Дифференциальный агар с бриллиантовым зеленым HiMedia M016B-500G (уп/500 гр)

Дифференциальный селективный агар с бриллиантовым зелёным HiMedia M016B-500G (уп/500 гр) — сухая питательная среда в форме порошка для приготовления агара L с содержанием агара 20,000 г/л. Применяется для селективного выделения видов Salmonella, кроме Salmonella Typhi, из пищевых, молочных, фармацевтических и клинических образцов; из-за высокой селективности рекомендуется использовать его совместно с менее ингибирующей средой.

Назначение и область применения

Дифференциальный агар с бриллиантовым зелёным, феноловым красным, лактозой моногидратом и сахарозой применяется как первичная чашечная среда для выделения видов Salmonella, кроме Salmonella Typhi, из:

• фекалий;
• пищевых продуктов;
• молочных продуктов;
• фармацевтических образцов;
• клинических образцов.

Среда используется при испытаниях на микробиологические пределы, а также совместно с новобиоцином для анализа пищевых образцов. Среда соответствует рецептуре агара L, описанной в Британской фармакопее.

Состав

Расчётный состав на 1 л:

** Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик рабочих свойств среды.

~ Пептон HMC эквивалентен пептону из мяса или казеина.

Принцип действия и интерпретация

Пептон HMC и дрожжевой экстракт обеспечивают среду незаменимыми аминокислотами и длинными пептидными цепями, необходимыми для усиленного роста микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Лактоза моногидрат и сахароза являются ферментируемыми источниками углеводов. Феноловый красный используется как кислотно-основной индикатор: бактерии, ферментирующие лактозу и/или сахарозу, образуют жёлтые колонии или вызывают появление жёлтой окраски.

Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. На среде преимущественно подавляется рост Salmonella Typhi, видов Shigella, Escherichia coli, видов Proteus, видов Pseudomonas и Staphylococcus aureus.

Среда впервые была описана Kristensen и соавторами для дифференциации паратифа B от других грамотрицательных кишечных бактерий. Позднее Kauffmann модифицировал её для выделения Salmonella из образцов стула. Агар с бриллиантовым зелёным также рекомендован Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) и Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA).

Высокая селективность позволяет анализировать образцы с большой посевной дозой и сильно загрязнённые образцы. Для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов среду рекомендуется использовать вместе с менее ингибирующей питательной средой. Культуры, обогащённые в селенитном или тетратионатном бульоне, часто высевают одновременно на агар с бриллиантовым зелёным и на висмут-сульфитный агар, агар SS или агар МакКонки.

Неферментирующие лактозу бактерии формируют белые или розовато-красные колонии после инкубации в течение 18–24 ч.

Методика приготовления

1. Взвесьте 57,59 г сухой среды — эквивалентное количество на 1 л готовой среды.
2. Приготовьте суспензию в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление, соответствующее указанным 15 фунтам давления, составляет приблизительно 0,103 МПа (1,03 бар).
5. Не допускайте перегрева среды.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.
• Фармацевтические образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. Для фармацевтических образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом применимых руководств и локальных стандартов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

• Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
• Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя небольшие красные колонии.
• Для подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические тесты.
• Из-за высокой селективности рекомендуется параллельный посев на менее ингибирующую среду.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид сухой среды

Светло-жёлтый или светло-розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.

pH

pH: 6,70–7,10.

Испытание стимулирования роста

Испытание стимулирования роста проводят в соответствии с Британской фармакопеей. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч.

Степень восстановления принимают за 100 % относительно роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Культуральная реакция

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Испытание стимулирования роста проводят в соответствии с Британской фармакопеей; восстановление для роста бактерий на соево-казеиновом агаре принимают за 100 %.