HiMedia GM834A-500G Основа кровяного агара №2 с 1.2% агара

Основа кровяного агара №2 с 1,2 % агара HiMedia GM834A-500G предназначена для максимального восстановления требовательных патогенных микроорганизмов без подавления их гемолитических реакций. Среда используется для первичного выделения микроорганизмов из клинического материала (фекалии, моча, гной) и пищевых проб; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда является высокопитательной и предназначена для роста требовательных организмов, нуждающихся в дополнительных строительных молекулах для выживания. Микроорганизмы, вырабатывающие гемолизин, создают видимые зоны гемолиза на данной среде.

При добавлении соответствующих антибиотиков среда служит дифференциальной для выделения видов Brucella и Campylobacter. Для получения наиболее четких и надежных характеристик колоний и гемолиза рекомендуется использовать кровь овцы (по сравнению с кровью лошадей или кроликов).

Роль компонентов:

• Протеозопептон: источник азота.
• Экстракт печени (HL extract) и дрожжевой экстракт: источники углерода, витаминов, азота и аминокислот; усиливают рост и гемолитические реакции стрептококков и пневмококков.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.
• Кровь (5–10 %): обеспечивает дополнительные факторы роста и служит основой для определения гемолитических реакций.

Среда может быть использована для приготовления шоколадного агара (для изоляции Haemophilus и Neisseria) или для первичной изоляции Haemophilus с использованием крови лошади.

Методика приготовления и использования

Приготовление базовой среды

1. Суспендировать 19,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавить 7 % (об/об) стерильной дефибринированной крови.

Подготовка селективных вариантов

Для получения селективных сред добавить в 500 мл стерильной расплавленной основы регидратированное содержимое 1 флакона соответствующей добавки:

• Для видов Brucella: селективная добавка NPBCVN (FD005).
• Для видов Campylobacter: селективная добавка Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008) или минеральная добавка для роста (FD009).
• Для видов Streptococcus: селективная добавка NNP (FD031).

После добавления тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: гранулированная среда от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % стерильной дефибринированной крови: непрозрачный гель вишнево-красного цвета.
• Реакция: pH 7,4 ± 0,2 (для 4,0 % водного раствора при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 5 % (масс/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Ограничения и предостережения

• Для обнаружения гемолиза рекомендуется добавление крови овцы. Данная среда не поддерживает рост H. haemolyticus.
• Добавление крови лошади или кролика поддерживает рост H. haemolyticus, однако колонии напоминают бета-гемолитические стрептококки и требуют подтверждения.
• Характер гемолиза может варьироваться в зависимости от источника используемой крови.
• Культуры Brucella высокоинфекционны; работа с ними требует строгого соблюдения мер предосторожности. Рекомендуется инкубация в атмосфере с 5–10 % CO₂.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию.