Основа среды Хойла HiMedia M015-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная основа среды Хойла HiMedia M015-500G (уп/500 г) для выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae. Высокоселективная среда применяется для анализа клинических и неклинических образцов; сертификат ФСЗ 2009/03709.

Принцип измерения и интерпретация

Среда разработана Хойлом как модификация состава Нилла для изоляции и дифференциации C. diphtheriae. В отличие от оригинального состава, данная модификация меньше подавляет рост некоторых штаммов биовара mitis, обеспечивая при этом быстрый рост всех дифтерийных палочек.

Пептон и пептон HM B служат источниками углерода, азота, аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ. Теллурит калия выступает в роли селективного агента, который подавляет рост большинства представителей нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, за исключением Corynebacterium.

Ввиду высокой селективности среду Хойла следует использовать в сочетании с неселективными средами, такими как сывороточная среда Леффлера (M537) и основа кровяного агара (M089) с 10 % лошадиной сыворотки.

Область применения

Среда используется для исследования следующих типов образцов:

• Мазки из зева;
• Мазки из носа;
• Мазки из ран.

Для изучения морфологии выросших микроорганизмов применяют окрашивание генцианвиолетом. Для демонстрации характерных морфологических и тинкториальных свойств C. diphtheriae по методам Нейссера или Альбертса рекомендуется использовать колонии, выращенные на среде Леффлера. Токсигенность выделенных штаммов определяется методом Илека.

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,0 г порошка в 940 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Остудите до 45–50 °C.
5. Асептично добавьте 50 мл лизированной крови и 10 мл 3,5 % раствора теллурита калия (FD047).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Посев и инкубация

Поскольку C. diphtheriae обычно присутствуют в небольшом количестве, посев осуществляется путем прямого растирания тампона по всей поверхности среды. При отрицательном результате инкубацию продолжают до 72 часов.

Технические характеристики

Состав (г/л)

• Конечное значение pH (при 25 °C): 7,8 $\pm$ 0,2.

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид порошка: гомогенный сыпучий порошок от кремового до светло-желтого цвета.
• Плотность: плотный гель, соответствующий по консистенции 1,5 % агаровому гелю.
• Цвет и прозрачность:
  • Основа среды: янтарная, прозрачная или слегка опалесцирующая.
  • После добавления крови и теллурита: коричнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 4,0 % водного раствора при 25 °C составляет 7,8 $\pm$ 0,2 (диапазон 7,60–8,00).

Культуральные свойства

Характеристики референс-штаммов после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч (с добавлением 50 мл лизированной крови и раствора теллурита):

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре от +10 до +30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре от +2 до +8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда предназначена только для профессионального использования в целях диагностики in vitro.
• Каждый лот протестирован на стандартных организмах, однако рост госпитальных изолятов может варьироваться в зависимости от их трофических потребностей.
• Для окончательного подтверждения необходимо проведение биохимических и серологических тестов.
• После использования контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.

Комплект поставки и совместимость

По заявке поставляются дополнительные компоненты:

• |FD047:Potassium Tellurite 3.5%| Теллурит калия 3,5 % раствор