HiMedia M011F-500G Основа соево-казеиновой среды

Основа соево-казеиновой среды HiMedia M011F-500G для селективного выделения и определения наиболее вероятного числа (MPN) B. cereus. Применяется для анализа проб пищевых продуктов в соответствии с методами ISO 21871 и FDA BAM; вес упаковки составляет 500 г.

Область применения

Среда рекомендуется для селективного выделения и использования метода MPN при определении Bacillus cereus в пищевых продуктах. Состав и критерии эффективности соответствуют спецификациям FDA BAM (1998), ISO 21871, а также ISO 11133:2014 и Amd.2:2020 (E).

Принцип измерения и интерпретация

Bacillus cereus представляет собой крупную (1 × 3–4 мкм), грамположительную палочковидную бактерию, образующую эндоспоры, факультативный аэроб. Микроорганизм является мезофильным, широко распространен в природе, в овощах и переработанных продуктах питания. При благоприятных условиях размножается до количеств, вызывающих желудочно-кишечные заболевания.

Основа соево-казеиновой среды (SCDM) при добавлении полимиксина B (FD003) используется для селективного обогащения B. cereus, так как данный вид в целом устойчив к полимиксину B. Без добавок SCDM является высокопитательной средой, подходящей для культивирования широкого спектра организмов.

• Триптон и соевый пептон: обеспечивают аминокислоты и длинноцепочечные пептиды для роста.
• Декстроза: служит источником углеводов.
• Динатриевый фосфат калия: выполняет функцию буфера.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.

Методы анализа по FDA BAM

1. Метод серийных разведений: разведения проб в фосфатно-буферной воде Баттерфилда (R094) с последующим посевом 0,1 мл на агар MYP (M636F).
2. Метод MPN: инокуляция 1 мл разведений $10^{-1}$, $10^{-2}$ и $10^{-3}$ в среду M011F с добавлением полимиксина (FD003). Инкубация проводится 48 ± 2 ч при 30 ± 2 °C. Появление мутного роста свидетельствует о наличии B. cereus. Положительные культуры пересевают на агар MYP (M636F) с инкубацией 18–24 ч при 30 °C, где B. cereus образует розовые колонии с зоной осадка (лецитиназная активность).

Метод по ISO

Селективное обогащение проводится в среде M011F с последующим выделением на агаре PEMBA (M1484).

Состав

ISO 21871: Tryptone Soya Polymyxin Broth

M011F: Soyabean Casein Digest Medium Base w/o Polymyxin

Примечание: Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности. Триптон получен путем панкреатического переваривания казеина; соевый пептон — путем папаинового переваривания соевой муки.

Методика приготовления

1. Суспендировать 30 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть для полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Добавить одну ампулу стерильного раствора сульфата полимиксина B (FD003) до конечной концентрации 100 Ед/мл.
5. Тщательно перемешать и разлить по емкостям.

Важно: при обнаружении волокон в растворе рекомендуется фильтровать его через фильтр с размером пор 0,22 мкм.

Технические характеристики

Контроль качества и культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении селективной добавки полимиксина B (FD003) после инкубации при 30 ± 1 °C в течение 48 ± 4 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: от +10 до +30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре +20…+30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

1. Различные организмы могут иметь разные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
2. Каждая партия тестируется на организмах, указанных в сертификате анализа (COA). Пользователю рекомендуется валидировать среду для специфических микроорганизмов исходя из своих уникальных требований.
3. При работе с образцами и культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности. Используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
4. Загрязненные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.