HiMedia LQ156-50X5ML Основа декарбоксилазного бульона, Мёллер (50×5 мл)

Основа питательной среды HiMedia LQ156-50X5ML Основа декарбоксилазного бульона, Мёллер (50×5 мл) — готовая к использованию стерильная среда во флаконах по 5 мл. Применяется с добавлением соответствующей L-аминокислоты для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты, только для профессионального применения и диагностики in vitro.

Назначение

С добавлением соответствующей L-аминокислоты среда используется для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоту.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Эквивалент мясного экстракта.

Принцип действия и интерпретация результатов

Бульонная основа для декарбоксилазного теста Мёллера используется для дифференциации грамотрицательных кишечных палочек по способности декарбоксилировать аминокислоты. Метод декарбоксилазного бульона был введён Мёллером для выявления образования лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы. До работ Мёллера бактериальные декарбоксилазы аминокислот изучались Гейлом, а также Гейлом и Эппсом.

Образование орнитиндекарбоксилазы является дополнительным критерием дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter. Бактерии рода Klebsiella неподвижны и не образуют орнитиндекарбоксилазу, тогда как бактерии рода Enterobacter подвижны и образуют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Пептон и HM-пептон B обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми для роста бактерий питательными веществами. Декстроза является ферментируемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный выполняют функцию индикаторов pH.

При посеве бактерий, ферментирующих декстрозу, pH среды снижается вследствие образования кислоты, из-за чего цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый. Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазу. При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин, а при декарбоксилировании орнитина — путресцин. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.

Образование этих аминов повышает pH среды и изменяет цвет индикатора с жёлтого на пурпурный. Если микроорганизмы не образуют соответствующий фермент, среда остаётся кислой и жёлтой.

Каждый исследуемый изолят также необходимо инокулировать в пробирку с основой декарбоксилазного бульона Мёллера без соответствующей аминокислоты. Инокулированные пробирки необходимо защищать от контакта с воздухом слоем стерильного минерального масла. Воздействие воздуха может вызвать ощелачивание поверхности среды, что делает результат теста недействительным.

Методика проведения

1. Промаркируйте флакон LQ156 с готовой к использованию средой.
2. Инокулируйте образец.
3. Инкубируйте при заданных температуре и продолжительности.

Тип образца

Чистый изолят, полученный из клинических и неклинических образцов.

Сбор и обращение с образцами

Для чистого изолята используйте соответствующие методы сбора и обработки образца согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

• Некоторые требовательные к условиям культивирования микроорганизмы могут давать замедленную реакцию.
• Для получения корректных результатов обязательно покрывать среду слоем минерального масла.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкциями на маркировке, в течение срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

• Внешний вид: стерильная основа декарбоксилазного бульона Мёллера во флаконе.
• Цвет: прозрачный раствор от светло-коричневого до серовато-пурпурного и светло-пурпурного.
• Количество среды: 5 мл среды во флаконе.
• pH: 5,80–6,20.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением дисков с аминокислотами: дисков с гидрохлоридом лизина (DD049), гидрохлоридом аргинина (DD050) и гидрохлоридом орнитина (DD051), а также после покрытия стерильным минеральным маслом.