HiMedia GM929-500G Основа M17 агара

Основа M17 агара HiMedia GM929-500G (производство HiMedia) предназначена для культивирования молочнокислых стрептококков и проведения анализа бляшек молочнокислых бактериофагов. Среда применяется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среды M17 разработаны на основе рецептуры Terzaghi и Sandine для культивирования и количественного определения молочнокислых стрептококков и их бактериофагов. Среда позволяет изучать морфологию бляшек и лизогению.

Основные компоненты и их функции:

• Пептон, соевый пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают комплекс углеродных и азотистых соединений, длинноцепочечные аминокислоты, витамины группы B и другие факторы роста.
• Лактоза служит ферментируемым углеводом.
• Аскорбиновая кислота стимулирует рост молочнокислых стрептококков.
• Сульфат магния обеспечивает необходимые ионы для микроорганизмов.
• Динатрий-β-глицерофосфат поддерживает pH выше 5,7, что критически важно, так как более низкие значения pH приводят к повреждению клеток и снижению выхода молочнокислых стрептококков. Также глицерофосфат подавляет рост Lactobacillus bulgaricus и не образует осадка с кальцием, что необходимо для анализа бактериофагов.

Среда M17 агар рекомендована Международной молочной федерацией (IDF) для селективного подсчета Streptococcus thermophilus в йогуртах, а также APHA для культивирования молочнокислых стрептококков.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 33,25 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавить 19 г динатрий-β-глицерофосфата.
3. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
4. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладить до 45–50 °C, тщательно перемешать и разлить по чашкам Петри.

Посев и инкубация

Для подсчета стрептококков рекомендуется использовать метод массового посева или метод «втыкания» (stabbing) с использованием агара, расплавленного и охлажденного до 50–55 °C.

• Инкубация: при 42 °C в течение 24 часов.
• Интерпретация результатов:
  • Лактозоположительные колонии стрептококков становятся видимыми через 15 часов; через 5 дней их диаметр достигает 3–4 мм.
  • Лактозоотрицательные колонии имеют диаметр около 1 мм.
  • Присутствие бактериофагов определяется по появлению характерных бляшек на фоне бактериального роста.

Примечание: более длительные периоды инкубации или более низкие температуры могут вызвать морфологические изменения колоний, что затруднит их распознавание.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: порошок от кремового до желтого цвета, гранулированный, свободно текучий.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0% агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция 3,33% (масса/объем) водного раствора при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Результаты после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов с добавлением динатрий-β-глицерофосфата.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения основы: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Поддержание уровня pH является критическим фактором: снижение pH приводит к повреждению клеток и снижению эффективности восстановления молочнокислых стрептококков.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: использованные среды подлежат автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.