Агар R2A, гранулированный; R-2A Agar, granulated HiMedia GM962-500G (500 г)

Гранулированная питательная среда Агар R2A, гранулированный; R-2A Agar, granulated HiMedia GM962-500G (500 г) предназначена для подсчёта гетеротрофных микроорганизмов в пробах воды при увеличенном времени инкубации. Питательная среда применяется для выделения стрессированных и повреждённых микроорганизмов в образцах воды, включая контроль изменений при водоподготовке, в распределительных системах и плавательных бассейнах.

Назначение

Питательная среда предназначена для подсчёта гетеротрофных микроорганизмов в пробах воды с использованием более длительных периодов инкубации. Тип образца: пробы воды.

Среда R-2A применяется для восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов, которые могут не расти на средах с высоким содержанием питательных веществ. Рекомендуемые методы посева:

• метод заливки;
• поверхностный посев;
• мембранная фильтрация.

Состав

Норма расхода компонентов указана в граммах на 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Эквивалентна кислотному гидролизату казеина.

Принцип действия и интерпретация результатов

Подсчёт гетеротрофных микроорганизмов, ранее называвшийся стандартным чашечным методом, представляет собой процедуру оценки количества живых гетеротрофных бактерий в воде и определения изменений их количества в процессе водоподготовки, в распределительных системах или плавательных бассейнах.

Среда R-2A рекомендована APHA для определения общего количества гетеротрофных микроорганизмов методами заливки, поверхностного посева или мембранной фильтрации. Состав среды разработан в соответствии с формулой Reasoner и Geldreich.

Микроорганизмы, подвергшиеся стрессу или повреждению в процессе водоподготовки, могут не расти на средах с высоким содержанием питательных веществ, поскольку быстрорастущие организмы подавляют их рост. Использование среды с низким содержанием питательных компонентов и более длительной инкубацией позволяет таким стрессированным микроорганизмам восстанавливаться и формировать колонии.

Многие бактерии из природных вод с ограниченным содержанием питательных веществ лучше растут на средах с пониженным уровнем питательных компонентов при температуре окружающей среды. Оптимальный рост таких бактерий может наблюдаться при температурах ниже стандартной лабораторной температуры инкубации 35–37 °C.

Функции компонентов среды:

• Acicase, пептон протеозы и дрожжевой экстракт обеспечивают источник азота, углеродсодержащих соединений, витаминов, аминокислот и минеральных веществ;
• декстроза/глюкоза служит источником энергии;
• растворимый крахмал способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов, поглощая токсичные побочные продукты метаболизма;
• пируват натрия повышает восстановление стрессированных клеток;
• сульфат магния является источником двухвалентных катионов и сульфата;
• гидрофосфат дикалия используется для поддержания pH среды.

Количество колоний на чашке выражают в КОЕ (колониеобразующих единицах) на объём исследованной пробы.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 18,12 г сухой гранулированной среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление составляет 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Не перегревайте среду.

Требования к сбору и обращению с образцами

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и локальными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Для медленно растущих микроорганизмов требуется более длительная инкубация по сравнению с указанным стандартным временем.
• Среда предназначена для проб воды и восстановления стрессированных или повреждённых микроорганизмов.

Условия контроля качества

Внешний вид

Цвет гранулированной среды: от кремового до жёлтого.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция и pH

Реакция водного раствора с концентрацией 1,81 % (масса/объём) при 25 °C.

• Реакция: pH 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли с использованием стандартных культур ATCC после инкубации при 30–35 °C в течение 24–72 ч. Для проб воды, отобранных в полевых условиях, рекомендуется продолжить инкубацию максимум до 7 суток, чтобы подтвердить отсутствие микроорганизмов.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Хранение приготовленной среды: 20–30 °C.
• Ёмкость: плотно закрытая.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности среды.
• Ненадлежащее хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики среды оптимальны при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку