HiMedia GM971-500G Основа агара с бриллиантовым зеленым с фосфатами

Гранулированная питательная основа агара HiMedia GM971-500G «Основа агара с бриллиантовым зеленым с фосфатами» предназначена для селективного выделения Salmonella и имеет рабочий pH 6,9 ± 0,2. Применяется для анализа клинических, пищевых, молочных и водных образцов, при этом подавляет рост Escherichia coli, Proteus и Pseudomonas, но не исключает рост других представителей семейства Enterobacteriaceae.

Назначение и область применения

Основа агара с бриллиантовым зеленым и фосфатами рекомендована для селективного выделения видов Salmonella с ингибированием Escherichia coli, Proteus и Pseudomonas.

Типы исследуемых образцов:

• клинические образцы: фекалии;
• пищевые и молочные образцы;
• образцы воды.

Среда предназначена для применения in vitro и только квалифицированным персоналом.

Состав

Состав, г/л:

# Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Виды Salmonella вызывают различные инфекции — от лёгкого самоограничивающегося гастроэнтерита до угрожающей жизни брюшнотифозной лихорадки. Наиболее распространённая форма заболевания, вызываемого Salmonella, — самоограничивающийся гастроэнтерит с лихорадкой продолжительностью менее 2 суток и диареей продолжительностью менее 7 суток.

Основа агара с бриллиантовым зелёным и фосфатами разработана в соответствии с рекомендациями Государственного института общественного здравоохранения в Утрехте. Среда также рекомендована комитетом ISO для выделения небольших количеств видов Salmonella, ингибирования Escherichia coli, видов Proteus и видов Pseudomonas.

Функции компонентов среды:

• пептон, пептон HM B и дрожжевой экстракт служат источниками углерода, азота, витаминов, аминокислот и других необходимых питательных веществ;
• лактоза и сахароза служат источниками энергии;
• ферментация лактозы и/или сахарозы приводит к образованию кислой реакции среды, которая выявляется индикатором феноловым красным;
• фосфаты M971 обеспечивают буферирование среды;
• бриллиантовый зелёный подавляет сопутствующую микрофлору.

Для ингибирования контаминирующих микроорганизмов при предполагаемом высоком содержании конкурирующей микрофлоры вместе с видами Salmonella среду можно дополнительно дополнять сульфацетамидом в концентрации 1 г/л и манделатом натрия в концентрации 0,25 г/л.

Из-за высокой селективности среду рекомендуется использовать совместно с менее ингибирующей средой для повышения вероятности выделения целевых микроорганизмов. Обогащение культур часто проводят в селенит-цистиновом бульоне M025 или тетратионатном бульоне M032. После обогащения культуры одновременно высевают на следующие среды:

• основу агара с бриллиантовым зелёным M016/M971;
• агар SS M108;
• висмут-сульфитный агар M027;
• агар МакКонки M081.

Методика основана на рекомендациях Государственного института общественного здравоохранения в Утрехте и методах ISO 3565, ISO 6579 и ISO 6785 для соответствующих пищевых, мясных, молочных и микробиологических исследований.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 25,84 г препарата в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте при периодическом перемешивании и доведите суспензию почти до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Не автоклавируйте приготовленную основу.
4. Для повышения селективности и максимального восстановления асептически добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки S Selective Supplement (FD068).
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Ограничения применения

1. Несмотря на селективность среды в отношении Salmonella, на ней могут расти другие представители семейства Enterobacteriaceae.
2. Предположительно выделенные изоляты Salmonella необходимо дополнительно подтверждать.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

• Внешний вид: однородная гранулированная среда от светло-жёлтого до розового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-коричневого цвета.
• Реакция: реакция 5,2%-ного водного раствора по массе/объёму при 25 °C.
• pH: 6,9 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
Ранее Proteus hauseri был известен как Proteus vulgaris.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения препарата: 10–30 °C.
• Условия хранения препарата: плотно закрытая ёмкость.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить препарат в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Требования к месту хранения: сухое вентилируемое помещение, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования ёмкость необходимо плотно закрывать.

Препарат обладает гигроскопичными свойствами. Неправильное хранение или недостаточно плотное закрытие флакона может привести к образованию комков. Рабочие характеристики препарата сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Препарат предназначен для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный контекст

В отличие от менее селективных питательных сред, основа агара с бриллиантовым зелёным и фосфатами предназначена для одновременного выделения Salmonella и подавления Escherichia coli, Proteus и Pseudomonas; для повышения вероятности восстановления целевых микроорганизмов её применяют вместе с менее ингибирующей средой.