Основа агара для Clostridium perfringens (триптозо-сульфитный) HiMedia GM837-500G в гранулированной форме. Используется для предварительной идентификации и количественного подсчета Clostridium perfringens при добавлении селективных добавок и обогатителей.

Принцип измерения

Среда основана на рецептуре триптозо-сульфитного циклосерин-агара (TSC). Триптоза, соевый пептон, экстракт дрожжей и пептон HM B обеспечивают азотистые соединения, углерод, серу, витамины комплекса B и микроэлементы, необходимые для роста клостридий. Метабисульфит натрия и цитрат аммония-железа(III) служат индикаторами восстановления сульфита, что проявляется в виде черных колоний. Селективность достигается путем добавления D-циклосерина (FD014) или комбинации канамицина и полимиксина B (FD013), которые подавляют рост сопутствующей флоры и других факультативных анаэробов. Эмульсия желтка яйца служит источником лецитина, который используется C. perfringens.

Методика приготовления и использования

1. Растворить 23,5 г основы в 475 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Добавить 25 мл эмульсии желтка яйца (FD045) и содержимое 1 флакона восстановленной добавки S.F.P. (FD013) или добавки T.S.C. (FD014).
   • При необходимости флуоресцентного детектирования вместо FD013/FD014 следует добавить содержимое восстановленной селективной добавки CMF (FD243).
6. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Область применения

• Клинические образцы: кал, содержимое абсцессов.
• Пищевые продукты: анализ проб согласно установленным руководствам.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Эквивалент мясного экстракта

Контроль качества

• Внешний вид: однородная гранулированная среда от светло-желтого до коричневато-желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления эмульсии желтка (FD045): желтый непрозрачный гель.
• Реакция: pH 7,6 $\pm$ 0,2 для 4,7% (масс./об.) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Характеристики определены в анаэробных условиях с добавлением TSC (FD014), S.F.P. (FD013) или CMF (FD243) и эмульсии желтка (FD045) после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать флакон для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Меры предосторожности: только для профессионального использования (In Vitro диагностика). При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации.

Ограничения метода

1. Для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
2. Некоторые организмы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательном составе.