Питательная микробиологическая среда HiMedia GMH144-500G Колумбийский агар производства HiMedia в гранулированной форме, фасовка 500 г. Среда предназначена для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических образцах методом микробиологического контроля при анаэробной инкубации 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Назначение

Колумбийский агар рекомендован для выявления Clostridium sporogenes в фармацевтических препаратах в соответствии с гармонизированной методикой испытаний на микробиологические пределы USP/EP/BP/JP/IP, среда 15.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Среда также применяется для контроля наличия Clostridium в нестерильных продуктах, включая пищевые продукты, диетические и питательные добавки, а также связанные с ними препараты.

Состав

Состав, г/л:

При необходимости отрегулировать pH так, чтобы после стерилизации его значение составляло 7,3 ± 0,2.

pH также можно измерять после стерилизации при 25 °C.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Панкреатический перевар казеина

Пептический перевар мяса

Панкреатический перевар сердца

Приготовление среды

1. Суспендируйте 44,0 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки FD252.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Колумбийская кровяная агаровая основа была разработана Ellner и соавторами в Колумбийском университете как универсальная питательная среда, впоследствии обогащённая добавлением овечьей крови. Среда также может использоваться для выделения микроорганизмов при добавлении различных добавок.

Колумбийский агар приготовлен в соответствии с гармонизированной методикой испытаний на микробиологические пределы USP/EP/BP/JP/IP. Среда рекомендована для выявления Clostridium в нестерильных продуктах, включая пищевые продукты, диетические и питательные добавки и связанные с ними препараты.

Род Clostridium относится к семейству Clostridiaceae и классу Clostridia.

Исследуемый продукт первоначально обогащают в усиленной среде для клостридий. Эта среда содержит 0,05 % агара и цистеин, создающие анаэробные условия и обеспечивающие рост анаэробных микроорганизмов. После обогащения пробу пересеивают на колумбийский агар.

Колумбийский агар используют как основу для сред с кровью и селективных сред, в состав которых в качестве добавок входят различные комбинации противомикробных веществ.

Питательные свойства среды обусловлены следующими компонентами:

• триптон, экстракт HM и гидролизат HM обеспечивают питательные вещества;
• дрожжевой экстракт является источником углеродистых и азотистых соединений, длинноцепочечных аминокислот, витаминов группы B и других необходимых питательных веществ для обильного роста требовательных и нетребовательных микроорганизмов;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды;
• кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты, если они образуются.

Среда применяется для выявления Clostridia в фармацевтических образцах. Селективная добавка FD252 подавляет ряд контаминирующих грамотрицательных микроорганизмов и виды Staphylococcus.

Clostridia растут в анаэробных условиях в виде грамположительных палочек и дают отрицательную реакцию на каталазу. Для полной идентификации проводят дополнительные идентификационные тесты.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности для получения указаний по безопасной работе.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать на среде разные варианты роста.
2. Каждая серия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. При необходимости применения среды для микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом конкретных требований.
3. Для полной идентификации необходимо выполнять дополнительные биохимические тесты.

Оценка эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид: гранулированная среда кремового или жёлтого цвета.

Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

pH: 7,10–7,50.

Тест на стимуляцию роста

Стимуляцию роста выполняли в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP. Рост оценивали в анаэробных условиях после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Степень восстановления считают равной 100 % для роста бактерий на агаре с переваром казеина и сои, также называемом соево-казеиновым агаром.

Ростовые свойства

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным на проверенной и утверждённой серии среды, должен наблюдаться при указанной температуре не более чем за минимальный период времени, установленный методикой, при внесении посевной дозы ≤100 КОЕ в анаэробных условиях: 30–35 °C, ≤48 ч.

Культуральные характеристики

Рост оценивали после анаэробной инкубации при 30–35 °C в течение ≤48 ч.

Обозначения:

• *: соответствующие номера WDCM;
• **: ранее обозначался как Bacteroides vulgatus.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Контейнер должен быть плотно закрыт.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Для обеспечения заявленных характеристик рекомендуется использовать продукт в пределах установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов продукта автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики