Готовая питательная среда в чашке с агаром HiCombi™ маннит Salt - маннит Salt агар в чашке HiMedia HB011-20PT (20 чашек) — селективная среда с 7,5 % NaCl. Среда предназначена для выделения и пересева Staphylococcus aureus, в том числе при микробиологических испытаниях фармацевтических образцов; некоторые штаммы могут ферментировать маннит медленно.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и пересева Staphylococcus aureus. Применяется при микробиологических испытаниях фармацевтических образцов, включая испытания на микробиологическую чистоту. Формуляция соответствует согласованному методу фармакопей USP/EP/BP/JP/IP.

Состав

Состав, г/л:

Пептический перевар животных тканей

Панкреатический перевар казеина

Эквивалент мясного экстракта

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик.

Принцип действия

Стафилококки широко распространены в природе и встречаются преимущественно на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus является условно-патогенным микроорганизмом человека. Способность свертывать плазму служит широко используемым критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями.

Стафилококки способны расти на средах с высокой концентрацией соли. Хлорид натрия в концентрации 7,5 % подавляет рост многих бактерий, кроме стафилококков. Пептон HM B, триптон и пептон обеспечивают среду источниками углерода и азотистых соединений, длинноцепочечными аминокислотами, витаминами, другими факторами роста и микроэлементами.

Маннит служит ферментируемым углеводом. Его ферментация сопровождается образованием кислоты, которую выявляет индикатор феноловый красный. S. aureus, ферментирующий маннит, образует жёлтые колонии, обычно окружённые жёлтыми зонами. Коагулазоотрицательные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннит и образуют розовые или красные колонии, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Липолитическую активность S. aureus выявляют после добавления эмульсии яичного желтка FD045: вокруг колоний образуются жёлтые непрозрачные зоны.

Методика работы

1. Асептически нанесите на поверхность чашки исследуемый инокулят в количестве 50–100 КОЕ.
2. После инкубации оцените рост и цвет колоний, а также окраску окружающих зон.
3. Предполагаемые коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus подтвердите коагулазным тестом в пробирке или на предметном стекле.
4. Пересевайте предполагаемый S. aureus на менее ингибирующую среду без избытка соли, например на питательный бульон M002. Избыток соли может мешать коагулазному тесту и другим диагностическим исследованиям.
5. Если результат отрицательный, повторно инкубируйте чашку ещё 24 ч перед тем, как считать результат окончательным: некоторые штаммы S. aureus ферментируют маннит с задержкой.

Тип образца и обращение с ним

Тип образца: фармацевтические образцы.

Сбор и обработку проб проводите подходящими методами в соответствии с применимыми руководствами. После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Контроль качества

Внешний вид: стерильная чашка с агаром маннит Salt — маннит Salt, в одноразовой двухсекционной чашке диаметром 90 мм.

Цвет и прозрачность готовой среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашке Петри.

pH: 7,20–7,60.

Объём среды: 10 мл в каждой секции.

Тест на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Тест на ростовые свойства проводили по согласованному методу USP/EP/BP/JP/IP после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Уровень восстановления бактерий при росте на соево-казеиновом агаре принимали за 100 %.

Ростовые свойства: рост микроорганизмов должен быть сопоставим с ростом, полученным на ранее испытанной и одобренной партии среды, при указанной температуре и не позднее минимального установленного времени. Посевная доза — ≤100 КОЕ; условия испытания — 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Индикаторные свойства: внешний вид колоний и характер индикаторной реакции должны быть сопоставимы с результатами, полученными на ранее испытанной и одобренной партии среды. Посевная доза — ≤100 КОЕ; условия испытания — 30–35 °C в течение 18–72 ч.

Ингибирующие свойства: рост тест-микроорганизма не должен наблюдаться при указанной температуре в течение не менее максимального установленного времени. Посевная д