HiMedia M016B-100G Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым

Питательная агаризованная среда HiMedia M016B-100G «Модифицированный агар с бриллиантовым зеленым» предназначена для селективного выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi, из фекалий, пищевых, молочных и фармацевтических образцов. Среда применяется для первичного посева и дифференциации энтеробактерий, однако для повышения вероятности выделения микроорганизмов должна использоваться совместно с менее ингибирующей питательной средой.

Назначение и область применения

Среда используется для селективного выделения видов Salmonella, кроме Salmonella Typhi, из следующих типов образцов:

• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• фекальные образцы;
• фармацевтические образцы;
• клинические образцы;
• образцы для испытаний на микробиологические пределы.

Состав среды соответствует Британской фармакопее и применяется для первичного посева при выделении видов Salmonella. Среда может использоваться для анализа больших посевных доз и сильно контаминированных образцов благодаря выраженной селективности.

Для повышения вероятности восстановления микроорганизмов рекомендуется одновременно высевать образцы на менее ингибирующую среду. Культуры, предварительно обогащённые в селенитном или тетратионатном бульоне, часто высевают на агар с бриллиантовым зелёным совместно с бисмут-сульфитным агаром, агаром SS и агаром МакКонки.

Состав и принцип действия

Состав среды

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

~ Пептон HMC эквивалентен пептону животного происхождения — мясному или казеиновому.

Принцип действия компонентов

• Пептон HMC и дрожжевой экстракт обеспечивают среду незаменимыми аминокислотами и длинными пептидными цепями, необходимыми для усиленного роста микроорганизмов.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Лактозы моногидрат и сахароза служат ферментируемыми источниками углеводов.
• Феноловый красный является кислотно-основным индикатором: бактерии, ферментирующие лактозу и/или сахарозу, вызывают жёлтое окрашивание.
• Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий.

На среде в основном подавляется рост Salmonella Typhi, видов Shigella, Escherichia coli, видов Proteus, видов Pseudomonas и Staphylococcus aureus.

Неферментирующие лактозу бактерии формируют белые или розовато-красные колонии через 18–24 ч инкубации.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 57,59 г сухой обезвоженной среды — эквивалентное количество на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева среды.

Образцы и обращение с ними

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим руководствам.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методическим руководствам и локальным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

• Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на данной среде.
• Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать энтеропатогены, формируя небольшие красные колонии.
• Для подтверждения результата необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.
• Из-за высокой селективности среду рекомендуется применять совместно с менее ингибирующей средой.

Технические характеристики

• Тип продукта: стандартный
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: порошок
• Масса: 100 г
• Тип упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)
• Происхождение компонентов: животное
• Эквивалентная масса обезвоженной среды: 57,59 г/л
• pH после стерилизации: 6,9 ± 0,2
• Рабочий диапазон pH по контролю качества: 6,70–7,10
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Температура эксплуатации и хранения по данным карточки: 10–30 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Формируется плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.

Испытание на стимулирование роста

Испытание на стимулирование роста проводят в соответствии с требованиями Британской фармакопеи.

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления принимают равным 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

Культуральные характеристики

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Храните сухую среду при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для обеспечения заявленных характеристик используйте продукт в течение установленного срока годности.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные применимыми руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Техническое отличие от менее селективных сред

Агар с бриллиантовым зелёным обеспечивает более выраженное ингибирование большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий, поэтому допускает анализ больших посевных доз и сильно загрязнённых образцов, но требует параллельного использования менее ингибирующей среды для повышения вероятности восстановления целевых микроорганизмов.