HiMedia M015-100G Основа среды Хойла

Высокоселективная основа среды Хойла HiMedia M015-100G для изоляции и дифференциации штаммов Corynebacterium diphtheriae из клинических и неклинических образцов. Применяется для выделения возбудителя дифтерии; обладает высокой избирательностью за счёт использования теллурита калия.

Принцип измерения и интерпретация

Среда Хойла является модификацией рецептуры Нейлла и предназначена для выделения и дифференциации C. diphtheriae. В отличие от оригинального состава, данная среда не подавляет рост некоторых типов Corynebacterium mitis.

Пептон и HM-пептон B обеспечивают подачу углерода, азота, аминокислот, витаминов и других необходимых питательных веществ. Теллурит калия выступает в роли селективного агента, который подавляет рост большинства представителей нормальной микрофлоры верхних дыхательных путей, за исключением Corynebacterium.

Ввиду высокой селективности среду Хойла следует использовать совместно с неселективными средами, такими как сывороточная среда Лёффлера (M537) и основа агара с кровью (M089) с 10 % крови лошади. Поскольку C. diphtheriae обычно присутствуют в малом количестве, инокуляцию проводят путём прямого растирания мазка по всей поверхности среды. Инкубацию продолжают до 72 часов при отрицательных результатах. Для изучения морфологии применяют окрашивание генцианвиолетом; для демонстрации характерных реакций по методам Нейссера или Альберта рекомендуется использовать колонии со среды Лёффлера. Токсигенность штаммов определяется методом Элека.

Методика приготовления и использования

Подготовка среды

1. Суспендируйте 40,0 г порошка в 940 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл гемолизированной крови и 10 мл селективной добавки PTe 3,5 % (FD047, по 1 мл в одном флаконе).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Работа с образцами

• Типы образцов: мазки из зева, мазки из носа, мазки из ран.
• Сбор и обработка: сбор клинического материала осуществляется согласно установленным руководствам.
• Утилизация: загрязнённые материалы перед утилизацией подлежат стерилизации в автоклаве.

Технические характеристики

Основные параметры

• Назначение: основа питательной среды
• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет порошка: от кремового до жёлтого, однородный, свободно текучий
• Цвет готовой среды (база): янтарный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Цвет готовой среды (с кровью и теллуритом): коричнево-красный, непрозрачный гель
• Реакция (pH 4 % раствора при 25 °C): 7,8 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 7,60–8,00
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром
• Происхождение компонентов: животное
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 50 мл гемолизированной крови и раствора теллурита после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Ограничения: каждая партия тестируется на стандартных организмах (согласно COA), однако рост госпитальных изолятов может варьироваться в зависимости от их трофических потребностей. Для подтверждения результатов обязательны биохимические и серологические тесты.

Меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro. Только для профессионального использования.
• Использовать средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с клиническими образцами и культурами.