HiCombi™ кровь -маннит Salt агар в чашке HiMedia HB009-50PT (50 чашек)

Готовая двухсекционная чашка с агаром HiCombi™ «кровяной агар — маннитоловый солевой агар» HiMedia HB009-50PT (50 чашек) содержит по 10 мл каждой среды. Предназначена для выделения Neisseria и других требовательных микроорганизмов, а также потенциально патогенных грамположительных бактерий, особенно стафилококков; маннитоловый солевой агар селективен для стафилококков.

Область применения

Среда рекомендована для выделения Neisseria и других требовательных микроорганизмов, а также потенциально патогенных грамположительных бактерий, особенно патогенных стафилококков. Маннитоловый солевой агар применяют для выделения коагулазоположительных стафилококков из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов (5, 9, 12, 13, 15).

Типы образцов: клинические пробы, включая гной и мочу; пищевые продукты и молочные образцы.

Состав

Кровяной агар

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных характеристик среды. Пептон HM B эквивалентен пептону из говяжьего сердца.

Маннитоловый солевой агар

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных характеристик среды. Пептон HM B эквивалентен говяжьему экстракту.

Принцип действия

Кровяной агар

Кровяной агар — высокопитательная среда, используемая как основа для приготовления кровяного агара с добавлением крови. Также может применяться как среда общего назначения без добавления крови. Добавление фосфата фенолфталеина позволяет выявлять стафилококки, продуцирующие фосфатазу (1); добавление соли и агара используют для оценки поверхностного загрязнения оборудования и туш свиней (2), а также для определения диапазона солёности, в котором растут морские Flavobacteria (3). Среда может применяться для приготовления антигенов Salmonella Typhi (4). Кровяной агар рекомендован Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) и изданием «Стандартные методы» для исследования пищевых образцов (5–7).

Пептон HM B и триптоза обеспечивают микроорганизмы источниками углерода и азота, аминокислотами и витаминами. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Добавление крови повышает её питательность за счёт факторов роста, необходимых требовательным микроорганизмам, и позволяет визуально оценивать гемолиз. Характер гемолиза зависит от вида крови. Овечья кровь обеспечивает наилучшие результаты при исследовании стрептококков группы A (8), однако не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus из-за недостатка пиридиновых нуклеотидов. На среде с лошадиной кровью колонии H. haemolyticus способны проявлять гемолиз и имитировать Streptococcus pyogenes (9).

Маннитоловый солевой агар

Стафилококки широко распространены в природе, преимущественно обитают на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительный вид Staphylococcus aureus — известный оппортунистический патоген человека. Способность свёртывать плазму остаётся наиболее широко используемым и признанным критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями (9). Стафилококки способны расти на средах с высокой концентрацией соли (10). Выделение коагулазоположительных стафилококков на маннитоловом агаре с феноловым красным и 7,5 % NaCl изучал Чепмен (11).

Пептон HM B и протеозный пептон обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами. Хлорид натрия подавляет рост бактерий, отличных от стафилококков. Маннитол служит ферментируемым углеводом: его ферментация приводит к образованию кислоты, которую выявляет индикатор феноловый красный.

При ферментации маннитола S. aureus образует жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазонегативные штаммы S. aureus, как правило, не ферментируют маннитол и образуют розовые или красные колонии, окружённые красно-фиолетовыми зонами. Дополнительная эмульсия яичного желтка (FD045) позволяет выявлять липазную активность S. aureus: вокруг колоний появляются жёлтые непрозрачные зоны (16).

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтвердить коагулазным тестом в пробирке или на предметном стекле (9). Перед коагулазным и другими диагностическими тестами культуру следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, например на питательный бульон (M002), чтобы избежать возможного влияния соли (16, 20). Некоторые штаммы S. aureus могут ферментировать маннитол с задержкой; отрицательный результат следует перепроверить после дополнительной инкубации в течение 24 часов, прежде чем считать его окончательным (16, 17).

Методика работы

1. Асептически нанесите штриховым посевом исследуемый инокулят в количестве 50–100 КОЕ.

Контроль качества

Физические характеристики

• Внешний вид: стерильные кровяной и маннитоловый солевой агар в одноразовой двухсекционной чашке диаметром 90 мм; поверхность гладкая, без чёрных частиц, трещин и пузырьков.
• Цвет кровяного агара: красный.
• Цвет маннитолового солевого агара: красный.
• Объём среды: 10 мл каждой среды в двухсекционной чашке.
• pH кровяного агара: 7,10–7,50.
• pH маннитолового солевого агара: 7,20–7,60.
• Проверка стерильности: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

| Организм | Рост на маннитоловом солевом агаре | Цвет колоний на маннитоловом солевом агаре | Цвет колоний на кровяном агаре | Гемолиз | | --- | --- | ---