Дифференциальный агар с бриллиантовым зеленым модифицированный HiMedia M016-500G (уп/500 гр)

Дифференциальный агар с бриллиантовым зелёным модифицированный HiMedia M016-500G (уп/500 гр) — порошковая селективно-дифференциальная питательная среда для выделения сальмонелл, за исключением Salmonella Typhi, из клинических, пищевых, молочных, водных и фармацевтических образцов. Среда содержит бриллиантовый зелёный и феноловый красный, а готовится в концентрации 29,0 г на 500 мл воды с автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин.

Назначение и область применения

Среду применяют для селективного выделения Salmonella spp., кроме Salmonella Typhi, из:

• фекалий;
• пищевых продуктов;
• молочных продуктов;
• воды;
• фармацевтических образцов.

Клинический материал можно высевать непосредственно на среду. Из-за высокой селективности рекомендуется параллельно использовать менее ингибирующую питательную среду для повышения вероятности выделения возбудителя.

Культуры после обогащения в селенитовой среде или тетратионатном бульоне высевают на модифицированный бриллиантовый зелёный агар совместно с одной или несколькими средами:

• висмут-сульфитный агар;
• сальмонелла-шигелла агар;
• агар МакКонки.

Среда впервые была предложена Kristensen и соавторами как среда для первичного посева при выделении сальмонелл, затем модифицирована Kauffmann и соавторами. Пропись используется в методиках микробиологического исследования клинических, пищевых, молочных и водных образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

• Конечное значение pH: 6,9 ± 0,2 при 25 °C.
• Расчётная концентрация агара: 2,0 % в готовой среде.

Принцип действия и интерпретация

Протеозопептон и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов, аминокислот и других необходимых питательных веществ. Лактоза и сахароза являются источниками энергии.

Ферментация лактозы и/или сахарозы вызывает образование кислых продуктов и снижение pH среды. Изменение кислотности регистрируется индикатором феноловым красным: при ферментации среда приобретает жёлтую окраску.

Натрия хлорид поддерживает осмотическое равновесие. Бриллиантовый зелёный подавляет рост большинства грамположительных и многих грамотрицательных бактерий, включая преимущественно Salmonella Typhi, Shigella spp., Escherichia coli, Pseudomonas spp. и Staphylococcus aureus.

Неферментирующие лактозу бактерии через 18–24 ч инкубации образуют белые или розовато-красные колонии. На среде могут формироваться мелкие красные колонии, похожие на колонии возбудителей кишечных инфекций, при росте Proteus spp., Pseudomonas spp. и Citrobacter spp.

При подозрении на большое количество сопутствующей микрофлоры среду можно дополнительно обогатить сульфацетамидом в концентрации 1 г/л и натрия манделатом в концентрации 0,25 г/л.

Методика приготовления

Приготовление основной среды

1. Суспендируйте 29,0 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды. В локальной прописи для M016 указано 58,0 г порошка на 1000 мл воды.
2. Нагрейте среду до кипения для полного растворения компонентов.
3. Простерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин. В локальной прописи указан режим 1,1 атм, 121 °C, 15 мин.
4. Не перегревайте среду.
5. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
6. Для повышения селективности асептически внесите восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки Sulpha Supplement (FD068).
7. Тщательно перемешайте среду.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Для порошка M016A в локальной прописи указано использование 50,0 г порошка на 1000 мл дистиллированной воды.

Ограничения применения

1. Среда селективна для Salmonella, однако на ней могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
2. Salmonella Typhi и Shigella spp. могут не расти на этой среде.
3. Proteus spp., Pseudomonas spp. и Citrobacter spp. могут имитировать энтеропатогенные микроорганизмы, образуя мелкие красные колонии.
4. Предположительно выделенные изоляты Salmonella необходимо дополнительно подтвердить соответствующими методами идентификации.
5. Для повышения вероятности выделения возбудителя высокоселективную среду рекомендуется применять вместе со средой с меньшим ингибирующим действием.

Типы образцов и обращение с ними

Для клинических образцов необходимо использовать утверждённые методики обращения с материалом.

Для пищевых и молочных образцов следует применять утверждённые методики отбора и подготовки проб.

Для водных образцов необходимо использовать методики отбора и обработки проб в соответствии с действующими требованиями и местными нормативами.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: агар
• Сертификат: ФСЗ 2009/03709
• Масса упаковки: 500 г
• Дозировка: 29,0 г на 500 мл очищенной или дистиллированной воды
• Дозировка по локальной прописи: 58,0 г на 1000 мл воды для M016; 50,0 г на 1000 мл воды для M016A
• Конечное значение pH: 6,9 ± 0,2 при 25 °C
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Концентрация раствора для контроля pH: 5,8 % масс./об. при 25 °C
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный или слегка опалесцирующий зеленовато-к