Микробиологическая питательная среда Глюкозо-желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным HiMedia GMH581-500G (500 г) в гранулированной форме предназначена для селективного культивирования микроорганизмов. Среда применяется для выявления и количественного определения представителей семейства Enterobacteriaceae в фармацевтических образцах, включая контроль микробиологических пределов нестерильных лекарственных препаратов.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и количественного определения Enterobacteriaceae, особенно грамотрицательных бактерий, устойчивых к желчным солям, в фармацевтических продуктах и препаратах в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Назначение изделия: агар.

Форма выпуска: гранулированная.

Фасовка: 500 г.

Соответствие: ФСЗ 2009/03709; ГОСТ Р 54354-2011.

Состав

Расчётная формула среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Панкреатический перевар желатина

Принцип действия и интерпретация результатов

Глюкозо-желчный агар с кристаллвиолетом и нейтральным красным является селективной средой для выявления и количественного определения Enterobacteriaceae при испытаниях на наличие определённых микроорганизмов в нестерильных продуктах и фармацевтических препаратах по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

• Пептон из желатина и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими питательными веществами, необходимыми для бактериального метаболизма.
• Селективность среды обусловлена присутствием ингибиторов — желчных солей и кристаллвиолета.
• Желчные соли ингибируют преимущественно грамположительные микроорганизмы, особенно Staphylococci.
• Кристаллвиолет ингибирует грамотрицательные организмы.
• Нейтральный красный служит индикатором ферментации глюкозы.
• Микроорганизмы, ферментирующие глюкозу, образуют красные колонии с розово-красными ореолами в присутствии нейтрального красного.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды.
• Красная окраска обусловлена поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 40,62 г сухой обезвоженной среды — эквивалентное количество на 1 л — в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не нагревать в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Требования к образцам и обращение с ними

При работе с фармацевтическими образцами применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Несмотря на селективное назначение среды для выделения Enterobacteriaceae, для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.
• Передержка при инкубации может привести к изменению исходной реакции.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Среда представляет собой гранулированный продукт светло-жёлтого или розовато-бежевого цвета.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета.

pH

pH приготовленной среды: 7,20–7,60.

Тест на ростовые свойства

Тест на стимуляцию роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Степень восстановления принимают равной 100 % от роста бактерий на соево-казеиновой агаровой среде.

Ростовые свойства

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при заданной температуре не более чем за минимальный установленный период времени при посевной дозе ≤100 КОЕ:

• температура инкубации: 30–35 °C;
• продолжительность инкубации: ≤18 ч;
• посевная доза: ≤100 КОЕ.

Индикаторные свойства

Колонии должны быть сопоставимы по внешнему виду и характеру индикаторной реакции с колониями, ранее полученными на предварительно испытанной и одобренной партии среды. Оценку проводят при заданной температуре в течение периода времени, находящегося в установленном диапазоне, при посевной дозе ≤100 КОЕ:

• температура инкубации: 30–35 °C;
• продолжительность инкубации: 18–24 ч;
• посевная доза: ≤100 КОЕ.

Культуральная реакция

Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–24 ч.

Дополнительное микробиологическое исследование

Обозначения:

• * — соответствующие номера WDCM.
• # — ранее обозначался как *