HiMedia GM889-500G Основа селективного бульона для листерий

Питательная среда HiMedia GM889-500G Основа селективного бульона для листерий — гранулированная основа для приготовления селективного бульона. Применяется с селективной добавкой для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов, включая фекалии, и предназначена только для профессионального использования in vitro.

Назначение

Основа предназначена для приготовления селективного бульона с добавлением селективной добавки для селективного выделения и культивирования Listeria monocytogenes из клинических образцов.

Среда используется для обогащения при выделении небольшого количества Listeria monocytogenes из молока и молочных продуктов, других пищевых продуктов, а также объектов окружающей среды. Для клинических образцов указан тип образца: фекалии.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — короткая грамположительная неспорообразующая палочковидная бактерия, которая в более старых культурах приобретает кокковидную форму. Listeria размножается в широком диапазоне температур — от 3 до 45 °C; оптимальный диапазон температуры составляет 30–37 °C.

L. monocytogenes выделяли из многочисленных объектов окружающей среды, включая силос, почву, разлагающуюся растительность, сточные воды, влажную землю, солому и фекалии. Небольшое количество микроорганизмов часто выделяется из сырого молока, мяса, овощей, морепродуктов и объектов пищевого производства. Для выделения небольшого количества L. monocytogenes применяют процедуры обогащения.

Повреждённые клетки L. monocytogenes испытывают сублетальный стресс после воздействия высокой или низкой температуры либо кислой среды. Для восстановления таких клеток требуется ресусцитация в неселективной среде при температуре, способствующей устранению сублетальных повреждений.

Селективный бульон для листерий сформулирован в соответствии с методикой Lovett и соавторов для селективного обогащения видов Listeria из молока, молочных продуктов и других пищевых продуктов. Селективный бульон для листерий рекомендован комитетом ISO с небольшим изменением состава добавки FD063I.

Триптон, соевый пептон и дрожжевой экстракт обеспечивают среду соединениями углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью и витаминами, необходимыми для бактериального метаболизма. Декстроза служит источником энергии.

Селективность среды обеспечивается добавлением селективной добавки:

• циклогексимид подавляет рост сапрофитных грибов;
• налидиксовая кислота подавляет рост грамотрицательных микроорганизмов;
• акрифлавин подавляет грамположительные микроорганизмы.

Акрифлавин является производным акридина с бактериостатическими свойствами в отношении многих грамположительных бактерий и слабой фунгицидной активностью.

Методика приготовления и обогащения

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,0 г основы в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа).
4. Охладите среду до комнатной температуры.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки ANC Selective Supplement FD063 или двух флаконов селективной добавки ANC Selective Supplement FD0631 — в зависимости от выбранной схемы.
6. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные пробирки или колбы.

Обогащение образца

1. Добавьте 25 г или 25 мл образца в 225 мл среды в пакет для гомогенизации.
2. При необходимости гомогенизируйте материал.
3. Инкубируйте при 30 °C до 7 суток.
4. Выполните пересев обогащённого бульона на селективный агар для листерий M567 после 1, 2 и 7 суток инкубации.

Инкубация в течение 7 суток обеспечивает лучшее восстановление подвергшихся воздействию факторов окружающей среды клеток Listeria из молока и молочных продуктов.

Тип образца

Клинические образцы: фекалии.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия применения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального использования.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.
• Listeria monocytogenes — высокопатогенный микроорганизм; при работе с культурой необходимо принимать надлежащие меры предосторожности.

Ограничения метода

1. Для окончательной идентификации выделенных микроорганизмов необходимы дальнейшее селективное выделение и биохимические тесты.
2. Listeria monocytogenes является высокопатогенным микроорганизмом, поэтому при работе с ним необходимо соблюдать соответствующие меры предосторожности.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет среды: от кремового до жёлтого; физическая форма: гранулированная.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках образуется прозрачный раствор флуоресцентно-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция 3,6 % мас./об. водного раствора при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки ANC Selective Supplement FD063 или FD0631 и инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа
• Масса: 500 г
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,2
• pH 3,6 % мас./об. водного раствора: 7,10–7,50

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вслед