HiMedia GM834A-500G Основа кровяного агара №2 с 1.2% агара

Гранулированная питательная среда HiMedia GM834A-500G Основа кровяного агара №2 с 1.2% агара предназначена для максимального выделения требовательных патогенных микроорганизмов без нарушения оценки гемолитических реакций. Среда применяется для анализа клинического материала и пищевых образцов, а добавление 7 % стерильной дефибринированной крови выполняют после охлаждения основы до 45–50 °C.

Назначение

Среда предназначена для выделения требовательных патогенных микроорганизмов с сохранением возможности визуальной оценки гемолиза. Основа также используется для приготовления шоколадного агара, первичного выделения видов Haemophilus и дифференциального культивирования видов Brucella и Campylobacter при добавлении соответствующих селективных добавок.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам рабочих характеристик.

# Эквивалент печёночного экстракта.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 19,75 г сухой гранулированной среды и суспендируйте в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 psi (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите расплавленную основу до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 7 % об./об. стерильной дефибринированной крови.
6. Для получения кровяного агара тщательно перемешайте среду и разлейте её в стерильные чашки Петри.

Добавление селективных добавок

Для видов Brucella добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) к 500 мл стерильной расплавленной основы.

Для видов Campylobacter добавьте восстановленное содержимое одного флакона одной из следующих добавок к 500 мл стерильной расплавленной основы:

• селективная добавка Blaser–Wang (FD006);
• селективная добавка Butzler (FD007);
• селективная добавка Skirrow (FD008);
• минеральная добавка для роста (FD009).

Для видов Streptococcus добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки NNP (FD031) к 500 мл стерильной расплавленной основы. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Требовательный микроорганизм характеризуется сложными пищевыми потребностями и нуждается в дополнительных молекулах — структурных компонентах клетки, необходимых для выживания.

Среда имеет высокую питательную ценность. Микроорганизмы, продуцирующие гемолизин, формируют на среде видимые зоны гемолиза. При добавлении различных антибиотических добавок среда также работает как дифференциальная среда для видов Brucella и Campylobacter.

Культуры Brucella обладают высокой инфекционностью и требуют осторожного обращения. Инкубацию предпочтительно проводить в атмосфере, содержащей 5–10 % углекислого газа.

Сравнительные исследования с использованием крови лошади, кролика и овцы показали, что овечья кровь обеспечивает наиболее чёткие и воспроизводимые характеристики колоний и гемолиза после 24 и 48 ч инкубации.

Среду можно применять для приготовления шоколадного агара при выделении видов Haemophilus и Neisseria. Среда также подходит для первичного выделения видов Haemophilus, если для обогащения используется лошадиная кровь. Для получения лучших результатов половину чашки с кровяным агаром на основе лошадиной крови рекомендуется обработать двумя каплями 10 % сапонина.

Экстракт HL и дрожжевой экстракт усиливают рост и гемолитические реакции требовательных микроорганизмов, включая стрептококки и пневмококки. Протеозный пептон служит источником азота. Экстракт HL и дрожжевой экстракт обеспечивают микроорганизмы необходимыми источниками углерода, витаминов, азота и аминокислот. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление крови в концентрации 5–10 % обеспечивает дополнительные факторы роста и позволяет определять гемолитические реакции. Характер гемолиза может изменяться в зависимости от источника животной крови и типа использованной основы.

Типы исследуемых образцов

• Клинический материал: фекалии, моча, гной.
• Пищевые образцы.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с материалом согласно установленным лабораторным руководствам.

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

• Для выявления гемолиза рекомендуется добавлять овечью кровь. Среда не поддерживает рост Haemophilus haemolyticus.
• Добавление лошадиной или кроличьей крови к основе поддерживает рост H. haemolyticus, однако культура может иметь сходство с β-гемолитическими стрептококками и требует подтверждения.
• Характер гемолиза зависит от источника использованной крови.

Контроль качества

Внешний вид

Гранулированная среда от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный гель светло-янтарного цвета, от прозрачного до слегка опалесцирующего.
• После добавления 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция

Реакция 4,0 % м/об. водного раствора при 25 °C.

pH: 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч с добавлением 5 % м/об. стерильной дефибринированной крови.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики