HiMedia M016-100G Модифицированная основа агара с бриллиантовым зеленым

Модифицированная основа агара с бриллиантовым зеленым HiMedia M016-100G — сухая порошкообразная питательная среда массой 100 г для селективного выделения сальмонелл, кроме Salmonella Typhi. Применяется для анализа фекалий, пищевых продуктов, молочных образцов, воды и фармацевтических образцов, при этом другие представители семейства Enterobacteriaceae также могут расти на среде.

Назначение

Основа агара с бриллиантовым зеленым, модифицированная, предназначена для селективного выделения Salmonella spp., кроме Salmonella Typhi, из:

• фекалий;
• пищевых продуктов и молочных образцов;
• образцов воды;
• фармацевтических образцов.

Среда может использоваться для непосредственного посева клинических образцов. Из-за высокой селективности рекомендуется применять её совместно со средой с меньшей ингибирующей активностью для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Назначение изделия: основа
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение: животное
• Масса: 100 г

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 29,0 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Для повышения селективности в асептических условиях добавьте регидратированное содержимое 1 флакона селективной добавки S Selective Supplement (FD068).
7. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

В состав среды входит бриллиантовый зелёный, подавляющий рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий. В основном подавляются Salmonella Typhi, виды рода Shigella, Escherichia coli, виды рода Pseudomonas и Staphylococcus aureus.

Модифицированная основа агара с бриллиантовым зелёным была первоначально описана Kristensen и соавторами как первичная среда для выделения видов Salmonella, а затем модифицирована Kauffmann. Среда также описана в Европейской фармакопее (EP), Британской фармакопее (BP) и Индийской фармакопее (IP), а также рекомендована методическими источниками APHA и FDA.

Пептон протеозный и дрожжевой экстракт обеспечивают поступление углерода, азота, витаминов, аминокислот и других необходимых питательных веществ. Лактоза и сахароза служат источниками энергии. Ферментация лактозы и/или сахарозы приводит к образованию кислых продуктов и снижению pH, которое регистрируется индикатором феноловым красным. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Бриллиантовый зелёный подавляет сопутствующую микрофлору.

При подозрении на большое количество конкурирующих микроорганизмов среду можно дополнительно снабдить сульфацетамидом в концентрации 1 г/л и манделатом натрия в концентрации 0,25 г/л.

Неферментирующие лактозу бактерии формируют белые или розовато-красные колонии после инкубации в течение 18–24 ч.

Обогащённые в селенитном или тетратионатном бульоне культуры часто высевают на агар с бриллиантовым зелёным одновременно с висмут-сульфитным агаром, SS-агаром и агаром МакКонки.

Пробоподготовка и обращение с образцами

• Клинические образцы: обработку фекалий выполняйте с применением соответствующих методов обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Пищевые и молочные образцы: сбор и обработку выполняйте с применением соответствующих методов согласно профильным руководствам.
• Образцы воды: отбор и обработку выполняйте согласно руководствам и местным стандартам.

Ограничения применения

1. Несмотря на селективность среды в отношении Salmonella, на ней могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
2. Salmonella Typhi и виды рода Shigella могут не расти на этой среде.
3. Виды родов Proteus, Pseudomonas и Citrobacter могут имитировать кишечные патогены, образуя небольшие красные колонии.
4. Предположительно выделенные изоляты Salmonella необходимо дополнительно подтверждать.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие микробиологические лабораторные практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-розовый однородный сыпучий порошок.

Желирование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.

Реакция

Реакция 5,8%-ного водного раствора по массе при 25 °C:

• pH: 6,9 ± 0,2

Диапазон pH

• pH: 6,70–7,10

Культуральные характеристики

Культуральную реакцию оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. Степень восстановления принята за 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре.