Агар HiCombi™ Cetrimide - МакКонки чашка HiMedia HB005-20PT (20 чашек)

Готовые чашки с агаром Агар HiCombi™ Cetrimide - МакКонки чашка HiMedia HB005-20PT (20 чашек) производства HiMedia содержат две селективно-дифференциальные среды в двухсекционной чашке диаметром 90 мм. Применяются для выделения Pseudomonas и дифференциации колиформных бактерий и других кишечных патогенов; для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические исследования.

Назначение и область применения

Чашки предназначены для селективного выделения Pseudomonas и дифференциации колиформных бактерий и других кишечных патогенов. В одной секции находится цетримидный агар для выделения Pseudomonas aeruginosa, в другой — агар МакКонки для выделения и дифференциации грамотрицательных бактерий.

Типы образцов: клинические образцы (моча, кал, материал из ран), пищевые и молочные продукты, вода, фармацевтические образцы.

Агар МакКонки применяют для выделения энтеробактерий и родственных кишечных грамотрицательных палочек. Среда также используется при проведении испытаний на микробиологическую чистоту, при исследовании клинических, пищевых, молочных, водных, фармацевтических и промышленных образцов. Среда M081, соответствующая рекомендациям APHA, может применяться для прямого посева проб воды на колиформные бактерии, исследования пищевых продуктов на возбудителей пищевых отравлений и выделения Salmonella и Shigella из сыра. Также среду используют для подсчёта бактерий группы коли-аэрогенов в фекалиях крупного рогатого скота и овец, коли-аэрогенов и нелактозоферментирующих бактерий в тушках птицы, подсчёта бактерий в облучённом консервированном рубленом мясе курицы и выявления бактерий группы коли-аэрогенов при исследовании рода Aeromonas.

Цетримидный агар применяют для исследования косметических и клинических образцов на наличие P. aeruginosa, а также для оценки эффективности дезинфицирующих средств против этого микроорганизма.

Состав

Цетримидная агаровая основа

Состав на 1 л:

Агар МакКонки

Состав на 1 л:

Формулы сред скорректированы и стандартизированы с учётом параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Цетримидная агаровая основа

Pseudomonas aeruginosa растёт на обычных лабораторных средах, однако для селективного выделения из объектов окружающей среды, а также из образцов человека, животных и растений используют среду с селективным агентом и компонентами, усиливающими образование пигмента. Цетримид подавляет рост многих микроорганизмов, позволяя P. aeruginosa формировать типичные колонии. Селективное действие основано на устойчивости целевого микроорганизма к антибактериальным агентам.

Цетримид — четвертичная аммониевая соль, катионное поверхностно-активное вещество. В месте контакта он снижает поверхностное натяжение и оказывает осаждающее, комплексообразующее и денатурирующее действие на белки бактериальных мембран. Цетримид подавляет широкий спектр микроорганизмов, включая виды Pseudomonas, отличные от P. aeruginosa.

Среда A, разработанная King и соавторами, усиливает образование пиоцианина бактериями рода Pseudomonas. Цетримидный агар, разработанный Lowbury, представляет собой модификацию агара Tech (среда A) с добавлением 0,1 % цетримидa для селективного выделения P. aeruginosa. После появления высокоочищенного цетримидa его концентрацию в среде снизили. Рекомендуемый режим инкубации в описании метода: 37 °C в течение 18–24 ч.

P. aeruginosa может быть идентифицирована по образованию пиоцианина — синего, водорастворимого, нефлуоресцирующего феназинового пигмента, а также по морфологии колоний и характерному запаху аминоацетофенона, напоминающему запах винограда. P. aeruginosa — единственный известный вид рода Pseudomonas и единственная известная грамотрицательная палочковидная бактерия, выделяющая пиоцианин.

Колонии P. aeruginosa могут быть синими, сине-зелёными или непигментированными. Колонии с флуоресценцией при 250 нм и сине-зелёной пигментацией рассматривают как предположительно положительные. Если культуры недолго выдержать при комнатной температуре, флуоресценция под ультрафиолетовым излучением может исчезнуть; после повторной инкубации чашек она появляется вновь. На образование пигмента также может влиять тип пептона в основе среды. Некоторые штаммы P. aeruginosa не образуют пиоцианин. Другие виды Pseudomonas не образуют пиоцианин, но флуоресцируют под ультрафиолетовым излучением.

На цетримидном агаре подавляется рост большинства микроорганизмов, не относящихся к роду Pseudomonas, однако некоторые виды Pseudomonas также могут подавляться. Некоторые неферментирующие бактерии и аэробные спорообразующие бактерии могут образовывать водорастворимую пигментацию от светло-коричневой до коричневой; Serratia может образовывать розовую пигментацию. Для подтверждения результатов проводят биохимические и серологические исследования.

Желатиновый пептон обеспечивает P. aeruginosa необходимыми питательными веществами. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Хлорид магния и сульфат калия стимулируют образование пиоцианина.

Агар МакКонки

Агар МакКонки — умеренно селективная и дифференциальная среда для выделения грамотрицательных микроорганизмов. Селективное действие обеспечивают желчные соли и кристаллический фиолетовый, подавляющие большинство грамположительных бактерий. Концентрация желчных солей ниже, чем в других средах для выделения кишечных бактерий.

Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу. Лактозоферментирующие штаммы образуют красные или розовые колонии, которые могут быть окружены зоной осаждённых кислотой желчных солей. Красная окраска возникает вследствие образования кислоты при ферментации лактозы, поглощения нейтрального красного и изменения окраски индикатора при снижении pH среды ниже 6,8. Нелактозоферментирующие штаммы, например Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды.

Пептон, триптон и желатиновый пептон служат источниками азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и других питательных веществ. Лактоза является ферментируемым углеводом, хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, желчные соли и кристаллический фиолетовый подавляют рост грамположительных микроорганизмов, а нейтральный красный служит индикатором pH.

Методика применения

1. Для выделения P. aeruginosa чашки с цетримидным агаром рекомендуется инокулировать материалом из неселективной среды, например бульона «сердце-мозг» (M210) или среды для переваривания казеина соевого происхождения (M011).
2. При высокой концентрации микроорганизмов тестовый образец можно непосредственно инокулировать на цетримидный агар.
3. В асептических условиях штриховым методом нанесите посевной материал в количестве 50–100 КОЕ.
4. Для агара МакКонки поверхность среды перед инокуляцией должна быть сухой.
5. Для подтверждения результатов проведите дополнительные биохимические исследования; для агара МакКонки также предусмотрены серологические исследования.

Типы образцов и обращение с ними

Для пищевых и молочных образцов соблюдайте соответствующие методики отбора и обработки проб. Для проб воды применяйте предусмотренные руководствами и местными стандартами методы отбора и обработки. Фармацевтические образцы отбирайте и обрабатывайте согласно соответствующим руководствам. Клинические образцы обрабатывайте по установленным методикам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Ограничения применения

Цетримидная агаровая основа

• Из-за высокой токсичности цетримидa среда может обеспечивать слабый рост некоторых штаммов.
• Для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические исследования.

Агар МакКонки

• Несмотря на рекомендацию среды для селективного выделения, для подтверждения результатов необходимы дополнительные биохимические и серологические исследования.
• Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Контроль качества

Внешний вид: стерильные цетримидный агар и агар МакКонки в одноразовой двухсекционной