HiMedia HD041-5TB HiDip HiCrome Универсальный агар-PCA

Универсальный агар-PCA HiMedia HD041-5TB HiDip HiCrome (производство: HiMedia) представляет собой комбинированную питательную среду для дифференциальной идентификации микроорганизмов и определения общего микробного числа. Применяется для анализа клинических образцов (разведений фекалий) и проб воды; включает две разные среды на отдельных поверхностях одного слайда.

Принцип измерения и интерпретация

Слайд содержит две разные среды:

1. HiCrome® Universal Differential Medium: дифференциальная среда для предварительной идентификации микроорганизмов. Цвета колоний формируются за счет реакции специфических ферментов рода или вида с двумя хромогенными субстратами.

   • Фермент $\beta$-глюкозидаза, присущий энтерококкам (Enterococcus species), расщепляет один из субстратов, что приводит к образованию сине-зеленых колоний.
   • Фермент $\beta$-галактозидаза, присущий E. coli, расщепляет другой хромогенный субстрат, в результате чего образуются пурпурные колонии.
   • Дифференциация и подтверждение E. coli от других колоний аналогичного цвета осуществляется с помощью теста на индол.
   • Колиформы также вырабатывают ферменты, расщепляющие данные субстраты, что дает характерную окраску колоний.

2. Plate Count Agar (PCA): стандартная среда для подсчета общего числа микроорганизмов в пищевых продуктах, воде и сточных водах. Рекомендована стандартами APHA, FDA и комитетом ISO.

Методика проведения анализа

Работа с поверхностями

1. Ослабьте крышку и извлеките слайд HiDip™ из контейнера, стараясь не касаться поверхностей агара. Проверьте среду на предмет дегидратации или контаминации.
2. Аккуратно опустите слайд и прижмите агар к тестируемой поверхности, сгибая пластину по линии шарнира.
3. Приложите равномерное и плотное давление в течение 15–20 секунд. Избегайте размазывания агара по поверхности.
4. Повторите процедуру, используя вторую поверхность агара на участке, прилегающем к первой точке забора.
5. Верните слайд в контейнер и плотно закройте его. Инкубируйте в вертикальном положении при указанной температуре.

Работа с жидкостями

1. Ослабьте крышку и извлеките слайд HiDip™ из контейнера. Проверьте среду на предмет дегидратации или контаминации.
2. Погрузите слайд в исследуемую жидкость на 15–20 секунд так, чтобы поверхность агара была полностью покрыта. (При недостаточном объеме пробы налейте образец на поверхность слайда).
3. Дайте жидкости стечь, аккуратно постучав по слайду для удаления излишков с поверхности.
4. Верните слайд в контейнер и плотно закройте его.
5. Маркируйте контейнер (номер образца, источник, дата и время). Инкубируйте в вертикальном положении при указанной температуре.

Технические характеристики

Состав HiCrome® Universal Differential Medium

Состав Plate Count Agar (PCA)

Контроль качества

• Внешний вид: Стерильный слайд HiDip™ с комбинацией сред HiCrome® Universal Differential Medium и Plate Count Agar на разных поверхностях.
• Цвет HiCrome® Universal Differential Medium: Светло-янтарный.
• Цвет Plate Count Agar: Светло-желтый.
• Количество среды: 1,5 мл на одну поверхность.
• Тест на стерильность: Соответствует критериям выпуска.
• Диапазон pH HiCrome® Universal Differential Medium: 7,00–7,40.
• Диапазон pH Plate Count Agar: 6,80–7,20.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 24–72 часов.

Ограничения применения

• HiCrome® Universal Differential Medium: поскольку реакция основана на взаимодействии фермент-субстрат, интенсивность окраски может варьироваться в зависимости от изолята.
• Plate Count Agar: является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных (fastidious) организмов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение: при получении хранить при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.
• Меры предосторожности: только для диагностики in vitro. При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.

Утилизация

Использованные слайды HiDip™ содержат живые микроорганизмы и требуют осторожного обращения. Утилизация осуществляется путем:

• погружения в подходящий дезинфицирующий раствор (например, детттол, фенил и др.) на ночь;
• автоклавирования после снятия крышки.