Основа среды Хойла HiMedia M015-500G (уп/500 гр)

Основа дифференциальной питательной среды «Хойла» HiMedia M015-500G (уп/500 гр) производства HiMedia — высокоселективная среда для выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae. Основа применяется для посева клинических и неклинических образцов, но из-за высокой селективности должна использоваться совместно с неселективными средами; токсигенность выделенных штаммов определяют методом Илека.

Назначение и область применения

HiMedia M015-500G предназначена для выделения и дифференциации типов Corynebacterium diphtheriae из клинических и неклинических образцов.

Тип питательной среды: дифференциальная
Назначение изделия: основа питательной среды
Сертификат: ФСЗ 2009/03709
Физическая форма: порошок
Происхождение компонентов: животное
Тип продукта: стандартный
Материал упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности)

Наиболее распространённое заболевание, вызываемое Corynebacterium diphtheriae, — дифтерия, острая инфекционная болезнь с местным поражением верхних дыхательных путей и системным действием токсина, наиболее выраженным на сердце и периферические нервы.

Состав

Состав среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Конечное значение pH при 25 °C: 7,8 ± 0,2.

Принцип действия

Среда Хойла разработана Хойлом как модификация исходной рецептуры Neill для выделения и дифференциации Corynebacterium diphtheriae. В отличие от исходной рецептуры, среда не подавляет рост некоторых типов Corynebacterium биовара mitis.

Пептон и HM peptone B служат источниками углерода, азотистых веществ, аминокислот, витаминов и других необходимых питательных компонентов.

Теллурит калия выполняет функцию селективного агента: он подавляет большинство представителей нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, за исключением Corynebacterium.

Среда является высокоселективной, поэтому её следует использовать совместно с неселективными средами:

• сывороточная среда Леффлера M537;
• основа кровяного агара M089 с 10 % лошадиной крови;
• основа кровяного агара с 10 % лошадиной сыворотки.

Обычно Corynebacterium diphtheriae присутствуют в материале в небольшом количестве, что позволяет получать хорошо изолированные колонии. Посев выполняют непосредственно тампоном, растирая его по всей поверхности среды.

Типы образцов

Для клинического применения используют:

• мазок из зева;
• мазок из носа;
• мазок из раны.

При работе с клиническими образцами необходимо соблюдать утверждённые методики обращения и обработки образцов.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,0 г порошка в 940 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл лизированной крови и 10 мл селективной добавки PTe 3,5 % FD047 — по 1 мл на флакон.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Дополнительный компонент поставляется по заявке:

• FD047 — 3,5%-ный раствор теллурита калия, селективная добавка.

Методика посева и интерпретация

1. Материал с клинического мазка непосредственно переносят на поверхность приготовленной среды.
2. Тампон равномерно растирают по всей поверхности среды для получения изолированных колоний.
3. Посевы инкубируют при 35–37 °C.
4. При отрицательном результате инкубацию продолжают до 72 ч.
5. Для изучения морфологии выросших микроорганизмов выполняют окраску генцианвиолетом.
6. Для выявления характерной морфологии и тинкториальных свойств Corynebacterium diphtheriae методом Нейссера или Альберта рекомендуется использовать изолированные колонии, полученные на среде Леффлера.
7. Токсигенность выделенных штаммов Corynebacterium diphtheriae определяют методом Илека.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид и физические свойства

Внешний вид порошка: однородный, сыпучий, от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность

Цвет и прозрачность приготовленной основы: янтарный цвет, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Цвет и состояние среды после добавления крови и теллурита: в чашках Петри образуется непрозрачный гель коричнево-красного цвета.

Плотность готовой среды: соответствует плотности 1,5%-ного агарового геля.

Кислотность

Условия определения: реакция 4,0%-ного водного раствора, масса/объём, при 25 °C.

Значение pH: 7,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 50 мл лизированной крови и раствора теллурита, затем инкубируют при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Bacillus spizizenii ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Каждая серия среды проверяется на стандартных микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Рост клинических изолятов, полученных из больничного материала, может варьироваться в зависимости от их потребностей в питательных веществах.

Ограничения применения

• Среда предназначена только для диагностики in vitro.
• Продукт предназначен только для профессионального применения.
• Для подтверждения идентификации необходимо выполнять биохимические и серологические тесты.
• Рост клинических изолятов может отличаться от характеристик референс-штаммов из-за различий в питательных потребностях.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении в соответствии с инструкцией на этикетке, соблюдении рекомендованных условий хранения и использовании до истечения срока годности.

Условия хранения

Условия хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.

После вскрытия флакон необходимо пл