Гранулированная питательная среда HiMedia GMH063-100G Агар Сабуро с декстрозой предназначена для культивирования дрожжей, плесневых грибов и ацидурных бактерий; содержание декстрозы составляет 40,000 г/л. Среда применяется для микробиологического контроля фармацевтических препаратов, а низкое значение pH ограничивает рост бактерий.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для культивирования дрожжей, плесневых грибов и ацидурных бактерий из фармацевтических препаратов при испытаниях на микробиологические пределы по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Среда также применяется при испытаниях на микробиологические пределы в фармацевтической, пищевой и косметической промышленности.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности.

Методика приготовления

1. Взвесьте 65,0 г среды и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Грибы относятся к первым распознанным микроорганизмам, поскольку некоторые плодовые структуры, например шляпочные грибы, достаточно крупные и видны без микроскопа. По морфологии грибы условно подразделяют на дрожжи и плесневые грибы.

Грибковые заболевания кожи, волос и слизистых оболочек называют поверхностными микозами, а вызывающие их микроорганизмы — дерматофитами. Для выделения грибов применяют питательную среду, которая способствует их росту, но не является оптимальной для роста бактерий.

Агар Сабуро с декстрозой представляет собой модификацию Карлье рецептуры, описанной Сабуро, для культивирования грибов — дрожжей и плесневых грибов — и ацидурных микроорганизмов. Среда рекомендована для микробиологического исследования нестерильных продуктов по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP.

Пептон и триптон обеспечивают поступление углеродистых и азотистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ. Декстроза (глюкоза) служит источником энергии. Высокая концентрация декстрозы и низкое значение pH способствуют росту грибов и подавляют рост бактериальных загрязнителей в клинических образцах.

Некоторые патогенные грибы могут образовывать инфекционные споры, легко распространяющиеся по воздуху, поэтому исследование следует проводить в защитном боксе. Для сильно загрязнённых образцов в среду необходимо добавлять ингибирующие агенты, подавляющие рост бактерий.

Рост белых колоний может указывать на присутствие Candida albicans. Общее количество дрожжей и плесневых грибов принимают равным числу колониеобразующих единиц, выявленных на этой среде. При обнаружении бактериальных колоний их также учитывают в составе общего количества дрожжей и плесневых грибов. Если количество бактериальных колоний превышает критерий приемлемости, в среду можно добавлять антибиотики.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с фармацевтическими руководствами USP/EP/BP/JP.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при работе с образцами и культурами, а также стандартные требования безопасности при обращении с образцами. Дополнительные сведения по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для сильно загрязнённых образцов среду необходимо дополнять ингибирующими агентами, подавляющими рост бактерий, при более низком значении pH.
2. Некоторые патогенные грибы могут образовывать инфекционные споры, легко распространяющиеся по воздуху, поэтому исследование следует проводить в защитном боксе.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: GMH063-100G
• Назначение изделия: агар
• Физическая форма: гранулированная
• Тип продукта: гранулированный
• Происхождение: животное
• Тип упаковки: ПЭНД (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 100 г
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Температура эксплуатации по данным каталога: 10–30 °C
• pH приготовленной среды: 5,40–5,80
• Внешний вид: гранулированная среда кремового или жёлтого цвета
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель от светло-жёлтого до жёлтого цвета

Контроль качества

Внешний вид

Гранулированная среда имеет кремовый или жёлтый цвет.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого или жёлтого цвета.

Водородный показатель

pH: 5,40–5,80.

Испытание на ростовые свойства

Испытание на стимуляцию роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой Международного совета по гармонизации (ICH), применяемой в USP/EP/BP/JP, после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Степень восстановления принимают равной 100 % для роста бактерий на соево-казеиновом агаре и для роста грибов на агаре Сабуро с декстрозой.

Ростостимулирующие свойства

Рост микроорганизмов, сопоставимый с ростом, ранее полученным на испытанной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при установленной температуре не более чем за минимальный период времени, указанный для метода, при посевной дозе ≤100 КОЕ: при 30–35 °C в течение ≤24 ч.

Индикаторные свойства

Внешний вид колоний и индикаторная реакция должны быть сопоставимы с результатами, ранее полученными на испытанной и одобренной партии среды, при установленной температуре в течение периода времени, указанного в диапазоне метода, при посевной дозе ≤100 КОЕ: при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

Стимуляция роста и индикаторные свойства

Стимуляция роста и общее количество дрожжей и плесневых грибов

| Организм | Посевная доза (КОЕ) | Рост | Значение для исследованной партии (КО