Основа дифференциального усиленного бульона для выделения клостридий HiMedia GM549-500G (уп/500 гр)

Питательная среда — основа дифференциального усиленного бульона для выделения клостридий HiMedia GM549-500G (уп/500 гр) в гранулированной форме. Применяется для культивирования, дифференциации и подсчёта сульфитредуцирующих клостридий в пищевых продуктах и воде пробирочным методом; положительная реакция сопровождается почернением среды.

Назначение и область применения

Основа предназначена для приготовления дифференциального усиленного клостридиального бульона, выделения сульфитредуцирующих клостридий из пищевых продуктов и их количественного определения в воде методом наиболее вероятного числа (МВЧ) с использованием многопробирочного метода.

Среда применяется для:

• культивирования и подсчёта сульфитредуцирующих клостридий в пищевых продуктах;
• культивирования и подсчёта сульфитредуцирующих клостридий в воде пробирочным методом;
• выделения и дифференциации видов Clostridium;
• получения повышенного выхода клостридий при работе с небольшим посевным материалом;
• развития вегетативных клеток при исследованиях Clostridium perfringens.

Принцип действия и интерпретация

Дифференциация основана на способности сульфитредуцирующих клостридий восстанавливать сульфит до сульфида. Сульфид взаимодействует с ионами железа, в результате чего образуется чёрное окрашивание среды и чёрный осадок.

Пептический перевар животной ткани, говяжий экстракт, дрожжевой экстракт, крахмал и ацетат натрия обеспечивают питательные вещества, необходимые для бактериального метаболизма. Глюкоза является ферментируемым углеводом и служит источником углерода и энергии. Гидрохлорид L-цистеина выполняет функцию восстановителя. Компонентный состав также обеспечивает связывание перекисных соединений, токсичных для анаэробных микроорганизмов.

Сульфит натрия и цитрат железа добавляют как индикаторную систему. Сульфитредуцирующие клостридии образуют сульфид из сульфита, что приводит к почернению среды.

Среда Differential Reinforced Clostridial Medium первоначально была описана для запуска роста из небольшого посевного материала и получения более высокого количества клостридий. В дальнейшем среду применяли для развития вегетативных клеток при исследованиях Clostridium perfringens. Differential Reinforced Clostridial Broth используют для определения количества сульфитредуцирующих бактерий методом наиболее вероятного числа.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности среды.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 29 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Непосредственно перед использованием добавьте свежеприготовленный сульфит-восстанавливающий раствор.
5. Тщательно перемешайте и разлейте приготовленную среду в требуемом объёме.

Приготовление сульфит-восстанавливающего раствора

Отдельно приготовьте:

• 4 % масс./об. раствор сульфита натрия;
• 7 % масс./об. раствор цитрата железа.

Оба раствора профильтруйте для стерилизации. Перед добавлением в среду смешайте равные объёмы растворов. Полученную смесь используют для сред одинарной или двойной концентрации.

Объёмы добавления раствора

• Среда одинарной концентрации: к 25 мл среды добавьте 0,5 мл стерильного сульфит-восстанавливающего раствора.
• Среда двойной концентрации: к 10 мл среды добавьте 0,4 мл стерильного сульфит-восстанавливающего раствора.
• Для объёма 50 мл добавьте 2,0 мл стерильного сульфит-восстанавливающего раствора.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: гранулированная среда кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой светло-жёлтый прозрачный раствор без осадка.

Реакция среды

Реакция 2,9 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробной атмосфере с добавлением 4 % масс./об. раствора сульфита натрия и 7 % масс./об. раствора цитрата железа после инкубации при 30–35 °C в течение 1 недели.

Технические характеристики

• Тип питательной среды: дифференциальная
• Назначение изделия: основа
• Физическая форма: гранулы
• Внешний вид: однородный сыпучий порошок жёлтого цвета
• Происхождение компонентов: животное
• Конечное значение pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40
• Масса упаковки: 0,5 кг
• Срок годности: 4 года
• Регистрационный документ: ФСЗ 2009/03709

Хранение

• Условия хранения сухой основы: при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Условия хранения приготовленной среды: +2…+8 °C.
• Использование: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Упаковка: непрозрачный водоотталкивающий пластиковый флакон с навинчивающимся колпачком и внутренней крышкой.
• Материал упаковки: ПЭВП (полиэтилен высокой плотности).
• Маркировка: этикетка на русском языке.
• Регистрация: зарегистрировано в Министерстве