Гранулированная питательная среда «HiMedia GM837-500G Основа агара для Perfringens (триптозо-сульфитный)» с фасовкой 500 г предназначена для приготовления основы агара Perfringens. Применяется для предположительной идентификации и количественного определения Clostridium perfringens при добавлении селективной добавки и обогащающей эмульсии; использование допускается только в лабораториях специалистами для диагностики in vitro.

Назначение

Основа агара Perfringens с добавлением селективной добавки и обогащающей эмульсии используется для предположительной идентификации и количественного определения Clostridium perfringens.

Состав

Состав на 1 л среды:

Эквивалент экстракта говядины.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 23,5 г порошка в 475 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте 25 мл эмульсии яичного желтка FD045 и регидратированное содержимое одного флакона добавки S.F.P. FD013 или добавки T.S.C. FD014.
6. При необходимости флуорогенного обнаружения вместо FD013 или FD014 добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки CMF FD243.
7. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Триптозо-сульфитно-циклосериновый агар (TSC) первоначально разработан для количественного определения Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Среда TSC обеспечивает количественное выделение C. perfringens при подавлении роста других факультативных анаэробов.

Основа агара TSC с добавкой T.S.C. FD014 и основа агара S.F.P. с добавкой S.F.P. FD013 сопоставимы по эффективности при выделении C. perfringens. Основа агара Perfringens также рекомендована APHA. Селективность основы агара Perfringens обеспечивается добавлением D-циклосерина FD014 либо канамицина и полимиксина B FD013.

Триптоза, соевый пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают среду азотистыми соединениями, углеродом, серой, витаминами группы B и микроэлементами, необходимыми для роста клостридий. Метабисульфит натрия и цитрат аммонийного железа служат индикаторами восстановления сульфита: восстановление сопровождается образованием колоний чёрного цвета.

D-циклосерин FD014, канамицин и полимиксин B FD013 обеспечивают селективное выделение C. perfringens за счёт ингибирования сопутствующей микрофлоры. Эмульсия яичного желтка служит источником лецитина, используемого C. perfringens.

Образцы

• Клинические образцы: кал, содержимое абсцессов.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным руководствам. Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам APHA.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

1. Для окончательной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические исследования.
2. Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за вариабельности питательных потребностей.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородная гранулированная среда от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета.
• После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри образуется непрозрачный гель жёлтого цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,7 % (масс./об.) при 25 °C: pH 7,6 ± 0,2.

pH

7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробных условиях с добавлением добавки TSC FD014, добавки S.F.P. FD013 или селективной добавки CMF FD243 и эмульсии яичного желтка FD045 после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ранее известен как Clostridium sordellii.

Хранение и срок годности

• Хранение продукта: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности среды.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются наилучшим образом при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материал, контактировавший с клиническим образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в