Агар трехсахарный железосодержащий HiMedia M021-100G (100 г)

Сухая дифференциальная питательная среда Агар трехсахарный железосодержащий HiMedia M021-100G (100 г) предназначена для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл по ферментации декстрозы, лактозы и сахарозы и образованию сероводорода. Применяется для исследования чистых бактериальных изолятов из воды, пищевых продуктов и клинического материала; результаты могут быть ложноотрицательными по H₂S для отдельных представителей Enterobacteriaceae и сальмонелл.

Назначение

Агар трехсахарный железосодержащий применяется для идентификации грамотрицательных кишечных бацилл на основании:

• ферментации декстрозы;
• ферментации лактозы;
• ферментации сахарозы;
• образования сероводорода (H₂S);
• обнаружения газообразования.

Среда используется для работы с чистым бактериальным изолятом, выделенным из воды, пищевых продуктов или клинического материала. Методика также применяется при исследовании мяса и пищевых продуктов, молока и молочных продуктов, при микробиологическом предельном испытании для подтверждения присутствия сальмонелл и при идентификации грамотрицательных бацилл. Рекомендации Американской ассоциации общественного здравоохранения (APHA) используются для соответствующих видов исследований.

Идентификация продукта

Состав

Содержание компонентов указано в г/л.

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Пептон HM B является эквивалентом мясного экстракта.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 64,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Тщательно перемешайте и распределите среду по пробиркам.
4. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Дайте среде застыть в скошенной форме, оставив столбик длиной около 25,4 мм (1″).

Принцип измерения и интерпретация

Трехсахарный железосодержащий агар первоначально предложен Sulkin и Willett и позднее модифицирован Hajna для идентификации представителей семейства Enterobacteriaceae.

Триптон, пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают среду азотистыми соединениями, серой, микроэлементами и витаминами группы B. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Лактоза, сахароза и декстроза являются ферментируемыми углеводами. Тиосульфат натрия и ионы железа образуют индикаторную систему для обнаружения H₂S. Феноловый красный используется как индикатор pH.

Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют различные кислоты, в результате чего цвет среды изменяется с красного на жёлтый. В столбике при ферментации высвобождается больше кислот, чем в скошенной части при дыхании. Растущие бактерии также образуют щелочные продукты окислительного декарбоксилирования пептона; эти щелочные продукты нейтрализуют значительное количество кислоты в столбике.

Щелочная, красная скошенная часть и кислая, жёлтая зона столбика после инкубации указывают, что микроорганизм ферментирует глюкозу, но не способен ферментировать лактозу и/или сахарозу. Бактерии, ферментирующие лактозу или сахарозу либо оба углевода одновременно в дополнение к глюкозе, образуют большое количество кислоты. В соответствующей зоне реверсия pH не происходит, поэтому скошенная часть и столбик остаются кислыми.

Газообразование (CO₂) выявляют по трещинам или пузырькам в среде, которые появляются при выходе накопившегося газа. Некоторые виды бактерий восстанавливают тиосульфат до сероводорода. H₂S взаимодействует с ионами железа железосодержащих солей с образованием нерастворимого чёрного осадка сульфида железа. Восстановление тиосульфата происходит только в кислой среде, поэтому почернение обычно возникает в столбике пробирки.

Трехсахарный железосодержащий агар следует использовать параллельно с агаром или бульоном с мочевиной (M112/M111) для дифференциации видов Salmonella и Proteus.

Основные реакции интерпретируют следующим образом:

• Щелочная скошенная часть / кислый столбик: ферментирована только глюкоза.
• Кислая скошенная часть / кислый столбик: ферментированы глюкоза и сахароза, глюкоза и лактоза либо все три сахара — глюкоза, лактоза и сахароза.
• Пузырьки или трещины: образование газа.
• Чёрный осадок: образование газа H₂S.

Тип образца

Тип образца: чистый бактериальный изолят из воды, пищевого продукта или клинического материала.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам для пищевой и молочной продукции.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и действующим местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Некоторые представители Enterobacteriaceae и сальмонеллы, образующие H₂S, могут не давать положительную реакцию на H₂S на трёхсахарном железосодержащем агаре. Некоторые бактерии могут образовывать H₂S на железном агаре Клиглера, но не на трёхсах