HiMedia M011F-500G Основа соево-казеиновой среды

Питательная среда HiMedia M011F-500G Основа соево-казеиновой среды — порошковая основа массой 500 г для приготовления питательной среды без полимиксина. Применяется для селективного выделения Bacillus cereus и анализа методом наиболее вероятного числа (НВЧ) в пищевых образцах; температура хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

Основа соево-казеиновой среды HiMedia M011F-500G с добавлением полимиксина B предназначена для селективного выделения Bacillus cereus и проведения анализа методом наиболее вероятного числа. Состав и критерии эффективности соответствуют требованиям FDA BAM, 1998, ISO 21871 и ISO 11133:2014/Amd.2:2020 (E).

Без селективной добавки соево-казеиновая среда является высокопитательной средой для культивирования широкого спектра микроорганизмов. Для селективного обогащения Bacillus cereus в приготовленную среду добавляют стерильный раствор сульфата полимиксина B FD003.

Состав

ISO 21871: триптон-соевый бульон с полимиксином

M011F: основа соево-казеиновой среды без полимиксина

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Состав включает панкреатический гидролизат казеина и папаиновый гидролизат соевой муки.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Масса: 500 г
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 30 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Добавьте один флакон стерильного раствора сульфата полимиксина B FD003 до конечной концентрации 100 Ед/мл.
5. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в необходимую лабораторную посуду.

Если в растворе обнаруживаются волокна, рекомендуется профильтровать раствор через фильтр с размером пор 0,22 мкм, чтобы исключить присутствие волокон.

Принцип действия и интерпретация

Bacillus cereus — крупная грамположительная палочковидная бактерия размером 1 × 3–4 мкм, образующая эндоспоры и способная к факультативному аэробному росту. Бактерия относится к мезофильным микроорганизмам, распространена в окружающей среде, овощах и различных переработанных пищевых продуктах.

При благоприятных условиях Bacillus cereus может достигать численности, вызывающей желудочно-кишечные заболевания. Вспышки пищевых отравлений связывают с варёным и приготовленным рисом, термически обработанным мясом и овощами. Инфекция сопровождается диареей, обусловленной действием термолабильного и кислотолабильного энтеротоксина.

Соево-казеиновая основа с полимиксином B FD003 применяется для селективного выделения Bacillus cereus и анализа методом наиболее вероятного числа в соответствии с FDA BAM и ISO. Bacillus cereus, как правило, устойчив к полимиксину B, поэтому добавление полимиксина в среду способствует селективному выделению микроорганизма.

Триптон и соевый пептон обеспечивают питательность среды за счёт аминокислот и длинноцепочечных пептидов, необходимых для роста микроорганизмов. Декстроза служит источником углеводов, двузамещённый фосфат калия — буферным компонентом, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

FDA BAM рекомендует два метода проверки присутствия Bacillus cereus:

1. Метод серийных разведений.
2. Метод наиболее вероятного числа.

Методика серийных разведений

1. Приготовьте соответствующие разведения предполагаемо загрязнённых образцов в фосфатно-буферной воде для разбавления Баттерфилда R094.
2. Нанесите по 0,1 мл каждого соответствующего разведения поверхностным посевом на основу агара MYP M636F.
3. После инкубации проведите оценку роста и последующие биохимические тесты для подтверждения вида.

Методика наиболее вероятного числа

1. Внесите по 1 мл каждого из разведений 10⁻¹, 10⁻² и 10⁻³ в соево-казеиновую основу M011F с добавлением полимиксина B FD003.
2. Инкубируйте посевы в течение 48 ± 2 ч при температуре 30 ± 2 °C.
3. Помутнение среды после инкубации указывает на возможное присутствие Bacillus cereus.
4. Положительные культуры пересевайте на основу агара MYP M636F.
5. Инкубируйте посевы 18–24 ч при 30 °C.
6. Bacillus cereus образует колонии розового цвета, окружённые зоной преципитации вследствие лецитиназной активности.
7. Для подтверждения вида выполните биохимические тесты.

Согласно ISO, селективное обогащение проводят в среде M011F, а выделение микроорганизма — на агаре PEMBA M1484.

Тип образцов

Материал для исследования: пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

pH 3,0 % масс./об. водного раствора при 25 °C: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики продуктивности и селективности определяют после добавления селективной добавки полимиксина B FD003 и инкубации при 30 ± 1 °C в течение 48 ± 4 ч.

Ключ: * — соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

Храните продукт в плотно закрытой ёмкости при температуре 10–30 °C. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности,