Агар дифференциальный с бриллиантовым зеленым и 1,2% агара HiMedia M016A-500G (500 г)

Дифференциальная питательная среда Агар дифференциальный с бриллиантовым зеленым и 1,2% агара HiMedia M016A-500G (500 г) производства HiMedia содержит 1,2 % агара и предназначена для селективного выделения бактерий рода Salmonella. Агар применяют как обогатительную среду при исследовании фекалий, мочи, патологического материала, пищевых продуктов, молочных продуктов и воды; высокая селективность среды может снижать вероятность выделения отдельных микроорганизмов.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для обогащения и выделения Salmonella из следующих типов образцов:

• клинический материал, включая фекалии и мочу;
• патологический материал;
• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• вода.

Среда предназначена для применения in vitro и только квалифицированным персоналом.

Состав

Состав среды:

• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2.
• Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.
• Происхождение компонентов: животное.
• Тип продукта: стандартный.
• Физическая форма: порошок.
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE).
• Назначение изделия: агар.
• Масса: 500 г.
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709.

Принцип действия и интерпретация

Бактерии рода Salmonella вызывают различные инфекции — от легкого самоограничивающегося гастроэнтерита до угрожающей жизни брюшнотифозной инфекции. Наиболее распространенная форма сальмонеллезной инфекции — самоограничивающийся гастроэнтерит с лихорадкой продолжительностью менее 2 суток и диареей продолжительностью менее 7 суток.

Модифицированная основа агара с бриллиантовым зеленым для первичного посева и выделения видов Salmonella была впервые описана Kristensen и соавторами, а затем модифицирована Kauffmann. Среда содержит бриллиантовый зеленый, подавляющий рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. Рост Salmonella Typhi, видов Shigella, Escherichia coli, Proteus, Pseudomonas и Staphylococcus aureus в большинстве случаев подавляется.

Клинические образцы можно непосредственно высевать на эту среду. Поскольку среда обладает высокой селективностью, ее рекомендуется использовать совместно со средой с меньшим ингибирующим действием для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов. Культуры, предварительно обогащенные в селенитной среде M025 или жидкой тетратионатной среде без йода с бриллиантовым зеленым M032, часто высевают одновременно на агар с бриллиантовым зеленым и 1,2 % агара, бисмут-сульфитный агар M027, SS-агар M108 и агар МакКонки M081.

Пептон протеозный и дрожжевой экстракт обеспечивают поступление азотистых и углеродистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ. Феноловый красный служит кислотно-основным индикатором и при ферментации лактозы и/или сахарозы придает среде желтую окраску. Бактерии, не ферментирующие лактозу, через 18–24 ч инкубации образуют колонии от белого до розовато-красного цвета.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 25,0 г порошка в 500 мл дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении ≈0,103 МПа (15 фунтов давления) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Для повышения селективности в асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки S Selective Supplement FD068.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри или используйте иным предусмотренным способом.

Не допускайте перегрева среды.

Пробоподготовка и обращение с образцами

• При работе с клиническими образцами используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.
• Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязненные материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид и гелеобразование

• Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от бежевого до светло-розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,2 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.
• Реакция: реакция 5,0 % водного раствора при 25 °C.
• pH: 6,9 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральную реакцию определяли после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Степень восстановления принята равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Salmonella Typhi и виды Shigella могут не расти на этой среде.
• Виды Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя мелкие красные колонии.
• Из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать совместно со средой с меньшим ингибирующим действием для повышения вероятности восстановления целевых микроорганизмов.
• Рабочие характеристики среды ожидаются при применении согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия необходимо плотно закрывать флакон и хранить продукт в сухом состоянии.
• Порошок гигроскопичен; при поглощении влаги возможно образование комков.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Материалы, загрязненные инфекционными образцами или контактировавшие с кли