Готовая чашка с агаром HiCombi™ маннит Salt - маннит Salt агар в чашке HiMedia HB011-50PT (50 чашек) — селективная среда с 7,5 % хлорида натрия. Среда предназначена для выделения и пересевания Staphylococcus aureus при микробиологическом контроле фармацевтических образцов; для идентификации требуется подтверждающее биохимическое исследование.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и пересевания Staphylococcus aureus в соответствии с гармонизированным методом USP/EP/BP/JP/IP. Также применяется для микробиологических испытаний на пределы содержания микроорганизмов с целью селективного выделения Staphylococcus.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Концентрации компонентов указаны на 1 л среды.

Пептический перевар животной ткани

Панкреатический перевар казеина

Эквивалент мясного экстракта

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стафилококки широко распространены в природе, преимущественно встречаются на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является условно-патогенным микроорганизмом человека. Способность свертывать плазму остаётся широко применяемым критерием идентификации патогенных стафилококков, вызывающих острые инфекции.

Стафилококки способны расти на средах с высокой концентрацией соли. Агар с феноловым красным и маннитом, содержащий 7,5 % NaCl, применяют для выделения коагулазоположительных стафилококков из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов. Входящие в состав пептон HM B, триптон и пептон обеспечивают среду источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами, другими необходимыми факторами роста и микроэлементами. Хлорид натрия в концентрации 7,5 % подавляет рост многих бактерий, кроме стафилококков.

При ферментации маннита образуется кислота, которую выявляет индикатор феноловый красный. S. aureus ферментирует маннит: колонии приобретают жёлтый цвет и окружены жёлтыми зонами. Коагулазоотрицательные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннит и формируют розовые или красные колонии, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить тестом на коагулазу в пробирке или на предметном стекле. Для выявления липазной активности S. aureus в среду можно добавить эмульсию яичного желтка FD045: положительная реакция проявляется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

Предполагаемый S. aureus необходимо подтвердить тестом на коагулазу. Перед проведением этого и других диагностических тестов культуру следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, чтобы избежать возможного влияния соли на результаты; например, использовать питательный бульон (M002). Некоторые штаммы S. aureus могут ферментировать маннит с задержкой. Отрицательный результат следует перепроверить после дополнительной инкубации в течение 24 ч, прежде чем отбраковывать культуру.

Методика посева

1. Асептически нанесите на поверхность среды исследуемый инокулят в количестве 50–100 КОЕ.

Сбор и обработка образцов

Для фармацевтических образцов используйте надлежащие методы отбора и обработки проб согласно применимым руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид: стерильная чашка Mannitol Salt - Mannitol Salt Agar в одноразовой двойной чашке диаметром 90 мм.

Цвет и прозрачность подготовленной среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.

pH: 7,20–7,60.

Объём среды: 10 мл в каждой половине чашки.

Тест на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Тест на ростовые свойства проведён в соответствии с гармонизированным методом USP/EP/BP/JP/IP после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Коэффициент восстановления для роста бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина принят равным 100 %.

Ростовые свойства: при заданной температуре рост микроорганизмов сопоставим с ростом, ранее полученным на проверенной и утверждённой партии среды. Посевная доза — ≤100 КОЕ; инкубация проводится не дольше минимального установленного времени: при 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Индикаторные свойства: внешний вид колоний и характер индикаторной реакции сопоставимы с результатами, ранее полученными на проверенной и утверждённой партии среды. Посевная доза — ≤100 КОЕ; инкубация проводится при 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Ингибирующие свойства: при заданной температуре рост тест-микроорганизма отсутствует в течение периода не короче максимального установленного времени. Посевная доза — ≥100 КОЕ; инкубация проводится при 30–35 °C в течение ≥72 ч.

Культуральные характеристики