Агар с эозином и метиленовым синим (EMB) HiMedia GM317-500G (уп/500 гр)

Дифференциальная питательная среда Агар с эозином и метиленовым синим (EMB) HiMedia GM317-500G (уп/500 гр) — гранулированный агар для выделения и дифференциации грамотрицательных кишечных палочек. Среда применяется для клинических и не­клинических образцов, включая фекалии, мочу, пищевые продукты и воду, при этом выделенные колонии требуют подтверждения дополнительными тестами.

Назначение

Среда предназначена для дифференциального выделения грамотрицательных кишечных палочек из клинических и неклинических образцов.

Тип питательной среды: дифференциальная
Назначение изделия: агар
Форма выпуска: гранулированная среда
Происхождение: животное
Сертификат: ФСЗ 2009/03705
Регистрация: зарегистрировано в Министерстве здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Область применения

Среда используется для анализа следующих типов образцов:

• клинические образцы, включая фекалии и мочу;
• пищевые продукты;
• вода.

Тестируемый образец можно непосредственно высевать штрихом на чашки с готовой средой. Инокулированные чашки следует инкубировать в защищённом от света месте. Для получения изолированных колоний необходимо соблюдать стандартные процедуры посева и инкубации.

Одновременно с EMB-агаром рекомендуется инокулировать неселективную питательную среду. Для идентификации выделенных колоний необходимо провести подтверждающие тесты.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Агар с эозином и метиленовым синим (EMB) первоначально разработан Holt-Harris и Teague, а затем модифицирован Levine. Используемая формула объединяет формулы Levine и Holt-Harris и Teague: содержит пептон и фосфат в соответствии с рекомендациями Levine, а также два углевода, предложенные Holt-Harris и Teague.

Функции компонентов среды:

• пептон служит источником углерода, азота и других необходимых питательных веществ;
• лактоза и сахароза являются источниками энергии как ферментируемые углеводы;
• эозин Y и метиленовый синий выполняют функцию дифференцирующих индикаторов;
• фосфат выполняет буферную функцию.

Метиленовый синий и эозин Y в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий. Красители одновременно служат дифференцирующими индикаторами ферментации углеводов. Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1.

Сахароза добавлена в качестве альтернативного источника углеводов для типичных грамотрицательных палочек, которые иногда не ферментируют лактозу или ферментируют её медленно.

При снижении pH колиформные микроорганизмы образуют лилово-чёрные колонии вследствие поглощения комплекса красителей метиленового синего и эозина. Комплекс красителей сорбируется колонией.

Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды в результате окислительного дезаминирования белка. Это приводит к растворению комплекса метиленовый синий — эозин и образованию бесцветных колоний.

Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего. Рост отдельных микроорганизмов на среде может различаться в зависимости от их индивидуальных питательных потребностей.

Методика приготовления среды

1. Взвесить 35,96 г среды и суспендировать в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешать до получения однородной суспензии.
3. Нагреть до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизовать автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Не допускать перегрева.
6. Охладить среду до 45–50 °C.
7. Встряхнуть среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления его синего цвета, и суспендирования хлопьевидного осадка.

Если EMB-агар инокулируют в тот же день, среду допускается использовать без автоклавирования.

Пробоподготовка и обращение с образцами

• Для клинических образцов необходимо применять соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.
• Для пищевых образцов необходимо соблюдать соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам.
• Для образцов воды необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Физические характеристики

Физическая форма: гранулы
Внешний вид сухой среды: от светло-розовой до лиловой гранулированной среды
Внешний вид по данным каталога: однородный сыпучий светло-лиловый порошок
Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем
Цвет и прозрачность готовой среды: красновато-лиловый опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком; в чашках Петри образуется мелкодисперсный осадок
Реакция: реакция 3,6%-ного водного раствора при 25 °C
pH по контролю качества: 7,00–7,40
Конечное значение pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (ПНД, HDPE)

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее вид назывался Enterobacter aerogenes.

Каждая партия среды проверяется на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа. Перед применением для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, пользователю рекомендуется валидировать среду с учётом требований конкретной методики.

Хранение и срок годности

Сухую среду необходимо хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

После вскрытия флакон следует плотно закрыть и хранить в сухом виде, чтобы предотвратить комкование вследствие гигроскопичности продукта. Неправильное хранение может