Дифференциальная питательная среда «Основа желточного агара с полимиксином MYP для выделения стафилококков и бацилл HiMedia GM636-500G (уп/500 гр)» — гранулированная основа с феноловым красным для приготовления селективной среды. Применяется для выделения и идентификации патогенных стафилококков и видов Bacillus, включая Bacillus cereus, при добавлении полимиксина B и эмульсии яичного желтка.

Назначение

Основа желточного агара MYP с полимиксином и феноловым красным предназначена для выделения и идентификации клинически значимых стафилококков и бацилл. Среда применяется для анализа клинических, пищевых и водных образцов.

Среда MYP предложена Mossel и соавторами и рекомендована Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для выделения и количественного определения Bacillus cereus в пищевых продуктах. Bacillus cereus может присутствовать в почве, растительности, воде и пыли, а также выделяться из овощей, мяса, зерновых продуктов, пастеризованного и сухого молока и других обработанных пищевых продуктов.

Состав

Состав, г/л:

Экстракт HM эквивалентен мясному экстракту.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия установленным рабочим характеристикам.

Принцип действия и интерпретация

При благоприятных условиях Bacillus cereus размножается в пищевых продуктах и может вызывать желудочно-кишечные заболевания. Бактерия связана с двумя формами пищевого отравления:

• рвотной формой, обусловленной высокостабильным токсином, сохраняющим активность при высокой температуре, воздействии трипсина, пепсина и экстремальных значениях pH;
• диарейной формой, обусловленной термо- и кислотолабильным энтеротоксином.

Ключевой реакцией дифференциальной идентификации Bacillus cereus от большинства других видов Bacillus является лецитиназная активность. При наличии лецитиназной активности предполагаемую идентификацию Bacillus cereus подтверждают по морфологии колоний, гемолитической активности и результатам тестов на подвижность.

Дифференциация на среде MYP основана на следующих признаках:

• лецитиназная активность;
• ферментация маннита;
• устойчивость к полимиксину B;
• морфология колоний;
• способность к спорообразованию.

Пептон и экстракт HM служат источниками азота. Ферментация маннита выявляется по изменению окраски фенолового красного: образование кислых продуктов ферментации окрашивает колонии, ферментирующие маннит, в жёлтый цвет. Добавленная эмульсия яичного желтка позволяет выявлять лецитиназную активность: вокруг лецитиназоположительных колоний формируется зона белого непрозрачного преципитата.

Селективная добавка PolyB (FD003), содержащая полимиксин B, ограничивает рост грамотрицательных бактерий, включая Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa. Среда позволяет дифференцировать Bacillus cereus от других видов Bacillus по неспособности ферментировать маннит и слабому спорообразованию. Bacillus cereus расщепляет компоненты яичного желтка и формирует типичные колонии бациллярной формы.

Методика приготовления среды

1. Взвесить 23,01 г основы.
2. Суспендировать основу в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизовать автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладить среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавить регидратированное содержимое одного флакона стерильного раствора селективной добавки PolyB (FD003) до конечной концентрации 100 единиц/мл.
7. Добавить 50 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045).
8. Тщательно перемешать.
9. Разлить среду в стерильные чашки Петри.

Готовая среда с добавленной эмульсией яичного желтка и полимиксином B используется для посева и последующей инкубации образцов.

Типы исследуемых образцов

• Клинические образцы: фекалии.
• Пищевые образцы.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с материалом в соответствии с установленными руководствами.

Для пищевых образцов необходимо соблюдать соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

Для образцов воды необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры безопасности

• Среда предназначена для лабораторной диагностики вне организма.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера необходимо ознакомиться с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами необходимо использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности, предусмотренные установленными руководствами.
• При работе необходимо соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковую интенсивность и характер роста на среде.
2. При наличии лецитиназной активности у неизвестного изолята предполагаемую идентификацию Bacillus cereus необходимо проводить дополнительно по морфологии колоний, гемолитической активности и подвижности.
3. При ферментации маннита микроорганизмами, не относящимися к Bacillus cereus, возможно диффузное пожелтение среды, затрудняющее дифференциацию колоний по цвету. В таком случае ферментацию маннита рекомендуется проверять у чистой культуры на свежей среде.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: диагностический.
• Назначение изделия: основа.
• Масса упаковки: 500 г.
• Форма выпуска: непрозрачный водоотталкивающий пластиковый флакон с навинчивающимся колпачком и внутренней крышкой.
• Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий гранулированный порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.
• Растворимость: гранулы легко растворяются при нагревании до кипения.
• Реакция раствора: реакция 4,6 % масс./об. водного раствора при 25 °C.
• Конечное значение pH: 7,1 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,90–7,30.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность базовой готовой среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Цвет и прозрачность среды после добавления эмульсии яичного желтка FD045: светло-оранжевый непрозрачный гель в чашках Петри.
• Условия хранения сухой основы: 10–30 °C; в оригинальном описании каталога также указано хранение при температуре ниже +25 °C.
• Условия хранения готовой среды: +2…8 °C.
• Регистрационное удостоверение: ФСЗ 2009/03709.
• Регистрация: зарегистрировано в Росздравнадзоре Российской Федерации.

Контроль качества

Внешний вид

Сухая среда представляет собой гранулированный материал от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность готовой среды

• Базовая среда: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• После добавления эмульсии яичного желтка FD045: в чашках Петри