HiMedia GM641I-500G MRS агар (агар для лактобацилл), гранулированный

Питательная среда HiMedia GM641I-500G MRS агар (агар для лактобацилл), гранулированный, производства HiMedia, с конечным значением pH 5,7 ± 0,2. Среда предназначена для культивирования лактобацилл из образцов воды, пищевых и молочных продуктов; инкубацию проводят при 35–37 °C в течение 18–24 ч, при необходимости дольше, в атмосфере с 5 % CO₂.

Назначение и область применения

MRS-агар предназначен для выделения и культивирования лактобацилл из проб воды, пищевых и молочных продуктов, а также других источников.

Типы образцов:

• пробы воды;
• пищевые продукты;
• молочные продукты.

Среда MRS основана на рецептуре de Man, Rogosa и Sharpe с небольшими изменениями. Рецептура рекомендована комитетом ISO; состав по спецификации ISO 13721:1995(E) приведён ниже.

Состав

Состав по спецификации ISO 13721:1995(E)

Гранулированный агар MRS для лактобацилл GM6411

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия параметрам эффективности. Пептон HM B эквивалентен мясному экстракту.

Методика приготовления среды

1. Взвесьте 65,13 г сухой среды — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л.
2. Суспендируйте навеску в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Среда поддерживает обильный рост лактобацилл, выделенных из молочных продуктов, пищевых продуктов и других источников.

• Пептон и пептон HM B обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими необходимыми питательными веществами.
• Дрожжевой экстракт служит источником витаминов группы B.
• Глюкоза является сбраживаемым углеводом и источником энергии.
• Полисорбат 80 обеспечивает жирные кислоты, необходимые для метаболизма лактобацилл.
• Ацетат натрия и цитрат аммония подавляют стрептококки, плесневые грибы и многие другие микроорганизмы.
• Фосфаты обеспечивают буферное действие среды.

Лактобациллы являются микроаэрофильными микроорганизмами и обычно требуют послойного культивирования при аэробном выращивании на плотной среде. После застывания среды на поверхность наливают дополнительный слой незасеянного MRS-агара, формируя послойную чашку. Лактобациллы, выделенные на MRS-агаре, необходимо дополнительно подтверждать биохимическими тестами.

Сбор и обработка образцов

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям.

Для пищевых и молочных продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости инкубацию продолжают дольше. Условия инкубации: 5 % CO₂.

Обозначения:

• (*) — рост в анаэробных условиях в течение 72 ч;
• ^ — ранее обозначался как Lactobacillus plantarum.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет гранулированной среды: от кремового до светло-жёлтого.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель от средне- до тёмно-янтарного цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция среды

Реакцию определяют для 6,51%-ного водного раствора при 25 °C.

• Значение pH: 5,7 ± 0,2.
• Диапазон pH: 5,50–5,90.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 2–8 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Температура хранения после получения: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии.
• Из-за гигроскопичности продукта при недостаточно плотной укупорке возможно образование комков.
• Храните среду в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Эффективность среды обеспечивается при использовании в течение указанного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории и стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами. Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Для полной идентификации микроорганизмов требуются дополнительные биохимические тесты.
2. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать вариабельные характеристики роста на этой среде.

Оценка эффективности

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при