Гранулированная питательная среда Агар Макконки. гранулированный HiMedia GMH081-500G (500 г) предназначена для селективного выделения и дифференциации E. coli и других кишечных бактерий. Среда применяется при микробиологическом контроле фармацевтических, пищевых, молочных и водных образцов; для приготовления требуется 49,53 г сухой среды на 1 л воды.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и дифференциации Escherichia coli и других кишечных бактерий из фармацевтических препаратов в рамках испытаний на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Тип продукта: гранулированная питательная среда
Назначение изделия: агар
Масса: 500 г
Физическая форма: гранулы
Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
Происхождение компонентов: животное

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Желатиновый пептон эквивалентен панкреатическому перевару желатина.

Пептон HMC

Пептон HMC эквивалентен пептонам из мяса и казеина.

Приготовление среды

1. При постоянном перемешивании суспендируйте 49,53 г сухой среды, соответствующие массе обезвоженной среды на 1 л, в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения в течение 1 мин при постоянном перемешивании.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.
7. Перед посевом поверхность приготовленной среды должна быть сухой.

Принцип действия и интерпретация

Агар Макконки — селективная и дифференциальная среда для культивирования колиформных микроорганизмов. Агар Макконки и бульон Макконки также применяются при микробиологическом исследовании пищевых продуктов и для прямого посева или инокуляции проб воды при подсчёте колиформных бактерий. Среда принята стандартными методами исследования молока и молочных продуктов, а также рекомендована для фармацевтических препаратов в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP.

Желатиновый пептон и пептон HMC обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами, витаминами и азотистыми факторами. Лактозы моногидрат служит ферментируемым источником углеводов. Селективное действие среды обусловлено кристаллическим фиолетовым и желчными солями, которые ингибируют большинство видов грамположительных бактерий. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

После обогащения Escherichia coli в бульоне Макконки MH083 культуру пересеивают на агар Макконки. Грамотрицательные бактерии обычно хорошо растут на этой среде и дифференцируются по способности ферментировать лактозу. Штаммы, ферментирующие лактозу, формируют красные или розовые колонии, которые могут быть окружены зоной осаждённой кислотой желчи. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из лактозы, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски индикатора при снижении pH среды ниже 6,8.

Штаммы, не ферментирующие лактозу, включая Shigella и Salmonella, образуют бесцветные прозрачные колонии и обычно не изменяют внешний вид среды. Yersinia enterocolitica после инкубации при комнатной температуре может образовывать мелкие колонии, не ферментирующие лактозу.

Типы образцов

• Фармацевтические образцы.
• Пищевые и молочные образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам USP/EP/BP/JP.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам исследования пищевых продуктов, молока и молочных продуктов.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным методикам исследования воды.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать на среде неодинаковые характеристики роста.
2. Каждая партия среды проверена на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.
3. Несмотря на предназначенность среды для селективного выделения, для окончательного подтверждения необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.
4. Перед инокуляцией поверхность среды должна быть сухой.

Эффективность и оценка

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтая или розовая гранулированная среда.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета с фиолетовым оттенком.

pH

Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Ростовые свойства проверяют в соответствии с гармонизированной методикой ICH (USP/EP/BP/JP). Культуральные характеристики оценивали после инкубации при 30–35 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления принимают за 100 % для роста бактерий на агаре с переваром соевого боба и казеина.

Ростовые свойства

Рост микроорганизмов должен быть сопоставим с ростом, ранее полученным на проверенной и одобренной партии среды, при указанной температуре в течение периода, не превышающего минимальное установленное время, после инокуляции 100 КОЕ: 30–35 °C, не более 18 ч.

Индикаторные свойства

Внешний вид колоний и индикаторная реакция должны быть сопоставимы с характеристиками, ранее полученными на проверенной и одобренной партии среды, при указанной температуре в течение периода, соответствующего установленному диапазону, после инокуляции не более 100 КОЕ: 30–35 °C, 18–72 ч.