентификация продукта

Состав

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту. Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Лактоза, сахароза и глюкоза являются ферментируемыми углеводами. Пептон, триптон, дрожжевой экстракт и пептон HM B служат источниками азотистых соединений, серы, микроэлементов и витаминов группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Тиосульфат натрия в сочетании с ионами железа образует индикаторную систему для определения H₂S. Феноловый красный используется как индикатор pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют органические кислоты, изменяющие цвет среды с красного на жёлтый. При ферментации в столбике высвобождается больше кислот, чем в скошенной части, где преимущественно происходит дыхание и окисление. Растущие бактерии также образуют щелочные продукты в результате окислительного декарбоксилирования пептона; щелочные продукты нейтрализуют значительное количество кислоты в столбике.

Щелочной красный скос и кислый жёлтый столбик после инкубации указывают, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не ферментирует лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу либо оба углевода одновременно, помимо глюкозы образуют большое количество кислоты, поэтому обратного смещения pH в этой зоне не происходит; скос и столбик становятся кислыми и жёлтыми.

Феноловый красный становится жёлтым при pH менее 6,8. При исходном pH 7,4 для появления жёлтого окрашивания требуется относительно небольшое количество кислоты. Щелочные продукты могут нейтрализовать небольшое количество кислоты, образующейся в скошенной части при ферментации глюкозы.

Газообразование выявляют по пузырькам и трещинам в среде, возникающим при выходе накопившегося газа. Газ преимущественно состоит из CO₂.

Некоторые виды бактерий восстанавливают тиосульфат до сероводорода. H₂S взаимодействует с ионами железа и образует нерастворимый чёрный осадок сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно наблюдается в столбике пробирки.

Суммарная интерпретация реакций

• Щелочной скос / кислый столбик: ферментируется только глюкоза.
• Кислый скос / кислый столбик: ферментируются глюкоза и сахароза, либо глюкоза и лактоза, либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Пузырьки или трещины в среде: образование газа.
• Чёрный осадок: образование H₂S.

Для дифференциации сальмонелл и протеев трёхсахарный железосодержащий агар следует использовать параллельно с мочевинным агаром или мочевинным бульоном M112/M111.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 64,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте.
4. Разлейте среду в пробирки для тестирования.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
6. Дайте среде застыть в наклонном положении, сформировав скошенную часть и столбик длиной около 1″ (25,4 мм).

Требования к образцам и обращению с ними

Тип образца: чистая бактериальная культура, выделенная из воды, пищевых продуктов или клинического материала.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для пищевых продуктов и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам.

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид порошка

Гомогенный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

В пробирках со скошенной средой образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель розовато-красного цвета.

Реакция раствора

Реакция водного раствора с концентрацией 6,45 % масс./об. при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.