Основа бульона Жиолиотти-Кантони HiMedia GM584-500G (уп/500 гр)

Элективная питательная среда «Основа бульона Жиолиотти-Кантони HiMedia GM584-500G (уп/500 гр)» производства HiMedia — гранулированная основа для приготовления жидкой среды. Используется для селективного обогащения и выявления Staphylococcus aureus в пищевых продуктах, включая сухое молоко и детское питание; теллурит калия добавляется отдельно.

Назначение и область применения

Основа бульона Жиолиотти–Кантони применяется для выделения небольшого количества стафилококков из пищевых продуктов. Среда рекомендована для выявления Staphylococcus aureus в сухом молоке, детском питании и других пищевых продуктах, в которых стафилококк должен отсутствовать в 1 г образца.

Среда используется как обогатительная при микробиологическом контроле:

• сухого детского молока;
• продуктов питания для детей;
• молочных продуктов;
• мяса и мясных продуктов;
• других пищевых продуктов.

Методика также рекомендована Международной молочной федерацией (IDF) и Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для выявления Staphylococcus aureus в сухом молоке и других пищевых продуктах. Для исследования мяса и мясных продуктов среда рекомендована комитетом ISO.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных характеристик эффективности среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Ферментативный гидролизат казеина, дрожжевой и мясной экстракты служат источниками углерода, азота, витаминов, минеральных веществ и витаминов группы B.

• Маннит и пируват натрия действуют как стимуляторы роста Staphylococcus aureus, что позволяет выявлять микроорганизм при низком содержании клеток в образце.
• Хлорид лития подавляет рост грамотрицательных лактозоферментирующих бактерий.
• Теллурит калия и глицин подавляют рост грамположительных палочек.
• Покрытие засеянной среды стерильным парафиновым воском подавляет рост микрококков за счёт создания анаэробных условий.

Концентрацию теллурита калия уменьшают в зависимости от массы исследуемой пробы — 0,1–0,01 г.

Почернение среды, обычно в нижней части пробирки, в течение 48 ч указывает на присутствие Staphylococcus aureus. Материал из почерневшей среды высевают штриховым методом на агар Бэйрд–Паркера (GM043/M043). Staphylococcus aureus на этом агаре образует чёрные колонии, окружённые прозрачными зонами.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 54,2 г сухой гранулированной основы в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Осторожно нагрейте суспензию до полного растворения среды.
3. Разлейте по 19 мл в пробирки размером 20 × 200 мм.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа или 1,03 бар) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Быстро охладите среду до комнатной температуры.
6. В асептических условиях добавьте в каждую пробирку по 0,3 мл 3,5%-ного раствора теллурита калия FD047.
7. Для исследования мяса и мясных продуктов добавьте по 0,03 мл 3,5%-ного раствора теллурита калия FD047 в каждую пробирку.
8. Перед использованием тщательно перемешайте среду.

Среду следует засевать сразу после охлаждения после стерилизации. При хранении охлаждённая среда насыщается кислородом; если посев выполняется позднее, для удаления поглощённого кислорода пробирки выдерживают в свободно проходящем паре в течение 15–20 мин.

Методика проведения анализа

1. Внесите 1 г исследуемого образца или 1 мл подходящего разведения образца в 19 мл бульона Жиолиотти–Кантони. Подготовьте два параллельных посева.
2. Покройте поверхность среды 5 мл расплавленного стерильного парафинового воска.
3. Инкубируйте при 37 °C в течение 24–48 ч.
4. Осматривайте пробирки ежедневно.
5. При почернении среды, особенно в нижней части пробирки, выполните пересев на агар Бэйрд–Паркера (GM043/M043).
6. Оцените наличие чёрных колоний и прозрачных зон вокруг них.

В исходном описании применения для создания анаэробных условий также указано добавление стерильного вазелинового масла поверх засеянной среды.

Добавка теллурита калия

Теллурит калия не входит в состав основы и добавляется отдельно для усиления селективных свойств среды.

Совместимая добавка:

• FD047 — 3,5%-ный раствор теллурита калия, 5 флаконов по 10 мл.

Концентрацию теллурита калия необходимо уменьшать в соответствии с массой исследуемого образца — 0,1–0,01 г.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: гранулированная однородная сыпучая среда светло-жёлтого или коричневато-жёлтого цвета.

Внешний вид приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: янтарный цвет, прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакция 5,42%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,9 ± 0,2.

Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч с добавлением 3,5%-ного раствора теллурита калия FD047.

Ограничения и меры предосторожности

• Хлорид лития вреден для здоровья.
• Избегайте контакта с кожей и вдыхания паров.
• При попадании на кожу немедленно промойте поражённый участок большим количеством воды.
• Теллурит калия FD047 не входит в состав основы и должен добавляться отдельно.
• При позднем внесении посевного материала после стерилизации может потребоваться удаление поглощённого кислорода выдерживанием пробирок в свободно проходящем паре 15–20 мин.
• Приготовленную сред