HiMedia GM929-500G Основа M17 агара

Гранулированная основа питательной среды HiMedia GM929-500G Основа M17 агара предназначена для культивирования молочнокислых стрептококков и имеет конечное значение pH 7,1 ± 0,2. Основа применяется для количественного определения молочнокислых бактериофагов методом бляшек, при этом поддержание pH выше 5,7 необходимо для предотвращения повреждения и снижения восстановления молочнокислых стрептококков.

Назначение и область применения

Основа M17 агара рекомендована для:

• культивирования молочнокислых стрептококков;
• количественного определения молочнокислых бактериофагов методом бляшек;
• изучения морфологии бляшек и лизогении;
• селективного количественного определения Streptococcus thermophilus в йогурте;
• культивирования и поддержания стартовых культур для производства сыра и йогурта;
• выявления мутантов стрептококков, не ферментирующих лактозу.

Тип образца: пищевые продукты и молочные образцы.

M17-агар основан на рецептуре, описанной Terzaghi и Sandine для культивирования и количественного определения молочнокислых стрептококков и их бактериофагов. Среда рекомендована Международной молочной федерацией для селективного количественного определения Streptococcus thermophilus из йогурта и Американской ассоциацией общественного здравоохранения для культивирования молочнокислых стрептококков.

Состав

Состав приведён для приготовления 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Молочнокислые стрептококки требовательны к питательным условиям и для оптимального роста нуждаются в сложных питательных средах. Пептон, соевый пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми факторами роста.

Лактоза является сбраживаемым углеводом, аскорбиновая кислота стимулирует рост молочнокислых стрептококков, сульфат магния обеспечивает микроорганизмы необходимыми ионами.

Динатрий β-глицерофосфат поддерживает значение pH выше 5,7. Поддержание pH имеет критическое значение: снижение pH приводит к повреждению молочнокислых стрептококков и уменьшению их восстановления. Глицерофосфат не образует осадка с кальцием, необходимым для определения молочнокислых бактериофагов методом бляшек. Динатрий-глицерофосфат подавляет рост Lactobacillus bulgaricus.

Наличие бактериофагов выявляют по появлению характерных бляшек на фоне бактериального роста.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,25 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19 г динатрий β-глицерофосфата.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на кв. дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте необходимым способом.

Сбор и обработка образцов

Для количественного определения стрептококков рекомендуется посев в толщу среды или уколом в расплавленный и охлаждённый до 50–55 °C агар с последующей инкубацией при 42 °C в течение 24 ч. При таких условиях все колонии могут принадлежать стрептококкам.

Более длительная инкубация или более низкая температура могут вызвать морфологические изменения колоний, затрудняющие их распознавание. Лактозоположительные колонии стрептококков становятся видимыми через 15 ч; через 5 суток их диаметр может достигать примерно 3–4 мм. Диаметр лактозоотрицательных колоний составляет 1 мм.

Наличие бактериофагов определяют по появлению характерных бляшек на поверхности бактериального роста.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид: гранулированный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 3,33 % при 25 °C; pH 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением динатрий β-глицерофосфата.

* Соответствующие номера WDCM.

Lactiplantibacillus plantarum ранее классифицировался как Lactobacillus plantarum.

Ограничения применения

Поддержание pH имеет критическое значение: снижение pH приводит к повреждению молочнокислых стрептококков и уменьшению их восстановления.

Условия хранения и срок годности

• Основу хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытой таре.
• Приготовленную среду хранить при температуре 20–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении,