HiMedia GM643-500G Основа среды с минералами и модифицированным глутаматом

Гранулированная основа питательной среды HiMedia GM643-500G Основа среды с минералами и модифицированным глутаматом предназначена для приготовления среды двойной концентрации. Используется для количественного определения колиформных бактерий в пробах воды и сточных вод; масса упаковки — 500 г.

Назначение

Основа среды с минералами и модифицированным глутаматом двойной концентрации применяется для количественного определения колиформных бактерий в пробах воды и сточных вод.

Среда также используется для обогащения колиформных микроорганизмов, присутствующих в сыре и мясе. При исследовании воды среда применяется для хлорированной и нехлорированной воды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Первоначально для количественного определения колиформных бактерий в воде применялся бульон МакКонки. Folpmers описал химически определённую среду на основе глутаминовой кислоты для той же цели. Позднее Gray модифицировал эту среду добавлением лактозы, что уменьшило количество ложноположительных результатов по сравнению с бульоном МакКонки. Для улучшения газообразования в состав среды добавили хлорид аммония.

Среда с минералами и модифицированным глутаматом используется для количественного определения колиформных бактерий в воде. По данным методики, при исследовании проб воды среда давала меньше ложноположительных результатов по сравнению с бульоном МакКонки. Среда обеспечивает более быстрый рост колиформных бактерий и Escherichia coli по сравнению с рядом других сред.

В состав входят соли, аминокислоты и витамины. Лактоза является ферментируемым углеводом, а бромкрезоловый пурпурный — индикатором pH. Питательные компоненты обеспечивают большинство потребностей колиформных бактерий при их количественном определении в воде и сточных водах.

Пробирки с жёлтым окрашиванием, возникающим вследствие образования кислоты, и с газом, задержанным в перевёрнутых трубках Дюрхема, рассматриваются как предположительно положительные. Такие результаты необходимо подтверждать посевом в желчный бульон с бриллиантовым зелёным 2 % (GM121/M121) и проведением биохимических тестов.

Среда рекомендована APHA и применяется в методиках микробиологического исследования воды, сточных вод, сыра и мяса.

Методика приготовления

Среда двойной концентрации

1. Внесите 22,69 г части A и 12,7 г части B в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 5 г хлорида аммония.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения компонентов среды.
3. Разлейте приготовленную среду по пробиркам, содержащим перевёрнутые трубки Дюрхема.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 10 мин.

Среда одинарной концентрации

Для приготовления среды одинарной концентрации внесите 11,35 г части A и 6,35 г части B в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 2,5 г хлорида аммония. Далее приготовьте среду по той же процедуре: при необходимости нагрейте до полного растворения, разлейте по пробиркам с перевёрнутыми трубками Дюрхема и стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 10 мин.

Методика исследования проб воды

1. Для предположительно качественной воды внесите 50 мл пробы воды в 50 мл среды.
2. Дополнительно засевайте пять пробирок по 10 мл основы среды с минералами и модифицированным глутаматом (GM463/M643), добавляя в каждую пробирку по 10 мл пробы воды.
3. Для более загрязнённой воды засевайте пять пробирок по 5 мл среды одинарной концентрации. В каждую пробирку внесите по 1 мл пробы, предварительно разведённой в соотношении 1:10.
4. Инкубируйте пробирки при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
5. Пробирки с жёлтым окрашиванием, обусловленным образованием кислоты, и пузырьками газа в трубках Дюрхема расценивайте как предположительно положительные.
6. Подтвердите положительные результаты посевом в желчный бульон с бриллиантовым зелёным 2 % (GM121/M121) и проведением биохимических тестов.
7. Индекс наиболее вероятного числа (MPN) на 100 мл пробы воды рассчитывайте по таблице MPN.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: гранулированная среда светло-жёлтого или зелёного цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция указана для смеси, содержащей 2,27 % (масса/объём) части A, 1,27 % (масса/объём) части B и 0,5 % (масса/объём) хлорида аммония, при 25 °C.

• pH: 6,7 ± 0,2.
• pH: 6,50–6,90.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа.
• Масса: 500 г.
• Температура: 10–30 °C.
• Конечный pH приготовленной среды при 25 °C: 6,7 ± 0,2.
• Допустимый диапазон pH: 6,50–6,90.

Условия хранения и срок годности

• Сухую среду хран